临时双性肾动脉闭塞的急性肾损伤大型动物模型

本研究描述了肾缺血再灌注损伤的可重复大型动物模型，可用于研究急性肾损伤的病理生理学，并探索潜在的治疗方式。这种方法具有高度可重复性，通过限制对身体的侮辱程度来尽量减少炎症反应的影响。这种临床前模型模拟临床场景，如肾移植、心力休克后肾低灌注、导致肾缺血的转导程序，以及心血管程序，其心脏循环逮捕时间较长。

首先，通过三次涂抹βdine，然后使用95%乙醇对颈部右侧侧区域进行消毒。以无菌的方式拖曳动物。对右胡萝卜动脉和右壶静脉导管进行切除。

横向收回胸腺瘤肌，并解剖到右胡萝卜动脉和右壶静脉。在动脉和静脉中插入 5F 血管造影护套。用丝绸 2 - 0 缝合线固定它。

使用塞尔丁格技术将 5F 血管造影护套插入左股骨动脉，用空心针刺穿动脉。插入软尖导线穿过流明，并推进到股动脉。一边取下针头，一手将导引线固定住。

将导引线上的血管皮套传递到股动脉中，如有必要，使用超声波导引器提取导引线。静脉注射每公斤肝素钠200IU，实现全身抗凝。要进行血管造影，请在荧光镜下注射异位对比剂，以识别肾脏动脉。

识别肾脏动脉，并手动推进导管导管。将 5F JL4 导管放置在左肾动脉中，穿过右胡萝卜动脉。将第二个 5F JL4 导管放置在右肾动脉中，穿过左股动脉。

使用导引线在每个肾动脉中引导 5F 皮皮半透明血管成形术或 PTA 扩散导管。将每个气球导管放置到位，并将压力管连接到每个导管。检查压力监测器中动脉脉冲波形式的存在，以确保导管的正确定位。

充气每个气球，目标是在气球内大约2.5大气压力的压力。为了确认血液流向肾脏的停止，观察气球导管尖端脉冲波形的扁平化。用盐水在1:1稀释中注入碘对比介质，并检查肾血管的任何不透明。

闭塞60分钟后，小心地放气，从肾动脉中取出气球导管。使用 1:1 稀释对比介质进行血管造影，以确认肾动脉轻度和肾复灌的建立。从左股动脉取下 5F 血管造影护套。

在导管部位施加压力，使用30分钟。通过每公斤丙胺施用三毫克，直到活性凝血时间正常化，扭转肝素的作用。要在术后期间对尿液进行取样，使用丝绸 2-0 缝合线将管子固定到 Foley 导管上，在皮肤上缝合中断。

对于血液采样，将血管造影护套留在右胡萝卜动脉和右壶静脉中，然后用丝绸 2-0 缝合线固定它们。在切口处每公斤布皮瓦卡因施用三毫克，以尽量减少疼痛。缺血期结束后，继续用氯化钠为动物补充水分共两小时。

用丝绸 2-0 缝合线用中断的缝合两层关闭颈部切口。在动物的背部放置每小时25至50微克的芬太尼贴片，以尽量减少术后疼痛，并监测动物的机械通风，直到它苏醒。收集最后的血液和尿液样本并计算尿液输出。

使用从 xiphoid 到中骨盆的 10 刀片执行中线腹腔切口。使用直横向缩回器缩回腹部皮肤。解剖腹壁的侧腹附件，以暴露左右复古腹腔。

识别并直截了当地剖析肾动脉和静脉。用2-0丝绸缝合线将肾动脉和静脉连结，并进行双边肾切除术，收集全组织标本，用于组织学和代谢分析。通过确定尿液输出、eGFR、血浆肌酸和BUN来评估肾功能。

经过60分钟的双边肾动脉闭塞，尿液输出显著减少，并在复液后6小时和24小时保持这种状态。同样，eGFR 也显著下降，与缺血期结束时的 2 小时、6 小时和 24 小时的复液相比，从基线下降。与基线相比，等离子肌氨酸在2小时、6小时和24小时的再灌注中显著增加。

与6小时和24小时的复灌基线相比，BUN有所增加。明显的坏死和出血区域在60分钟的双边肾缺血和24小时复灌结束时，在两个肾脏中分布不均匀。马森的三色染色揭示了汇流凝血坏死，它位于肾皮层的近缘管。

还评估了塑料嵌入部分。马森的所有三色幻灯片都被评估为细胞坏死、刷边的丢失、铸成和管状膨胀。急性管状坏死，或ATN评分，显示肾皮质和美杜拉严重损伤。

执行此协议时，检查气球站点在 RC 附近的位置，并完全遮挡流向肾脏。确保它不会在水中扭动。按照这个程序，血管内导管流动探头可以插入肾脏动脉，以评估肾脏血流量，或肾脏活检可以进行，以评估肾脏组织损伤。