A avaliação hemodinâmica do coração durante a perfusão Ex situ isolada é pouco descrita. Este protocolo fornece um método para avaliar o desempenho cardíaco Ex situ no modo de trabalho. Nossa abordagem compara a técnica invasiva de alça fotovoltaica com a ecocardiografia epicárdica para avaliação funcional de seu coração durante a perfusão Ex situ isolada.
Essa abordagem requer uma experiência em equipe em perfusão cardíaca ex situ, juntamente com o envolvimento de um cardiologista treinado para ecocardiografia transeosfágica. Uma das principais preocupações no transplante cardíaco é o risco de falha primária do enxerto. Nossa abordagem usando ecocardiografia epicárdica fornece uma avaliação do coração antes do transplante durante a perfusão Ex situ.
Este método não invasivo pode ser escrito aplicado durante a perfusão cardíaca Ex situ antes do transplante. Comece colocando quatro suturas de polipropileno zero no átrio direito e na aorta ascendente do animal anestesiado para garantir a canulação com torniquetes. Infundir heparina e dissecar cuidadosamente a raiz da aorta.
Em seguida, insira uma cânula venosa de duplo estágio no átrio direito para coleta de sangue e uma única cânula de lúmen na aorta ascendente para infusão de cardioplegia. Após o isolamento da veia cava superior e inferior, conecte a cânula venosa a uma bolsa coletora de sangue contendo 10.000 unidades de heparina não fracionada. Coloque o corpo do leitão na posição de Trendelenberg para melhorar a drenagem do sangue para a bolsa coletora.
Prossiga para a captação cardíaca mantendo dois centímetros do tronco pulmonar juntamente com a parede posterior do átrio esquerdo. Coloque o coração em uma solução salina de quatro graus Celsius e separe a aorta ascendente do tronco pulmonar. Verifique se a válvula aórtica e o osteochá coronário não estão lesionados.
Inserir quatro pontos de polipropileno zero prometidos, cinco milímetros abaixo da secção distal da aorta ascendente e inserir a cânula de perfusão na aorta. Aperte um grampo de mangueira ao redor da aorta para prender a cânula. Insira uma cânula de drenagem no tronco pulmonar e prenda-a com uma sutura de três cilindros de polipropileno zero.
Feche a veia cava inferior e superior com cinco suturas de polipropileno zero. Feche a parede posterior do átrio esquerdo com uma sutura de quatro cilindros de polipropileno zero. Insira uma cânula de ventilação esquerda através da parede posterior do átrio esquerdo e amarre um torniquete ao redor.
Insira uma cânula pré-carregada no apêndice atrial esquerdo e pegue um torniquete ao redor. Diminua o fluxo da bomba para 200 mililitros por minuto. Conecte o coração ao conector aórtico depois de desarejar o conector.
Ajustar a pressão aórtica para 30 milímetros de mercúrio à temperatura ambiente. Durante a ressuscitação, realize uma massagem cardíaca suave até que um ritmo sinusal seja restaurado. Aumente lentamente o fluxo da bomba dentro de 15 a 25 minutos por passos de 50 mililitros por minuto para atingir uma pressão aórtica de 65 milímetros de mercúrio.
Ao mesmo tempo, aumente a temperatura profusa em passos de dois a quatro graus Celsius para atingir 37 graus Celsius. Uma vez que a pressão aórtica necessária e profusa uma temperatura é atingida, dê um choque elétrico a cinco joules, se necessário, e repita até que o ritmo sinusal seja restaurado. Prenda um eletrodo epicárdico à parede posterior do ventrículo direito e conecte-se a um marcapasso externo.
Em seguida, conecte a cânula pulmonar à linha de fluxo coronariano. Abra a linha de pré-carga e ajuste o fluxo da bomba para garantir o enchimento estável do reservatório de pré-carga. Abra a linha de pós-carga aórtica e prenda a linha principal do circuito usado para a perfusão de Langandorf.
O reservatório de pós-carga será progressivamente abastecido. Garantir a drenagem do reservatório por uma linha de transbordamento que traga o profuso de volta ao reservatório principal do circuito. Iniciar a perfusão de dobutamina a 0,04 miligramas por minuto.
Em seguida, remova o respiradouro. Limpe o cateter de condutância pigtail francês com solução salina e conecte-o à interface de hardware. Empurre suavemente o cateter para a bainha francesa do introdutor 8 previamente inserida através do teto do átrio esquerdo para ser alinhada com a válvula mitral.
Pare a estimulação epicárdica do coração para evitar interferência com o sinal de condutividade. Registre dados em um estado estacionário quando o sinal estiver estabilizado. Selecione uma série de 10 loops consecutivos e abra o software de análise.
Para obter a relação de volume da pressão sistólica final e diastólica final, registre o sinal durante a oclusão pré-carga. Aperte gradualmente a linha de profusão atrial até que a redução da pré-carga seja eficaz. Em seguida, solte lentamente a braçadeira.
Depois de colocar uma cortina estéril ao redor do coração, aplique a sonda na parede superior do átrio esquerdo e gire manualmente o transdutor até obter uma visão de quatro câmaras. Em seguida, execute o monitor de sonda de ultrassom para obter três e duas visualizações de câmara. Para avaliar o ICM procede-se à aquisição de quatro, três e duas câmaras de visão e registro simultâneo da pressão arterial.
Avalie a tensão longitudinal global usando essas visualizações e o software MWI aberto. Use a pressão arterial invasiva detectada pelo sensor externo no circuito de perfusão usando a aquisição de alça. Notifique manualmente o software dos horários exatos de abertura e fechamento das válvulas aórtica e mitral.
A avaliação ecocardiográfica durante a perfusão em modo de trabalho foi realizada na configuração personalizada. Todas as três incidências do ventrículo esquerdo foram obtidas em qualquer momento em todos os experimentos. A média da fração de ejeção do ventrículo esquerdo da deformação longitudinal global e M W I foi de aproximadamente 40,8% menos 8,0% e 65 milímetros de mercúrio, respectivamente.
Os parâmetros hemodinâmicos foram avaliados por cateter de condutância ou ecocardiografia de superfície durante a perfusão em modo de trabalho. Durante a perfusão do modo de trabalho observou-se uma diminuição significativa em M W I ao longo do tempo em todos os experimentos. Diminuição semelhante foi observada no débito cardíaco e em outros parâmetros relacionados à relação volêmica da pressão sistólica final.
A sonda ecocardiográfica deve estar localizada no teto do átrio esquerdo. A requisição estável de pelo menos três a seis ciclos miocárdicos deve ser realizada corretamente. Uma avaliação metabólica do tecido miocárdico e da função endotelial traria uma avaliação complementar do enxerto cardíaco durante a perfusão cardíaca ex situ para otimizar as configurações de perfusão.
