该协议的总体目标是生成获得性甲状旁腺功能减退症的大鼠模型,该模型易于建立,性质稳定,对甲状腺无害。该模型的主要优点是在碳纳米颗粒的帮助下精确去除甲状旁腺。我们希望该模型可以帮助解决甲状旁腺功能减退症领域的一些问题。
例如,术前使用钙和维生素 D 来降低甲状腺切除术后低钙血症的风险。这种方法可以深入了解PTH类似物如何影响骨转换以及PTH类似物在长期使用中如何影响身体。那些第一次执行这种技术的人可能会发现很难在体视显微镜下进行微观操作。
在体视显微镜下进行一些练习可能会有所帮助。首先,将麻醉的大鼠置于仰卧位并剃掉腹颈区域的皮毛。按照手稿中的描述做一个切口后,找到甲状腺的叶。
使用配备30号斜面针的10微升注射器,将1微升碳纳米颗粒悬浮液注入甲状腺膜的内侧部分。五分钟后,用盐水冲洗该区域以清洁任何多余的悬浮液。确保甲状腺变黑,并观察未染色的甲状旁腺。
使用一对显微手术钳和剪刀切割未染色的甲状旁腺,然后用中断的水平床垫缝合线关闭切口。手术后,将大鼠放在37摄氏度的恒温电热毯上以保持体温。七天后,使用尾静脉抽取 10 微升血液。
使用商业试剂盒测量血清钙、血清无机磷和血清甲状旁腺激素。甲状旁腺切除术大鼠在4周的观察期内表现出稳定的低钙血症和高磷血症。术后7天甲状旁腺切除术大鼠未检测到血清甲状旁腺激素。
术后7 d假甲状腺切除术组和甲状旁腺切除术组的血清尿素和肌酐相当。术后两周观察到尿钙离子和无机磷酸盐水平降低。在28天内,甲状旁腺切除术和假手术组的体重没有显着差异。
甲状旁腺切除术大鼠血清C-端肽显著下降。血清骨钙素水平无显著差异。然而,纳米颗粒悬浮注射是最重要的事情,成功的注射对于识别和目前切除甲状旁腺至关重要。
其他方法包括荧光引导手术,PTHcre-iDTR转基因小鼠的双耳毒素注射和无菌甲状旁腺切除术,可以帮助回答甲状腺功能亢进领域的问题。