获得全种子尺寸树脂部分的简单干截块方法及其应用

形态学科学与细胞、淀粉颗粒和核蛋白体的质量决定了种子的重量和质量。在这项研究中，我们提出了一个嵌入在LR白树脂中的整个内核的简单群体，并建立了一个简单的全内核干吸法。出于两个主要原因，我们选择LR白树脂作为嵌入式介质。

首先，它的粘度低，渗透性强，在制备这一强大的种子部分方面具有良好的应用，特别是对于体积大、淀粉含量高的谷物成熟内核。其次，嵌入在LR白树脂中的样品可以很容易地用许多化学染料染色，用荧光显微镜清楚地显示样品在光下的形态。所准备的部分可以专门染色，以显示细胞，淀粉颗粒，蛋白质体明显出现整个内核，形态参数也可以定量分析。

该方法包含研究。在这里，我们使用体积大、淀粉含量高的成熟玉米仁作为样品，逐步展示工艺过程。首先，将内核切成简单的瓶子。

加入约10毫米2.5%磷酸盐缓冲的谷胱甘肽。多一个 pH 7.2， 并把它们放在 4 摄氏度 48 小时， 以修复他们两个。然后拿出这些内核，纵向或横向切开，厚度为两到三毫米。

你需要一个锋利的双面刀片。再修48小时接下来，用约10毫米洗样品三次，所以0.1M磷酸盐缓冲液，pH7.2每次30分钟。

逐步对样品进行水合，先在约10毫米的30%乙醇水溶液中浸泡30分钟，然后连续浸泡在10毫米中，50%70%90%一次，100%三次。为了逐步渗透样品，先后用10毫米的LR白树脂溶液，用乙醇稀释25%50%75%一次，100%两次在4摄氏度下每次12小时。在嵌入之前，我们需要为样本准备基座。

将250微升纯LR白树脂加入两毫米离心管中，在6摄氏度下聚合48小时。接下来，连续添加500微升纯LR白树脂，用基座将样品渗入离心管。用解剖针拉直样品后，将树脂在6摄氏度的烤箱中放入48小时。

从离心管中拿出这些嵌入的内核，并使用锋利的刀片在样品周围切掉多余的树脂。将树脂块放在微酮样品架中，用刀片修剪样品表面和样品周围的多余树脂。最后用玻璃刀进一步抛光样品表面，直到形成完整的部分。

现在是时候准备这个惊人的部分与两微米厚度。在切片之前，将一个小铜在刀片边缘上方约两毫米左右，以防止一个部分卷曲。当节拉长时，在节下放一个辐条来支持它。

接下来，在未拉伸的幻灯片上添加 100 微升水，并小心地将完整且不间断的部分与处理器一起转移到水中。加热并在50摄氏度干燥，以平滑皱纹部分。最后，两个重要的提示需要注意。

首先，如果该部分碎裂或撕裂，延长样品每次树脂渗透的时间。其次，如果该部分有一些平行于刀的线，则紧夹样品块。如果该部分有一些垂直于刀的线，请使用新刀。

为了观察细胞、淀粉颗粒和蛋白质体的形态，我们可以分别用荧光增白剂28、碘溶液和库马西亮蓝色R250染色。对于其他特定的污渍，基于建议研究。在这里，我们用碘溶液来染色淀粉颗粒作为例子。

加入40微升碘溶液，浸入该部分。在罐子里留一分钟然后用盖套盖住样品。

并污点掉它周围的多余的代理解决方案。立即在配备闭路电视摄像机的光学显微镜下观察和拍摄样品。我们可以使用形态分析软件对不同区域的面积、长访问或短访问、细胞、淀粉颗粒和蛋白质体圆度进行处理和定量分析。

我们建立了一个简单的干截面方法，用于在LR白树脂中保留整个内核大小的截面。该方法可以准备两微米的整个内核的横向和纵向部分。或举例说，油菜的成熟整种可以横向和纵向分段。

玉米成熟整核的部分，体积较大，也可以成功准备。此外，还可以使用该方法对开发内核、熟食内核和发芽内核进行调查。整个内核的准备部分具有以下应用程序。

首先，整个内核的部分可以用来观察种子的组织结构。例如，沾有沙夫兰素的油菜油菜整个胚胎的部分可以清楚地显示它是一个激进的，超随意的，内和外的部分整个内核的部分可以用来观察和分析细胞的形态。例如，油菜整个胚胎的横向部分被荧光增白剂28染色，细胞油被专门染色。

整个胚胎任何区域细胞的微形态都可以以高放大率显示。通过形态分析软件对表质细胞的形态参数进行定量分析，并表现出胚胎不同区域的一些差异。用荧光增白剂28染色的玉米整核的横向部分也可以作为细胞的形态表现出来，细胞的形态参数在内膜的不同区域是不同的。

整片内核的各部分可以染色碘溶液，以表现淀粉颗粒的形态，例如，沾染碘的玉米仁的横向和纵向部分可以清晰地表现出淀粉颗粒的形态。不同区域的淀粉颗粒在内分泌细胞的形态、大小和数量上表现出显著差异。因此，对淀粉颗粒形态参数的定量分析表明，淀粉颗粒在不同区域内膜的内分值差异显著。

这些部分可用于观察和分析蛋白质体的形态。例如，淀粉蛋白是染色蓝色使用库马西辉煌的蓝色R250。在低放大率中可以观察到油菜整个胚胎中淀粉蛋白的空间分布，在高放大率下可以明显地表现出微观结构。

此外，还可以定量分析选定区域蛋白质体的数字误差指数和形态参数。该技术从发育和成熟种子中首次简单制备了整个内核的树脂部分。部分应用在全核组织结构中，然后研究整个内核不同区域的细胞、淀粉颗粒和蛋白质体的结构。

可以定量分析采集的图像，以显示细胞、淀粉颗粒和蛋白质体的形态参数，并进一步比较整个内核的不同区域。