需要基于细胞的测定来阐明分子功能。在关节炎研究中,分离原代细胞的方法在滑膜成纤维细胞中已经确立,但在滑膜巨噬细胞中尚未建立。因此,我们开发了一种方案,从关节炎模型中分离和扩增滑膜巨噬细胞和滑膜成纤维细胞。
来自鼠关节炎组织的原代滑膜成纤维细胞有助于阐明关节炎发病机制的分子机制。另一方面,骨髓来源的巨噬细胞、血单核细胞来源的巨噬细胞和巨噬细胞系经常被用作关节炎研究的巨噬细胞资源。由于巨噬细胞可以获得与其微环境相关的功能,因此巨噬细胞的一般来源可能缺乏关节炎组织特有的反应。
此外,很难通过分选获得足够的滑膜细胞,因为即使在关节炎模型中,鼠滑膜也是一个非常小的组织。在先前分离滑膜成纤维细胞的方法中,滑膜巨噬细胞被丢弃。除此之外,还报道了一种从某些器官中分离和扩增常驻巨噬细胞的方法。
因此,对现有方案进行组合修改,以从鼠关节炎组织中分离和扩增滑膜巨噬细胞和滑膜成纤维细胞。该方法可从炎性滑膜中分离巨噬细胞和成纤维细胞,纯度高,简单且可重复。该方法允许滑膜巨噬细胞在与滑膜成纤维细胞共培养的情况下扩增。
此外,该方法提供了一个优势,因为滑膜成纤维细胞可以用更少的传代使用。建立的方案对于阐明类风湿性关节炎的病理机制将是一个优势。