孤立体外位灌注期间心脏的血流动力学评估描述不佳。该协议提供了一种在工作模式下评估非原位心脏性能的方法。我们的方法将有创PV环技术与心外膜超声心动图技术进行了比较,以在孤立的离位灌注期间对其心脏进行功能评估。
这种方法需要团队在非原位心脏灌注方面的经验,以及接受过经食管超声心动图培训的心脏病专家的参与。心脏移植的一个主要问题是原发性移植失败的风险。我们使用心外膜超声心动图的方法在非原位灌注期间提供移植前的心脏评估。
这种非侵入性方法可以在移植前的异位心脏灌注期间应用。首先在麻醉动物的右心房和升主动脉上放置四条零聚丙烯缝合线,以用止血带固定插管。输注肝素并仔细解剖主动脉根部。
然后在右心房插入双期静脉插管用于采血,在升主动脉插入单腔插管用于输注心脏停搏。分离上腔静脉和下腔静脉后,将静脉套管连接到含有10, 000单位普通肝素的采血袋上。将仔猪体置于特伦德伦贝格位置,以改善血液流入收集袋。
进行心脏采集,保持肺干两厘米以及左心房后壁。将心脏置于四摄氏度的盐水溶液中,并将升主动脉与肺干分开。确认主动脉瓣和冠状动脉骨没有受伤。
在升主动脉远端下方5毫米处插入四个承诺的四个零聚丙烯缝线,并将输液插管插入主动脉。拧紧主动脉周围的软管夹以固定套管。将引流插管插入肺干,并用三零聚丙烯运行缝合线固定。
用五条零聚丙烯运行缝合线关闭下腔静脉和上腔静脉。用四零聚丙烯线缝合左心房后壁。将左通气插管插入左心房后壁,并在周围缠上止血带。
将预装套管插入左心耳,并在周围缠绕止血带。将泵流量降低到每分钟 200 毫升。在给连接器放气后,将心脏连接到主动脉连接器。
在室温下将主动脉压调节至 30 毫米汞柱。在复苏期间,进行平滑的心脏按摩,直到窦性心律恢复。在 15 到 25 分钟内以每分钟 50 毫升的步长缓慢增加泵流量,以达到 65 毫米汞柱的主动脉压。
同时,将大量温度提高两到四摄氏度,达到37摄氏度。一旦达到所需的主动脉压和大量温度,如果需要,在五焦耳处进行电击,并重复直到窦性心律恢复。将心外膜电极固定在右心室后壁上,并连接到外部起搏器。
然后将肺导管连接到冠状动脉血流线。打开预压管路,调节泵流量,确保预紧油箱稳定加注。打开主动脉后负荷管路并夹紧用于兰甘多夫灌注的回路的主线。
后负荷水库将逐步填满。确保通过溢流管将溢流管排出,将溢流管带回回路的主储液罐。以每分钟0.04毫克的速度开始输注多巴酚丁胺。
然后拆下通风口。用盐水溶液清洁七个法国尾纤电导导管,并将其连接到硬件接口。轻轻地将导管推入先前通过左心房顶部插入的引入器8法式鞘中,以与二尖瓣对齐。
停止心脏的心外膜起搏,以避免干扰电导信号。当信号稳定时,以稳定状态记录数据。选择一系列 10 个连续循环并打开分析软件。
要获得收缩末期和舒张末期压容积关系,请记录预负荷闭塞期间的信号。逐渐夹紧心房充血管,直到前负荷减轻有效。然后慢慢松开夹子。
在心脏周围放置无菌窗帘后,将探头敷在左心房的上壁上,并手动旋转换能器,直到获得四腔视图。然后运行超声探头监视器以获得三个和两个腔室视图。为了评估MWI,需要获取4、3和2腔视图,并记录同时动脉压。
使用这些视图和打开 MWI 软件评估全球纵向应变。使用循环采集在灌注回路上的外部传感器检测到的侵入性血压。手动通知软件主动脉瓣和二尖瓣的确切打开和关闭时间。
在自定义设置中执行工作模式灌注期间的超声心动图评估。所有三个左心室视图都是在所有实验的任何时间点获得的。平均左心室射血分数整体纵向应变和M W I分别约为40.8%-8.0%和65毫米汞柱。
在工作模式灌注期间,通过电导导管或表面超声心动图评估血流动力学参数。在所有实验中,在工作模式下,随着时间的推移,观察到M W I显着降低。在心输出量和与收缩末期压容积关系相关的其他参数中观察到类似的下降。
超声心动图探头必须位于左心房的顶部。必须正确执行至少三到六个心肌周期的稳定要求。对心肌组织和内皮功能的代谢评估将在非原位心脏灌注期间对心脏移植物进行补充评估,以优化灌注设置。