Ce protocole a été développé pour permettre d’effectuer des mesures de dosimétrie aussi près que possible des conditions réelles d’irradiation cellulaire pour les études radiobiologiques. Avec ce protocole, nous pouvons déterminer la dose exacte reçue par les cellules, ce qui le rend applicable à de nombreuses installations de radiographie et peut prendre en compte tous les paramètres et traduire en dosimétrie. Tous les paramètres d’irradiation doivent être fixés en amont pour permettre une acquisition optimale de la mesure de dosimétrie nécessitant une étroite collaboration entre physiciens et radiobiologistes.
Pour effectuer une évaluation sur le terrain d’irradiation, placez un film de dosimétrie auto-développement sur le support utilisé pour l’irradiation et irradiez le film avec au moins deux gris pour obtenir un champ d’irradiation bien marqué. Scannez le film de dosimétrie auto-développement à l’aide d’un scanner dédié et utilisez l’analyse et le profil de l’intrigue pour tracer le profil de dose dans ImageJ. Ensuite, marquez la surface de soutien à l’irradiation pour vous assurer que le contenant de la cellule sera placé dans la bonne position.
Pour effectuer une mesure du taux de dose, placez un contenant cellulaire modifié dans l’enceinte de soutien à l’irradiation et placez la chambre d’ionisation dans le récipient dans la bonne position selon les marques faites sur la surface de soutien. Confirmez que tous les paramètres d’irradiation ont été correctement définis et pré-irradier la chambre d’ionisation pendant cinq minutes. Zéro l’électromètre et obtenir 10 mesures d’une minute.
Ensuite, utilisez la formule pour déterminer le taux moyen de dose dans le kerma d’air. Numérotez tous les films pour leur identification en aval. Au moins 24 heures avant l’irradiation, couper des morceaux de film de dosimétrie auto-développement en fonction de la taille du récipient cellulaire.
Pour construire une courbe d’étalonnage, mettez de côté trois morceaux de film pour les commandes non irradiées et placez le premier film à l’intérieur du récipient cellulaire. Puis, irradier le film pour obtenir le premier point de dose. Lorsque tous les films ont été irradiés en triplicate aux doses sélectionnées appropriées, une courbe d’étalonnage peut être générée.
Pour mesurer l’atténuation et la diffusion moyennes de la culture cellulaire, sélectionnez le même temps d’irradiation pour toutes les irradiations et irradiez trois morceaux de films de dosimétrie auto-développement dans le récipient sans eau. Ensuite, placez un seul morceau de film dans le récipient et remplissez le récipient avec le même volume d’eau que le volume de milieu qui sera irradié. À l’aide de petits morceaux de ruban adhésif au besoin, placez le contenant à l’intérieur de l’enceinte.
Lorsque l’irradiation est terminée, séchez les films avec du papier absorbant et stockez les films protégés de la lumière. 24 heures après leur irradiation, sur le scanner, réglez le format TIFF en bleu vert rouge 48 bits et le mode de transmission à 150 points par pouce et ne sélectionnez aucune correction d’image. Pour réchauffer le scanner, placez un film non irradié sur le scanner et lancez un aperçu de l’analyse.
À la fin de l’aperçu, démarrez une insurrateur et attendez 30 secondes avant de commencer l’analyse. À la fin de l’analyse, démarrez une insurateur de 90 secondes. Dans le même temps, enregistrez l’analyse et ouvrez l’image dans ImageJ.
Tracez une région carrée d’intérêt dans l’analyse et mesurez le niveau moyen de pixel rouge de la zone. À la fin des 90 secondes, répétez l’aperçu de l’analyse au moins 30 fois pour réchauffer et stabiliser le scanner. Une fois que le scanner a été stabilisé, placez un film au centre du lit du scanner et lancez un aperçu de l’analyse.
Attendez 30 secondes avant de commencer l’analyse. À la fin de l’analyse, attendez 90 secondes avant de commencer l’analyse suivante. Des mesures pour estimer l’épaisseur de l’atténuateur ont ensuite été effectuées et les différentes épaisseurs de l’atténuateur ont été testées pour trouver l’épaisseur qui a diminué l’intensité du faisceau par un facteur de deux.
Lorsque cette épaisseur a été déterminée, cinq mesures ont été prises pour évaluer la valeur moyenne du mRAW corrigée par le facteur de correction de la température et de la pression. Pour cette configuration, une couche de demi-valeur de 0,667 millimètre de cuivre a été trouvée. Dans cette analyse représentative, un film de dosimétrie auto-développement a été irradié pour déterminer la surface sur laquelle le champ d’irradiation est homogène, permettant le placement correct du récipient cellulaire.
Pour déterminer la dose exacte pour les cellules, le taux de dose mesurée de kerma d’air a été converti en karma d’eau utilisant le rapport du coefficient moyen d’absorption d’énergie de masse pour l’eau à l’air évalué au-dessus du spectre de fluence de photon, qui pour cette analyse a été déterminé pour être 0.659 gris par minute. Dans cette analyse de l’atténuation et de la diffusion de la culture cellulaire, les films radiochromiques de dosimétrie auto-développement ont d’abord été calibrés entre zéro et trois gris avec 0,25 pas gris entre zéro et un gris et 0,5 pas gris entre un et trois gris. Les points de dose ont ensuite été équipés d’une courbe polynomiale au quatrième degré.
Ici, un tableau représentatif utilisé pour la mesure quotidienne peut être observé. Assurez-vous que tous les paramètres de configuration sont respectés, que le taux de fait est mesuré à l’intérieur du récipient de la cellule droite, et que l’influence du milieu de culture cellulaire est évaluée. Plusieurs protocoles existent pour établir une mesure de référence de la dose.
Le point clé est de sélectionner le protocole approprié pour une application spécifique, en particulier lors de l’utilisation d’installations à faible rayons X.
