탄소 나노입자 보조 부갑상선 절제술을 통한 부갑상선 기능 저하증 쥐의 생성

이 프로토콜의 전반적인 목표는 확립하기 쉽고 성격이 안정적이며 갑상선에 무해한 후천성 부갑상선 기능 저하증의 쥐 모델을 생성하는 것입니다. 이 모델의 가장 큰 장점은 탄소 나노 입자의 도움으로 부갑상선을 정밀하게 제거한다는 것입니다. 이 모델이 부갑상선 기능 저하증 분야의 몇 가지 질문을 해결하는 데 도움이 되기를 바랍니다.

예를 들어, 갑상선 절제술 후 저칼슘혈증의 위험을 줄이기 위해 수술 전 칼슘과 비타민 D를 사용합니다. 이 방법은 PTH 유사체가 뼈 회전율에 어떻게 영향을 미치는지, PTH 유사체가 장기간 사용 시 신체에 어떤 영향을 미치는지에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 이 기술을 처음 수행하는 사람들은 실체 현미경으로 미세 조작하기가 어려울 수 있습니다.

실체 현미경으로 몇 가지 연습을 하는 것이 도움이 될 수 있습니다. 시작하려면 마취 된 쥐를 앙와위 자세로 놓고 복부 목 부위의 털을 면도하십시오. 원고에 설명 된대로 절개 한 후 갑상선의 엽을 찾습니다.

30 게이지 베벨 바늘이 장착 된 10 마이크로 리터 주사기를 사용하여 1 마이크로 리터의 탄소 나노 입자 현탁액을 갑상선 막의 근심 부분에 주입합니다. 5 분 후, 식염수로 해당 부위를 관개하여 여분의 현탁액을 청소하십시오. 갑상선이 검게 변했는지 확인하고 염색되지 않은 부갑상선을 관찰하십시오.

한 쌍의 미세 수술 집게와 가위를 사용하여 염색되지 않은 부갑상선을 자른 다음 중단 된 수평 매트리스 봉합사로 절개 부위를 닫습니다. 수술 후 체온을 유지하기 위해 섭씨 37도의 온도 조절 전기 담요에 쥐를 놓습니다. 7 일 후 꼬리 정맥을 사용하여 10 마이크로 리터의 혈액을 채취합니다.

혈청 칼슘, 혈청 무기 인 및 혈청 부갑상선 호르몬을 상용 키트를 사용하여 측정합니다. 부갑상선 절제술을 받은 쥐는 4주간의 관찰 기간 동안 안정적인 저칼슘혈증과 고인산혈증을 나타냈다. 혈청 부갑상선 호르몬은 수술 후 7일 동안 부갑상선 절제술을 받은 쥐에서 검출되지 않았습니다.

혈청 요소와 크레아티닌은 수술 후 7일 후에 가짜 그룹과 부갑상선 절제술 그룹 간에 비슷했습니다. 감소된 소변 칼슘 이온과 무기 인산염 수치는 수술 2주 후에 관찰되었습니다. 28일 동안 부갑상선 절제술과 가짜 그룹 간에 체중의 유의미한 차이는 관찰되지 않았습니다.

혈청 C-telopeptide는 부갑상선 절제술 쥐에서 유의하게 감소했습니다. 혈청 오스테오칼신 수치에는 유의한 차이가 없었다. 그러나 나노 입자 현탁액 주입이 가장 중요하며 성공적인 주입은 부갑상선의 식별 및 현재 제거에 중요합니다.

다른 방법으로는 형광 유도 수술, PTHcre-iDTR 형질전환 마우스의 디프테리아 독소 주입, 갑상선 기능 항진증 분야의 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있는 무균 부갑상선 절제술이 있습니다.