Гемодинамическая оценка сердца при изолированной перфузии Ex situ описана слабо. Этот протокол предоставляет метод оценки сердечной деятельности Ex situ в рабочем режиме. Наш подход сравнивает инвазивную технику PV-петли с эпикардиальной эхокардиографией для функциональной оценки их сердца во время изолированной перфузии Ex situ.
Этот подход требует командного опыта в перфузии сердца Ex situ, а также участия кардиолога, обученного для трансэзофагеальной эхокардиографии. Основной проблемой при трансплантации сердца является риск первичной недостаточности трансплантата. Наш подход с использованием эпикардиальной эхокардиографии обеспечивает оценку сердца перед трансплантацией во время перфузии Ex situ.
Этот неинвазивный метод может быть применен во время перфузии сердца Ex situ перед трансплантацией. Начните с наложения четырех нулевых полипропиленовых швов на правое предсердие и на восходящую аорту анестезированного животного, чтобы обеспечить канюляцию жгутами. Настаивают гепарин и тщательно рассасывают корень аорты.
Затем вставить двойную постановочную венозную канюлю в правое предсердие для забора крови и канюлю с одним просветом в восходящую аорту для инфузии кардиоплегии. После выделения верхней и нижней полой вены соедините венозную канюлю со сборным кровью мешочком, содержащим 10 000 единиц нефракционированного гепарина. Поместите тело поросенка в положение Тренделенберга, чтобы улучшить дренаж крови в собирающий мешок.
Приступайте к сердечным закупкам, сохраняя два сантиметра легочного ствола вместе с задней стенкой левого предсердия. Поместите сердце в физиологический раствор с четырьмя градусами Цельсия и отделите восходящую аорту от легочного ствола. Убедитесь, что аортальный клапан и коронарная остея не повреждены.
Вставьте четыре заложенных нулевых полипропиленовых стежка, на пять миллиметров ниже дистального отдела восходящей аорты и вставьте инфузионную канюлю в аорту. Затяните зажим шланга вокруг аорты, чтобы закрепить канюлю. Вставьте дренажную канюлю в легочный ствол и закрепите ее тремя нулевым полипропиленовыми бегущими швами.
Закройте нижнюю и верхнюю полую вену пятью нулевыми полипропиленовыми бегущими швами. Закройте заднюю стенку левого предсердия четырехнулевым полипропиленовым бегущим швом. Вставьте левую вентиляционную канюлю через заднюю стенку левого предсердия и зажмите жгут вокруг.
Вставьте предварительно нагруженную канюлю в придаток левого предсердия и зажмите жгут вокруг. Уменьшите расход насоса до 200 миллилитров в минуту. Подключите сердце к аортальному разъему после обезвоживания разъема.
Отрегулируйте аортальное давление до 30 миллиметров ртутного столба при комнатной температуре. Во время реанимации выполняйте плавный массаж сердца до восстановления синусового ритма. Медленно увеличивайте поток насоса в течение 15-25 минут с шагом 50 миллилитров в минуту, чтобы достичь аортального давления в 65 миллиметров ртутного столба.
В то же время увеличьте обильную температуру с шагом от двух до четырех градусов цельсия до достижения 37 градусов по Цельсию. Как только достигается необходимое аортальное давление и обильная температура, при необходимости нанесите удар электрическим током в пять джоулей и повторяйте до тех пор, пока синусовый ритм не восстановится. Закрепите эпикардиальный электрод на задней стенке правого желудочка и подключите к внешнему кардиостимулятору.
Затем подключите легочную канюлю к линии коронарного потока. Откройте линию предварительной загрузки и отрегулируйте расход насоса, чтобы обеспечить стабильное заполнение резервуара предварительной нагрузки. Откройте линию аортальной догрузки и зажмите основную линию цепи, используемой для перфузии Лангандорфа.
Резервуар для перегрузки будет постепенно заполняться. Обеспечьте дренаж резервуара с помощью линии перелива, которая возвращает обильный резервуар обратно в основной резервуар контура. Начинают инфузию добутамина со скоростью 0,04 миллиграмма в минуту.
Затем снимите вентиляционное отверстие. Очистите семи французский катетер проводимости косички физиологическим раствором и подключите его к аппаратному интерфейсу. Осторожно протолкните катетер в интродуктор 8 французских оболочек, предварительно вставленных через левую крышу предсердий, чтобы выровнять с митральным клапаном.
Остановите эпикардиальную стимуляцию сердца, чтобы избежать помех сигналу проводимости. Запись данных в установившемся состоянии при стабилизации сигнала. Выберите серию из 10 последовательных циклов и откройте программное обеспечение для анализа.
Чтобы получить отношение объема конечного систолического и конечного диастолического давления, запишите сигнал во время окклюзии преднагрузки. Постепенно зажимайте линию профузии предсердий до тех пор, пока не станет эффективным снижение преднатяга. Затем медленно отпустите зажим.
После размещения стерильной драпировки вокруг сердца нанесите зонд на верхнюю стенку левого предсердия и вручную вращайте преобразователь до получения четырехкамерного вида. Затем запустите монитор ультразвукового зонда, чтобы получить трех- и двухкамерный вид. Для оценки MWI приступают к приобретению четырех-, трех- и двухкамерных видов и записывают одновременное артериальное давление.
Оцените глобальную продольную деформацию, используя эти представления и открытое программное обеспечение MWI. Используйте инвазивное артериальное давление, обнаруженное внешним датчиком на перфузионном контуре с помощью петлевого сбора. Вручную уведомите программное обеспечение о точном времени открытия и закрытия аортального и митрального клапанов.
Эхокардиографическая оценка во время перфузии рабочего режима выполнялась в пользовательской настройке. Все три вида левого желудочка были получены в любой момент времени во всех экспериментах. Средняя фракция выброса левого желудочка глобальной продольной деформации и M W I составила примерно 40,8% минус 8,0% и 65 миллиметров ртутного столба соответственно.
Гемодинамические параметры оценивали либо с помощью проводящего катетера, либо поверхностной эхокардиографии во время перфузии режима работы. Во время перфузии режима работы во всех экспериментах наблюдалось значительное снижение M W I с течением времени. Аналогичное снижение наблюдалось в сердечном выбросе и других параметрах, связанных с соотношением объема конечного систолического давления.
Эхокардиографический зонд должен быть расположен на крыше левого предсердия. Стабильная реквизиция не менее трех-шести циклов миокарда должна быть выполнена правильно. Метаболическая оценка ткани миокарда и эндотелиальной функции принесет дополнительную оценку сердечного трансплантата во время перфузии сердца ex situ для оптимизации перфузионных установок.
