Il s’agit d’une chirurgie pour induire le modèle de souris offre une alternative pour les études lombaires de dégénérescence du disque intervertébral. Ce mode LSI robuste ne nécessite aucun équipement spécial. Il est reproductible et il peut être utilisé pour induire la dégénérescence du disque intervertébral dans un laps de temps relativement court.
Contrôler les profondeurs d’incision et l’hémorragie et effectuer la résection de chaque processus interspinous sont deux dépenses clés pour l’implantation de notre succès pour l’expérience. Après avoir confirmé un manque de réponse au réflexe de pédale, placez une souris noire de six souris de huit semaines anesthésiée, mâle, C57 sur un bloc chirurgical en position supine et appliquez de l’onguent sur les yeux de l’animal. Utilisez une petite tondeuse à animaux pour raser la zone chirurgicale de la région thoracique inférieure jusqu’au sommet de la région sacrée et enlever la fourrure rasée avec des lingettes tissulaires.
Appliquer la crème depilatory sur la zone rasée à l’aide de gaze pour enlever la crème après pas plus de trois minutes et rincer la peau exposée avec deux millilitres de 0,9 saline stérile. Placez ensuite un tampon cylindrique chirurgical sur mesure sous l’abdomen pour soulever la colonne lombaire. Pour exposer les vertèbres L3 et L5 utiliser l’index pour toucher les processus épineux sous-cutanés des vertèbres lombaires et palpent pour comparer les processus avec ceux des vertèbres thoraciques et des vertèbres sacrées pour identifier la région lombaire.
Rincez la peau avec 75% d’alcool, et à l’aide d’un microscope disséquant utiliser un scalpel pour faire une incision de la peau de trois à quatre centimètres à mi-ligne sur la région lombaire de la région thoracique moyenne à la hanche. Identifiez la colonne lombaire par la forme en V du fascia postérieur inséré, dans la pointe de sorte que les processus épineux et utiliser le scalpel pour faire des incisions musculaires paraspinous postérieures peu profondes le long des processus épineux de L3 à L5 latéralement des deux côtés de la colonne vertébrale. Ensuite, utilisez deux paires de forceps ophtalmiques pour séparer les couches musculaires pour exposer les processus épineux L3 à L5 et les ligaments supraspinous.
Pour séparer les processus épineux individuels utiliser des ruptures veineux pour couper les ligaments interspinous et de réséquer les processus épineux L3 à L5 et ligaments interspinous. Ensuite, utilisez stérile numéro cinq sutures tressées de soie pour fermer l’incision de la peau sans rattacher les muscles paravertébraux et appliquer l’onguent chlortétracycline hydrochlorure sur le site chirurgical. L’analyse histomorphométrique 3D permet la mesure intervertébrarale du disque, tandis que l’analyse structurale 3D permet la quantification du volume total des tissus.
Le volume du disque intervertébral augmente significativement une semaine après la chirurgie avant de diminuer de deux à 16 semaines après la procédure, ce qui correspond à une diminution de la hauteur du disque intervertébral mesurée au cours de la même période. Des cavités accrues dans les plaques d’extrémité crânienne sont également observées chez les souris LSI comme quantifiées par un pourcentage accru de valeurs de séparation trabecular supérieures ou égales à 0,089 et une augmentation significative des volumes de plaques finale après la chirurgie. Les plaques d’extrémité de modèle montrent un phénotype semblable, indiquant que LSI mène à l’hypertrophie de plaque d’extrémité et à une augmentation du nombre de cavité.
Les volumes de vertèbres L5 augmentent légèrement après la chirurgie avec des différences statistiques observées à 16 semaines. Une diminution significative du rapport de volume d’os au volume total de tissu est également présente 16 semaines après chirurgie, indiquant que LSI cause la perte vertébrale d’os à un stade ultérieur. Une réduction des vacuoles intracellulaires des cellules pulposus de noyau est également accélérée chez les animaux de LSI avec un nombre accru d’ostéoclastes observés dans les plaques d’extrémité de LSI.
Ce modèle peut être modifié en attachant différents nombres de vertèbres, comme la cinquième lombaire seulement, ou du premier lombaire au cinquième lombaire.
