蚊子电图分步指南

对于电图，使用处于特定和一致生理状态的蚊子对于获得可靠的结果至关重要。分步方案允许在蚊子中进行持久的电学记录。该方法可用于几种蚊子种类，以及雄性和雌性。

电学技术也可以转移到其他昆虫模型，包括甲虫、苍蝇、接吻虫和蚂蚁。首先，从储存它们的 20 摄氏度冰箱中取出装有气味混合物和溶剂控制的 1.5 毫升琥珀色小瓶，以防止降解。接下来，将10微升的气味溶液移液到一张滤纸上，装入标记的玻璃注射器内。

在实验当天隔离蚊子。在显微镜下工作，使用一对镊子用细丝轻轻折断两个硼硅酸盐毛细管的尖端。在运行电图或EAG实验之前，请确保电极支架内部透明，没有硼硅酸盐碎屑。

然后通过将电极支架的银线浸泡在纯漂白剂中五分钟来进行氯化化，直到电线变成深色哑光灰色。然后冲洗电线。松开橡胶塞，并使用 20 号针用盐溶液填充毛细管内部。

冲洗毛细管并将电线插入两个毛细管中。保持金属丝尖端距离毛细管尖端小于一毫米。将毛细管穿过电极支架内的橡胶圈而不破坏它，并在确认不存在气泡后轻轻拧紧橡胶塞。

使用参比电极支架上开口较宽、记录电极支架上开口较小的毛细管。将两个安装的电极支架放在湿清洁湿巾上，以防止吸头变干，直到准备安装头部。确保空气桌已打开。

航空公司没有堵塞，空气打开。验证医用空气罐是否已满，以避免在实验过程中更换它，并确认加湿器中的气泡。打开计算机、软件应用程序和阀门电源。

验证互联网连接后，发送控制脉冲以验证传输脉冲的阀门是否正常工作。将铝板放在冰上，上面放一块湿清洁纸巾，然后在角落里放一小块电极凝胶。将蚊子杯放在冰上，让蚊子降温。

用微型剪刀夹住蚊子每个天线的尖端。使用镊子将蚊子拖到电极凝胶团旁边，然后将每个天线的尖端轻轻浸入凝胶中。用镊子将蚊子触角拉出，同时将它们彼此相邻。

用微型剪刀砍掉蚊子的头。轻轻地将参比电极的尖端浸入凝胶中，然后将其与颈部接触，让头部粘在上面。将参比头电极放在微型机械手上。

将两个电极支架连接到放大器。使用微型机械手将记录电极尽可能靠近天线尖端放置。然后将天线尖端插入记录电极。

将航空管靠近蚊头准备工作一厘米。打开放大器和降噪器，确保基线信号无噪声。一旦噪音水平令人满意，将第一个气味注射器插入空气孔中以进行测试并关闭法拉第笼。

然后单击EAG软件上的记录以传递脉冲。以毫伏为单位的振幅测量EAG响应，然后继续下一个气味或浓度。该实验成功地证明，蚊子物种可以对不同的化学物质表现出不同的嗅觉反应。

对用作阴性对照的矿物油没有反应。通过使用鳄鱼夹将元件接地到法拉第笼，可以减少由电噪声引起的结果误差。对于不同种类的蚊子，对相同气味剂的反应阈值在幅度上可能有所不同。

例如，与埃及伊蚊、斯蒂芬斯按蚊和五筋膜库蚊相比，弓形虫七叶茜蚊会产生非常大的EAG。注意到响应阳性对照苯甲醛的较大偏转。虽然对阴性对照缺乏反应，但矿物油。

这些平均触角响应显示在条形图中。此外，通过呈现天线、化学物质浓度的增加和绘制剂量反应曲线来确定检测每种蚊子物种的特定化学物质的阈值。重要的是在头部被切碎和安装后尽快开始录制，以确保准备工作具有出色的响应性。

EAG允许确定蚊子触角是否对给定浓度的给定化学物质做出反应。但是，它不允许确定这种化学物质的平衡。例如，无论是引诱还是悔改。