מחקר זה מתאר מודל בעלי חיים גדול לשחזור של פגיעה איסכמיה כליות, אשר ניתן להשתמש בו כדי ללמוד את הפתופיזיולוגיה של פגיעה בכליות חריפה, ולחקור שיטות טיפוליות פוטנציאליות. שיטה זו ניתנת לשחזור וממזערת את ההשפעה של תגובה דלקתית על ידי הגבלת כמות העלבון לגוף בהשוואה לגישה פתוחה. מודל פרה-קליני זה מחקה תרחישים קליניים, כגון השתלת כליות, hypoperfusion כליות בעקבות הלם קרדיוגני, הליכי טרנסקתטר וכתוצאה מכך איסכמיה כליות, והליכים לב וכלי דם עם זמני מעצר לב וכלי דם ממושכים.
כדי להתחיל, לחטא את האזור לרוחב הימני של הצוואר על ידי החלת betadine ולאחר מכן 95% אתנול שלוש פעמים. לעטוף את החיה בצורה סטרילית. בצע חיתוך עבור הצנתור של העורק הראשי הנכון ואת הווריד הצוואר הימני.
לסגת השריר sternocleidomastoid לרוחב, ולנתח אותו עד העורק הראשי הימני ואת הווריד הצוואר הימני. הכנס נדן אנגיוגרפיה 5F הן בעורק והן בווריד. אבטחו אותו עם תבר משי 2-0.
הכנס נדן אנגיוגרפיה 5F באמצעות טכניקת סלדינגר לתוך עורק הירך השמאלי על ידי ניקוב העורק עם מחט חלולה. הכנס חוט קו יישור רך דרך הלומן ולקדם אותו לתוך עורק הירך. החזק את חוט המדריך מאובטח עם יד בעת הסרת המחט.
להעביר את נדן אנגיוגרפיה מעל חוט המדריך לתוך עורק הירך ולהוציא את חוט המדריך באמצעות הדרכת אולטרסאונד במידת הצורך. תוך ורידי לנהל 200 IU לכל קילוגרם נתרן הפרין כדי להשיג קרישה מערכתית. כדי לבצע אנגיוגרפיה, הזריקו חומר ניגודיות יוד תחת פלואורוסקופיה כדי לזהות את עורקי הכליות.
זהה את עורקי הכליות וקדם ידנית את חוט המדריך בצנתר המנחה. מקם את הקטטר המנחה 5F JL4 בעורק הכליה השמאלי דרך העורק הראשי הימני. מקם את הקטטר המנחה השני 5F JL4 בעורק הכליה הימני דרך עורק הירך השמאלי.
השתמש בחוטי המדריך כדי לכוון אנגיופלסטיקה טרנסלומינלית 5F, או צנתר תדריכת PTA, בכל עורק כליות. מקם כל קטטר בלון במקום, וחבר קו לחץ לכל קטטר. בדוק את נוכחותם של צורות גל דופק עורקי בצג הלחץ כדי להבטיח את המיקום הנכון של הצנתר.
לנפח כל בלון ולכוון ללחץ של כ 2.5 לחץ אטמוספרי בתוך הבלון. כדי לאשר את הפסקת זרימת הדם לכליות, התבונן שיטוח צורת גל הדופק בקצה צנתר הבלון. הזריקו ניגודיות יוד מדיום בדילול 1:1 עם תמיסת מלח ולבדוק כל אטימות של כלי הכליה.
לאחר 60 דקות של חסם, בזהירות לנפח ולהסיר את קטטרים הבלון מן העורקים הכליות. בצע אנגיוגרפיה באמצעות מדיום ניגוד מדולל 1:1 כדי לאשר טפיחה בעורק הכליות והקמת רפרפוזיה כליות. הסר את נדן אנגיוגרפיה 5F מעורק הירך השמאלי.
יש למרוח מלחץ באתר הצנתור למשך 30 דקות. הפוך את ההשפעה של הפרין על ידי הממשל של שלושה מיליגרם לכל קילוגרם של פרוטמין עד נורמליזציה של זמן קרישה פעיל. כדי לדגום שתן במהלך התקופה שלאחר הניתוח, לאבטח צינור צנתר פולי עם תפר משי 2-0 באמצעות תפר מופרע על העור.
לדגימה בדם, השאירו את נדן האנגיוגרפיה בעורק הראשי הימני ואת וריד הצוואר הימני במקום, והאבטחו אותם עם תפיח משי 2-0. לנהל שלושה מיליגרם לכל קילוגרם של bupivacaine באתר ההסתה כדי למזער את הכאב. המשך לחות החיה עם 0.9 נתרן כלורי במשך סך של שעתיים לאחר סיום איסכמיה.
סוגרים את חתכת הצוואר עם תפר משי 2-0 באמצעות תפר מופרע בשתי שכבות. מניחים תיקון פנטניל של 25 עד 50 מיקרוגרם לשעה על גב החיה כדי למזער את הכאב לאחר הניתוח, ולנטר את החיה על אוורור מכני עד שהוא מתעורר. לאסוף את דגימות הדם והשתן הסופי ולחשב את תפוקת השתן.
בצע תספורת לפרוסטומיה בקו האמצע באמצעות להב בגודל 10 מהשיפיד עד לאגן האמצעי. השתמש מפסק לרוחב ישר כדי לבטל את עור הבטן. לנתח את ההחזקות לרוחב צפק של דופן הבטן כדי לחשוף את retroperitoneum ימין ושמאל.
זהה ותתחו בבוטות גם עורקי כליות וגם ורידים. ליגת הן עורקי כליות והן ורידים עם תפירת משי 2-0 ולבצע כריתת נפרציות דו-צדדיות כדי לאסוף דגימות רקמה שלמה לניתוח היסתולוגי ומטבולי. תפקוד הכלייתי הוערך על ידי קביעת תפוקת השתן, eGFR, קריאטין פלזמה, BUN.
לאחר 60 דקות של סתירה עורק כליות דו צדדית, תפוקת השתן ירדה באופן משמעותי ונשארה בדרך זו בשש ו 24 שעות לאחר reperfusion. באופן דומה, נצפתה ירידה משמעותית ב- eGFR, אשר ירד מקו הבסיס בהשוואה לסוף איסכמיה בשעתיים, שש שעות ו -24 שעות של reperfusion. קריאטינין פלזמה גדל באופן משמעותי בשעתיים, שש, ו 24 שעות של רפרופסיה לעומת בסיס.
BUN הוגדל בהשוואה לקו הבסיס בשש ו 24 שעות של reperfusion. אזורים נמקיים ודימומיים ניכרים חולקו באופן לא אחיד בשתי הכליות בסוף 60 הדקות של איסכמיה כליות דו צדדית ו -24 שעות של רפרפוזיה. כתמי הטריכרום של מאסון חשפו נמק קרישה, שהיה ממוקם בצינורות הפרוקסימליים של קליפת המוח הכליתית.
כמו כן נבחנו חלקים משובצים בפלסטיק. כל שקופיות הטריכרום של מאסון נבדקו עבור נמק התא, אובדן גבול המברשת, היווצרות יציקה, והתפשטות צינורית. נמק צינורי חריף, או ניקוד ATN, הראה פגיעה משמעותית בקליפת הכליה ובמדולה.
בעת ביצוע פרוטוקול זה, בדוק את המיקום של אתרי הבלונים על הקרבה של RC, לחלוטין לסכל את הזרימה לכליה. תוודא שזה לא מקרקר במים האלה. בעקבות הליך זה, בדיקות זרימת קטטר אנדווסקולרי ניתן להכניס בעורקי הכליות כדי להעריך את זרימת הדם הכליות, או ביופסיות כליות ניתן לבצע כדי להעריך פגיעה ברקמת הכליה.
