这种方法涉及在肝脏中放置胶原基质的植入物作为支架以促进肝脏再生。这种植入方法为探索切除组织的形状和球囊恢复的战略家打开了大门,从而减少了麻醉,手术持续时间和恢复时间。该方法可用于促进涉及肝纤维化模型以及其他哺乳动物物种的再生。
该方法基于组织工程和再生医学,以促进受损组织的恢复。首先用2%氯己定溶液消毒手术区工作台,显微手术显微镜和座椅,然后将从牛髁获得的胶原基质支架在无菌盐水溶液中水合20分钟。接下来,使用手术肥皂和双刃刀片,麻醉的六至八周龄雄性Wistar大鼠的腹部皮肤剃须,然后使用10%聚维酮碘溶液对皮肤进行三次消毒。
将动物放在背侧卧位的温板上,颈部过度伸展以保持可通透的气道。通过呼吸模式和四肢戒断反射的丧失来评估麻醉的深度。然后在剃须的皮肤周围放置一次性手术悬垂物,并以xiphoid工艺为参考点,用解剖钳在阿尔卑斯线上做一个2.5厘米的切口,注意避免腹壁血管,以防止出血。
放置腹部牵开器后,观察腹腔。使用解剖钳,提取左肝叶并将其放在金属板上。使用无菌的逐个一厘米的三角形金属模板,进行肝切除术。
为了防止肝脏出血,用拭子在肝脏边缘保持手术按压五分钟。接下来,使用7-O不可吸收的聚丙烯缝合线,将水合胶原基质支架植入肝切除术部位,在肝脏组织和支架之间缝合四针,以防止生物材料的位移。将肝脏放回腹腔,并用3-O尼龙缝合线缝合腹壁和皮肤。
用手术浸透碘的海绵清洁手术切口两次,并监测动物的生命体征。然后将动物置于侧卧位。施用镇痛药后,将动物放在带有实验室动物垫料的单独聚碳酸酯盒中,该盒位于具有温度控制的无噪音区域。
观察麻醉后的恢复情况,并监测水和食物的消耗量两个小时。在3、14、21 d时,SHAM组与有和没有胶原基质支架的实验组肝功能无差异,表明胶原基质支架不会破坏肝功能。第三天的组织学分析表明,肝脏中胶原基质支架的存在没有促进异物反应,并且观察到松弛结缔组织的明显存在。
在第14天和第21天,松弛的结缔组织更加丰富,胶原基质支架小梁被肝细胞包围,表明肝细胞已经迁移到胶原基质支架。可以看到血管冲洗的肝细胞区域,粘附在胶原基质支架小梁上的肝细胞有时被松弛的结缔组织包围。在进行肝切除术时,使用无菌技术避免感染,然后按压以防止肝脏出血。
此外,使用7-O缝合线植入胶原基质支架,以避免撕裂。在纤维化动物模型中植入胶原基质支架后,可以评估产化植入对肝脏再生的益处。使用胶原基质支架代替肝脏拔管肿块直到现在才被评估。
这些基因材料为慢性肝病领域的另一种治疗选择铺平了道路。