该方法有助于回答烧伤领域有关战伤处理或火灾事故后烧伤治疗方法等关键问题。这种猪烧伤模型的主要优点是猪与人体皮肤组织的解剖与生理结构之间的相似性。虽然该方法可以深入了解藻酸钙多糖敷料对烧伤伤口愈合的影响,但也可用于烧伤管理的研究。
在进行烧伤之前,剃须和保湿大约25厘米宽的皮肤区域,从椎柱一直到麻醉成年猪脊柱两侧的轴。然后,用波维酮碘擦洗暴露的皮肤约五分钟。使用湿无菌纱布去除波维酮碘肥皂,用波维酮碘肥皂消毒干净化妆水。
并使用手术标记笔来标定动物的伤口上六个烧伤伤口位置的中心。然后,用无菌手术窗帘盖住动物,注意每个区域之间的距离至少大于区域的半径。当所有区域都标注后,将装有约 9 平方厘米平坦区域的改良焊接铁填充 50 毫升甘油,并将电子温度计插入熨斗中以监控温度。
在热板上将熨斗加热至 137 至 139 摄氏度后,轻轻将熨斗压到每个标记区域上 30 秒,每个区域产生 6 个均匀的烧伤伤口。当加热的熨斗接触皮肤时,热量会立即消散到烧伤区域的表面,因此在涂抹烧伤前,请务必预热熨斗和甘油至少 10 分钟。然后,用0.9%的盐水溶液清洗伤口,通过光微成像测量和记录伤口尺寸。
测量所有伤口后,将敷料直接涂抹在每个伤口上,然后将防水膜涂抹在内敷料层上,作为防止细菌渗透的屏障。然后,在每个伤口上贴上一块5厘米厚的纱布,作为敷料的中层,用外层粘合石膏固定纱布,将石膏延伸至躯干,以避免敷料的位移。前 10 天每两天更换一次临床敷料,然后每周更换两次,直到第 42 天,在每次敷料重新申请之前,根据温哥华疤痕量表清洁和测量伤口。
在燃烧后日零、7、21 和 42 上对伤口进行抗菌测试,将拭子放在 0.9% 无菌盐水溶液的 100 毫升中。轻轻涡流棉签,获得均匀悬浮液,并连续稀释产生的细胞溶液。然后,在选择性或非选择性介质中每次稀释的100微升,在37摄氏度的有氧条件下孵育伤口培养24至72小时。
在孵化结束时,从三联中每个稀释培养的10微升等同板到血脂盘上,辅以5%的羊血,在37摄氏度下进行隔夜培养。第二天早上,使用一个标记和一个小尺子将每道菜的底部分成四个相等的象限,并在解剖显微镜下确定每个象限中形成殖民地的单位数。在这个具有代表性的实验中,烧伤伤口的再上皮化通过烧伤后第42天的毛检进行评价。
与零日相比,伤口面积显著减少。愈合率被定义为从伤口中心到伤口中心的最大平均伤口距离距离除以完成伤口闭合的时间,显示烧伤后第42天伤口闭合率超过73%。温哥华疤痕得分在烧伤后第21天达到顶峰,并在烧伤后第42天降至低于初始伤口大小。
对第42天采集的皮肤样本进行组织检查,证实已实现全厚烧伤,伤口似乎已完全愈合。烧伤导致的坏死可以在伤口的表皮、真皮和皮肤成分中观察到,而不会显著影响基础肌肉。实验敷料下方的厚度为5.4毫米,观察到皮肤渗漏和淋巴细胞渗透。
在烧伤后零、七、二十一和四十二天收集的伤口拭子的细菌培养表明,在第42天,从零天到21日,形成菌落的单位略有增加,这证实了这种严重烧伤的猪模型可用于监测实验敷料的临床表现。在尝试此过程时,重要的是要记住如何处理动物,然后在活动期间正确监测动物的重要迹象。按照这个程序,可以执行其他方法,如细菌生长实验,以回答有关天然多糖材料在严重烧伤情况下如何工作的其他问题。
该技术开发后,为烧伤伤口愈合领域的研究人员探索天然碳酸钙多糖敷料在人体皮肤愈合中的影响铺平了道路。不要忘记,使用加热的铁和甘油可能极其危险,执行手术时应始终采取诸如功能设备等预防措施。