Este protocolo foi desenvolvido para permitir que as medidas de dosimetria sejam realizadas o mais próximo possível das condições reais de irradiação celular para estudos radiobiológicos. Com este protocolo, podemos determinar a dose exata recebida pelas células tornando-a aplicável a muitas instalações de raio-x e pode levar em conta todos os parâmetros e traduzir para dosimetria. Todos os parâmetros de irradiação devem ser configurados a montante para permitir uma aquisição ideal da medida de dosimetria que requer uma estreita colaboração entre físicos e radiobiólogos.
Para realizar uma avaliação de campo de irradiação, coloque um filme de dosimetria auto-desenvolvido no suporte usado para irradiação e irradie o filme com pelo menos dois cinzas para obter um campo de irradiação bem marcado. Escaneie o filme de dosimetria auto-desenvolvido usando um scanner dedicado e use o perfil de análise e plotagem para traçar o perfil da dose no ImageJ. Em seguida, marque a superfície de suporte à irradiação para garantir que o recipiente celular seja colocado na posição correta.
Para realizar uma medição da taxa de dose, coloque um recipiente celular modificado no compartimento de suporte de irradiação e coloque a câmara de ionização no recipiente na posição correta de acordo com as marcas feitas na superfície de suporte. Confirme que todos os parâmetros de irradiação foram adequadamente definidos e pré-irradiram a câmara de ionização por cinco minutos. Zero o eletrometro e obtenha medições de 10 minutos.
Em seguida, use a fórmula para determinar a taxa média de dose no kerma de ar. Número todos os filmes para sua identificação a jusante. Pelo menos 24 horas antes da irradiação, corte pedaços de filme de dosimetria auto-desenvolvido de acordo com o tamanho do recipiente celular.
Para construir uma curva de calibração, reserve três peças de filme para os controles não irradiados e coloque o primeiro filme dentro do recipiente celular. Em seguida, irradie o filme para obter o primeiro ponto de dose. Quando todos os filmes foram irradiados em triplicado nas doses selecionadas apropriadas, uma curva de calibração pode ser gerada.
Para medir a atenuação e dispersão do meio da cultura celular, selecione o mesmo tempo de irradiação para todas as irradiações e irradie três peças de filmes de dosimetria auto-desenvolvido no recipiente sem água. Em seguida, coloque um único pedaço de filme no recipiente e encha o recipiente com o mesmo volume de água que o volume de meio que será irradiado. Usando pequenos pedaços de fita conforme necessário, posicione o recipiente dentro do compartimento.
Quando a irradiação estiver completa, seque os filmes com papel absorvente e armazene os filmes protegidos da luz. 24 horas após sua irradiação, no scanner, defina o formato TIFF como azul verde vermelho de 48 bits e o modo de transmissão para 150 pontos por polegada e selecione nenhuma correção de imagem. Para aquecer o scanner, coloque uma película não irradiada no scanner e inicie uma prévia da varredura.
No final da pré-visualização, inicie um temporizador e espere 30 segundos antes de iniciar a varredura. No final do exame, inicie um temporizador de 90 segundos. Ao mesmo tempo, registre a digitalização e abra a imagem no ImageJ.
Rastreie uma região quadrada de interesse dentro da varredura e meça o nível médio de pixel vermelho da área. Ao final dos 90 segundos, repita a visualização da varredura pelo menos 30 vezes para aquecer e estabilizar o scanner. Uma vez estabilizado o scanner, coloque um filme no centro da cama do scanner e inicie uma prévia da varredura.
Espere 30 segundos antes de iniciar a varredura. No final da varredura, espere 90 segundos antes de iniciar a próxima varredura. Foram então realizadas medições para estimar a espessura do atenuante e foram testadas as diferentes espessuras atenuadores para encontrar a espessura que diminuiu a intensidade do feixe em um fator de dois.
Quando essa espessura foi determinada, foram tomadas cinco medidas para avaliar o valor médio do mRAW corrigido pelo fator de correção da temperatura e da pressão. Para esta configuração, foi encontrada uma camada de meio valor de 0,667 milímetros de cobre. Nesta análise representativa, um filme de dosimetria auto-desenvolvido foi irradiado para determinar a superfície em que o campo de irradiação é homogêneo, permitindo a correta colocação do recipiente celular.
Para determinar a dose exata das células, a taxa de dose de kerma de ar medido foi convertida em carma de água usando a razão do coeficiente médio de absorção de energia de massa para água ao ar avaliado sobre o espectro de fluência de fótons, que para esta análise foi determinado ser de 0,659 cinzas por minuto. Nesta cultura celular, a atenuação média e a análise de dispersão, os filmes radiocrômicos de dosimetria auto-desenvolvido foram calibrados pela primeira vez entre zero e três cinzas com 0,25 passos cinzentos entre zero e um cinza e 0,5 passos cinza entre um e três cinzas. Os pontos de dose foram então equipados com uma curva polinomial de quarto grau.
Aqui, pode-se observar uma tabela representativa usada para a medição diária. Certifique-se de que todos os parâmetros de configuração sejam respeitados, que a taxa de do faz seja medida dentro do recipiente celular certo e que a influência do meio de cultura celular seja avaliada. Existem vários protocolos para estabelecer uma medição de referência de dose.
O ponto chave é selecionar o protocolo apropriado para uma aplicação específica, especialmente quando se usa instalações de raio-x baixo.
