乳酸菌的培养、生长和活力:质量控制视角

我们的协议很重要，因为作为质量控制检查确保了纯度。它还促进了乳酸菌发酵中严格的发酵性能和产量的一致性。该技术的主要优点是它可以通过细胞纯度、活力和功能增强乳酸菌的发酵性能。

该技术是用户友好的，由于仅使用基本设备而没有许多技术要求，任何人都可以轻松执行。Philip Yeboah是我们的研究生研究助理，他将演示该程序。首先，从零下80摄氏度的超低温冰箱中取出乳酸菌或LAB菌株的制备甘油原液，装在两毫升离心管中。

使用前不要让它们解冻。用70%酒精清洁和消毒离心管的开口，并在使用前轻轻涡旋。从离心管中吸取约250微升的原液LAB培养物到新鲜的两毫升MRS试管中。

轻轻涡旋试管，封口膜，并在 42 摄氏度下厌氧孵育过夜 12 至 16 小时。接下来，从两毫升MRS试管中从过夜生长的培养物中取出约500微升到新鲜的7毫升MRS试管中，涡旋它们，并在42摄氏度下厌氧孵育过夜12至16小时。通过使用紫外可见分光光度计测量610纳米培养物的光密度或生长来评估微生物生长，并记录0.7至0.9之间的可接受结果。

将来自7毫升MRS管的过夜培养物划线到MRS和MRCMPYR琼脂平板上，并在42摄氏度下厌氧孵育72小时。从琼脂平板中挑选分离的菌落，将它们转移到新鲜的7毫升MRS试管中，轻轻涡旋，并在42摄氏度下厌氧孵育过夜12至16小时。将含有分离菌株的琼脂平板在4摄氏度下储存在冰箱中一周。

接下来，测量并确认从610纳米条纹板中分离的LAB培养物的7毫升MRS试管的光密度，并将它们用作所有相关实验的工作培养物。使用九毫升蛋白胨水对最后七毫升MRS试管中生长的乳酸菌培养物进行十倍污染，以获得1比10的比例。从所有发酵实验的适当系列妄想中取出约250微升，并通过将它们转移到新鲜的7毫升MRS肉汤中并在42摄氏度下厌氧孵育16小时来激活含有菌株的肉汤。

重复这些步骤以确保LAB培养物的活细胞和卓越的细胞生长。此处显示了使用质量控制方案培养的S9和LB6保加利亚乳杆菌菌株以及没有质量控制方案培养的S9保加利亚乳杆菌菌株的细胞形态生长。将菌株一式三份划线，并在42摄氏度下厌氧孵育72小时。

尝试此过程时，请确保用70%酒精对冰箱中的原液培养管进行消毒，以防止交叉污染。生长培养物的光密度测量应始终在 0.7 和 0.9 之间。遵循该协议，可以实现高效的LAB发酵或生物工艺操作，并充分利用培养物。