这是一个手术诱导小鼠模型提供了一个替代腰椎间盘退化相关的研究。这种强大的 LSI 模式不需要特殊设备。它是可重复的,它可以用来在相对较短的时间内诱导椎间盘退化。
控制切口深度和出血,并执行每个间歇过程的切除是两个关键费用植入我们成功的实验。在确认对踏板反射缺乏反应后,将麻醉的八周大、雄性、C57黑色六只小鼠放在手术垫上,并将软膏涂在动物的眼睛上。使用小型动物修剪器将手术区域从下胸区剃到囊区顶部,并用组织湿巾去除剃光的毛皮。
使用纱布在剃须区域涂抹脱毛霜,在不超过三分钟后去除面霜,并用两毫升 0.9 无菌盐水冲洗暴露的皮肤。然后在腹部下放置一个定制的手术圆柱形垫,以提高腰椎。要暴露 L3 和 L5 椎骨,请使用食指触摸腰椎和心绞痛的皮下脊椎过程,将过程与胸椎和囊椎的过程进行比较,以确定腰椎区域。
用75%的酒精冲洗皮肤,使用解剖显微镜使用手术刀在腰椎区域从中胸区到臀部进行三到四厘米的中线皮肤切口。通过插入后筋膜的 V 形识别腰椎,进入尖端,使脊柱过程,并使用手术刀在脊柱两侧从 L3 到 L5 的旋转过程中沿浅后侧脊髓肌肉切口。然后使用两对眼力将肌肉层分开,使 L3 暴露在 L5 旋转过程和超脊髓中。
要分离单个旋转过程,请使用静脉纯正来切断间歇性韧带,并重新检测 L3 到 L5 旋转过程和间歇性韧带。然后使用无菌五号丝编织缝合,以关闭皮肤切口,而无需重新连接准脊椎肌肉,并将盐酸氯环素软膏涂抹到手术部位。3D组织形态分析允许椎间盘测量,而3D结构分析允许对组织总体积进行量化。
手术后一周,椎间盘体积显著增加,手术后两到十六周会减少,同时在同一时间段内测量的椎间盘高度会下降。颅内末板内的空腔也因血管分离值大于或等于0.089的百分比增加和手术后末板体积显著增加而量化。模型端板表现出类似的表型,表明 LSI 导致端板肥大和腔数增加。
L5椎骨体积在手术后略有增加,在16周内观察到统计差异。手术后16周,骨与总组织体积比显著下降,表明LSI在后期会导致椎骨流失。LSI 动物的细胞内细胞内真空也加速减少,LSI 末板中观察到的骨细胞数量增加。
此模型可以通过连接不同数量的椎骨进行修改,例如仅附着第五个腰椎,或从第一个腰椎到第五个腰椎。