Trata-se de uma cirurgia para induzir o modelo de camundongos que oferece uma alternativa para estudos relacionados à degeneração do disco intervertebral lombar. Este modo LSI robusto não requer nenhum equipamento especial. É reprodutível e pode ser usado para induzir a degeneração do disco intervertebral em um período relativamente curto de tempo.
Controlar as profundidades de incisão e a hemorragia e realizar a ressecção de cada processo interspino são duas despesas fundamentais para a implantação do nosso sucesso para o experimento. Depois de confirmar a falta de resposta ao reflexo do pedal, coloque um anestinado de oito semanas de idade, macho, C57 preto seis mouse em uma almofada cirúrgica na posição supina e aplique pomada aos olhos do animal. Use um pequeno aparador animal para raspar a área cirúrgica da região torácica inferior até o topo da região sacral e remover a pele raspada com lenços umedecidos.
Aplique creme depilatório na área raspada usando gaze para remover o creme após não mais do que três minutos e lave a pele exposta com dois mililitros de soro fisiológico estéril de 0,9. Em seguida, coloque uma almofada cilíndrica cirúrgica feita sob o abdômen para elevar a coluna lombar. Para expor as vértebras L3 e L5 use o dedo indicador para tocar os processos espinhosos subcutâneos das vértebras lombares e palpato para comparar os processos com os das vértebras torácicas e vértebras sacrais para identificar a região lombar.
Enxágüe a pele com 75% de álcool, e usando um microscópio dissecando use um bisturi para fazer uma incisão de pele média de três a quatro centímetros sobre a região lombar da região torácica média até o quadril. Identifique a coluna lombar pela forma V da fáscia posterior inserida, na ponta para que os processos espinhosos e use o bisturi para fazer incisões musculares paraspinos posteriores rasas ao longo dos processos espinhosos de L3 a L5 lateralmente em ambos os lados da coluna. Em seguida, use dois pares de fórceps oftálmicos para separar as camadas musculares para expor os processos espinhosos L3 a L5 e ligamentos supraspinos.
Para separar processos espinhosos individuais, utilize vernosas para cortar ligamentos interspinos e para ressecção dos processos espinhosos L3 a L5 e ligamentos interspinosos. Em seguida, use suturas trançadas de seda estéreis cinco para fechar a incisão da pele sem recolocar os músculos paravertebral e aplicar a pomada de clorridrato de clortetracillina ao local cirúrgico. A análise histomorfométrica 3D permite a medição do disco intervertebral, enquanto a análise estrutural 3D permite quantificação do volume total do tecido.
O volume do disco intervertebral aumenta significativamente uma semana após a cirurgia antes de diminuir de duas a 16 semanas após o procedimento consistente com uma diminuição da altura do disco intervertebral medida durante o mesmo período de tempo. O aumento das cavidades dentro das placas finais cranianas também é observado em camundongos LSI, quantificados por uma porcentagem aumentada de valores de separação trabecular maior ou igual a 0,089 e um aumento significativo nos volumes finais pós-cirurgia. As placas finais do modelo exibem um fenótipo semelhante, indicando que o LSI leva à hipertrofia da placa final e ao aumento do número de cavidades.
Os volumes de vértebras L5 aumentam ligeiramente após a cirurgia com diferenças estatísticas observadas em 16 semanas. Uma diminuição significativa da relação de volume de tecido ósseo para total também está presente 16 semanas após a cirurgia, indicando que o LSI causa perda óssea vertebral em um estágio posterior. Uma redução nos vacuoles intracelulares das células de pulposo do núcleo também é acelerada em animais LSI com maior número de osteoclatos observados em placas finais de LSI.
Este modelo pode ser modificado anexando diferentes vértebras, como apenas a quinta lombar, ou da primeira lombar à quinta lombar.
