大鼠烧伤模型研究全层皮肤热烧伤和感染

该烧伤模型能够概括在烧伤住院患者（如免疫失调和细菌感染）后观察到的临床情况。这种诱导大鼠烧伤的方法易于学习，可用于开发和评估用于烧伤创面和感染的新型热带药物。该模型可用于评估伤口愈合以及烧伤部位细菌感染的进展。

这种烧伤诱导方法也可用于小鼠和其他动物模型的烧伤诱导和研究烧伤创面的细菌感染。通过将麻醉大鼠以俯卧姿势移动到加热垫上，开始为烧伤做准备。使用棉头涂抹器，在双眼涂抹眼部润滑剂，以防止角膜干燥。

用电动剪子从肩胛骨到尾巴根部的大矩形剃掉老鼠的背部区域。使用浸泡在盐水中的组织擦去剃光部位的松散毛发。使用棉头涂抹器将脱毛化妆水涂抹在剃须区域。

三分钟后，用湿纱布海绵擦拭该区域两次，以去除化妆水并防止皮肤刺激。关闭异氟醚并取出鼻锥，然后将大鼠放入恢复笼中。在烧伤实验当天，将水浴温度设置为97摄氏度，并在实验前一小时，将420克四根铜棒放入水浴中。

一旦大鼠对所有肢体的脚趾捏没有反应，将他以俯卧姿势放在加热垫上，并通过腹膜内或IP根注射每公斤体重20毫克吗啡以进行疼痛管理。接下来，检查水浴温度。设置计时器并戴上耐热手套。

从水浴中取出一根加热的铜棒，将其触摸在背部区域七秒钟。立即使用每个烧伤部位的一根杆接一个接一个地涂抹接下来的三次烧伤，并产生大约 20% 的全身表面积全接触烧伤。烧伤后，通过IP途径注射每克体重0.1毫升的乳酸林格氏溶液来复苏动物。

完成后，关闭异氟醚。取下鼻锥并将大鼠放在加热垫上。在烧伤和感染当天，将铜绿假单胞菌或金黄色葡萄球菌培养物分别以4， 000倍g离心5分钟。

用生理盐水洗涤沉淀，然后使用盐水将沉淀稀释至0.1纳米的600光密度。用800微升盐水稀释200微升细菌悬浮液，并获得所需的2×10细菌接种物至第7菌落形成单位或每毫升CFU。烧伤后15分钟，使用29号针头在烧伤区域附近皮下注射50微升稀释的细菌接种物。

将大鼠放在加热垫上进行恢复。15至20分钟后，将回收的动物转移到干净的笼子中。烧伤后立即从颜色和边缘方面评估皮肤损伤的形态学。

安乐死后，分析全血细胞计数以确定烧伤诱导对宿主免疫系统的影响。将安乐死大鼠的组织收集在10毫升收集管中。使用组织匀浆器均质化样品，并在生理盐水中连续稀释组织匀浆。

板100微升未稀释的匀浆和从西曲胺琼脂平板上感染铜绿假单胞菌的大鼠收集的每个组织样品的所有稀释液。在培养箱中将板在37摄氏度下孵育16至18小时后，计数平板上的细菌菌落。将它们乘以稀释比以获得每毫升计数的 CFU，并将其与组织的重量归一化以计算 CFU 程序组织。

这种高度可重复的方案导致大鼠三度全层烧伤。烧伤的颜色在烧伤后24小时至72小时内从白色变为棕色。在组织学分析中，烧伤动物的皮肤样本在烧伤后 24、48 和 72 小时显示所有层均有损伤，而非烧伤皮肤在表皮、真皮和皮下组织层上均有明显区别。

在烧伤的皮肤样本中观察到表皮层的破坏以及皮下脂肪和骨骼肌对真皮全层的破坏。在烧伤后 24 小时内，全层烧伤深度超过 2.61 毫米。在细菌清除评估中，在所有烧伤大鼠中观察到细菌恢复。

在铜绿假单胞菌PAO1感染期间，感染后24小时从烧伤大鼠皮肤中恢复的细菌数量小于初始接种量1×10至第6CFU。然而，它在感染后48和72小时增加。在金黄色葡萄球菌ATC25923感染中，与初始接种物相比，在皮肤的所有时间点观察到2个log 10增加，表明由于组织中的活跃复制而导致金黄色葡萄球菌感染的建立。

皮下组织和肌肉的细菌负荷高于肺和脾脏。数据显示，烧伤的大鼠在接种铜绿假单胞菌后24小时和接种金黄色葡萄球菌后48小时发生全身感染。完全去除大鼠背部的毛发，并保持协议中提到的温度和燃烧诱导时间。

铜棒的剩余头发和不同的温度会影响烧伤的质量。可以探索大鼠烧伤模型以评估用于治疗烧伤创面感染和评估不同伤口敷料的新型局部疗法。