وقد وضع هذا البروتوكول للسماح بإجراء قياسات قياس الجرعات في أقرب وقت ممكن إلى ظروف تشعيع الخلايا الحقيقية للدراسات البيولوجية الإشعاعية. مع هذا البروتوكول، يمكننا تحديد الجرعة الدقيقة التي تتلقاها الخلايا مما يجعلها قابلة للتطبيق على العديد من مرافق الأشعة السينية ويمكن أن تأخذ في الاعتبار جميع المعلمات وترجمتها إلى قياس الجرعات. يجب إعداد جميع معلمات التشعيع في المنبع للسماح بالاستحواذ الأمثل على قياس قياس الجرعات الذي يتطلب تعاونا وثيقا بين الفيزيائيين وعالم الأحياء الإشعاعية.
لإجراء تقييم ميداني للإشعاع ، ضع فيلم قياس الجرعات ذاتي التطوير على الدعم المستخدم للتشعيع وإشعاع الفيلم مع اثنين على الأقل من الرمادي للحصول على حقل تشعيع ملحوظ جيدا. قم بمسح فيلم قياس الجرعات ذاتي التطوير باستخدام ماسح ضوئي مخصص واستخدم التحليل ورسم الملف الشخصي لرسم ملف تعريف الجرعة في ImageJ. بعد ذلك، ضع علامة على سطح دعم الإشعاع لضمان وضع حاوية الخلية في الموضع الصحيح.
لإجراء قياس معدل الجرعة، ضع حاوية خلايا معدلة في حاوية دعم الإشعاع ووضع غرفة التأين في الحاوية في الموضع الصحيح وفقا للعلامات التي تم إجراؤها على سطح الدعم. تأكد من أن جميع معلمات التشعيع قد تم تعيينها بشكل مناسب وتشعيع غرفة التأين لمدة خمس دقائق. صفر المقياس الكهربائي والحصول على 10 قياسات دقيقة واحدة.
ثم، استخدم الصيغة لتحديد متوسط معدل الجرعة في كيرما الهواء. عدد جميع الأفلام لتحديدها المصب. قبل 24 ساعة على الأقل من التشعيع ، وقطع قطعة من فيلم قياس الجرعات الذاتي النمو وفقا لحجم حاوية الخلية.
لبناء منحنى المعايرة، خصص ثلاث قطع من الفيلم للضوابط غير المشععة ووضع أول فيلم داخل حاوية الخلية. ثم تشعيع الفيلم للحصول على نقطة الجرعة الأولى. عندما يتم تشعيع جميع الأفلام في ثلاث نسخ بالجرعات المحددة المناسبة ، يمكن إنشاء منحنى معايرة.
لقياس توهين وتشتت زراعة الخلايا، حدد نفس وقت التشعيع لجميع التشعيعات وإشعاع ثلاث قطع من أفلام قياس الجرعات ذاتية التطور في الحاوية بدون ماء. بعد ذلك ، ضع قطعة واحدة من الفيلم في الحاوية وملء الحاوية بنفس حجم الماء مثل حجم الوسط الذي سيتم تشعيعه. باستخدام قطع صغيرة من الشريط حسب الضرورة، ضع الحاوية داخل الحاوية.
عندما يكتمل التشعيع، قم بتجفيف الأفلام بورق ماصة وتخزين الأفلام المحمية من الضوء. بعد 24 ساعة من تشعيعها ، على الماسح الضوئي ، قم بتعيين تنسيق TIFF إلى اللون الأخضر الأحمر 48 بت ووضع الإرسال إلى 150 نقطة لكل بوصة وحدد أي تصحيح للصورة. لتسخين الماسح الضوئي، ضع فيلما غير مشع على الماسح الضوئي واطلق معاينة للمسح الضوئي.
في نهاية المعاينة، قم بتشغيل مؤقت وانتظر 30 ثانية قبل بدء الفحص. في نهاية الفحص، ابدأ جهاز ضبط وقت لمدة 90 ثانية. في الوقت نفسه، قم بتسجيل المسح الضوئي وفتح الصورة في ImageJ.
تتبع منطقة مربعة ذات أهمية داخل المسح الضوئي وقياس متوسط مستوى البكسل الأحمر للمنطقة. في نهاية 90 ثانية، كرر معاينة المسح الضوئي 30 مرة على الأقل لتسخين الماسح الضوئي وتثبيته. بمجرد استقرار الماسح الضوئي ، ضع فيلما في وسط سرير الماسح الضوئي وأطلق معاينة للمسح الضوئي.
انتظر 30 ثانية قبل بدء الفحص. في نهاية الفحص، انتظر 90 ثانية قبل بدء الفحص التالي. ثم أجريت قياسات لتقدير سمك الموهون وتم اختبار مختلف سماكة الموهون للعثور على السماكة التي خفضت كثافة الحزمة بعامل اثنين.
وعندما تم تحديد هذه السماكة، تم أخذ خمسة قياسات لتقييم متوسط قيمة ال mRAW التي تم تصحيحها بواسطة عامل تصحيح درجة الحرارة والضغط. لهذا التكوين، تم العثور على طبقة نصف القيمة من 0.667 ملليمتر من النحاس. في هذا التحليل التمثيلي، تم تشعيع فيلم قياس الجرعات ذاتي التطور لتحديد السطح الذي يكون فيه حقل الإشعاع متجانسا، مما يسمح بوضع حاوية الخلية بشكل صحيح.
لتحديد الجرعة الدقيقة للخلايا، تم تحويل معدل جرعة كيرما الهواء المقاسة إلى كارما المياه باستخدام نسبة معامل امتصاص الطاقة الشامل المتوسط للمياه إلى الهواء تقييمها على الطيف الفوتون الطلاقة، والتي لهذا التحليل تقرر أن يكون 0.659 الرمادية في الدقيقة الواحدة. في هذه الثقافة الخلية متوسطة التوهين وتحليل التشتت، تم معايرة الأفلام قياس الجرعات ذاتية التطور أولا بين صفر وثلاثة رماديات مع 0.25 خطوات رمادية بين صفر ورمادي واحد و 0.5 خطوات رمادية بين واحد وثلاثة رماديات. ثم تم تركيب نقاط الجرعة مع منحنى متعدد الحدود من الدرجة الرابعة.
هنا، يمكن ملاحظة جدول تمثيلي يستخدم للقياس اليومي. تأكد من أن يتم احترام كافة معلمات التكوين، أن يتم قياس معدل لا داخل حاوية الخلية اليمنى، وأن يتم تقييم تأثير الوسط ثقافة الخلية. وتوجد عدة بروتوكولات لوضع قياس مرجعي للجرعة.
النقطة الأساسية هي تحديد البروتوكول المناسب لتطبيق معين ، خاصة عند استخدام مرافق الأشعة السينية المنخفضة.
