Chronic Intermittent Ethanol Vapor Exposure Paired with Two-Bottle Choice to Model Alcohol Use Disorder

我们的研究涉及酒精使用障碍领域。本研究重点介绍了已建立的 Alco 依赖性小鼠模型中常用的方法。该模型是一种慢性间歇性乙醇蒸气，与双瓶选择范式配对。

CIE 两瓶选择范式。自动两瓶选择设备允许通过记录超级触摸的频率来监控小鼠的饮水行为。这使我们能够获取除消耗量之外的其他信息，例如在整个饮酒过程中饮酒的时间。

在酒精使用障碍的临床前研究中，通常使用各种病毒转基因小鼠的全脑成像、化学遗传学和光遗传学等方法来推进该领域的研究。还使用了其他方法，例如计算建模。酒精依赖的两瓶选择 CIE 模型已经建立多年。

但是，我们希望使更广泛的研究界更容易采用该方法。与用于研究酒精使用障碍的其他技术进行比较。两瓶选择和 CIE 范式有几个优点，可以提高翻译相关性，例如诱导显着的戒断症状和酒精摄入量增加的发展。

这种方法非常适合用于研究由酒精依赖引起的相关神经生物学变化。要开始栖息，请在关灯前 30 分钟将一组饲养的小鼠转移到它们各自的饮水笼中。记录每个饮水瓶的体积，然后让小鼠饮水两个小时。

记录饮用期后的瓶子体积。现在将小鼠暴露于至少两周的基线两瓶选择饮水中，以建立稳定的乙醇摄入量。通过给小鼠一个水瓶和第二个含有 15% 乙醇的瓶子来测试小鼠。

记录两小时饮用前后每瓶的容量。一旦小鼠达到稳定的乙醇摄入量基线，根据它们的摄入量将它们分成两组，然后将它们放回家笼中。腹膜内注射乙醇 - 吡唑溶液给小鼠。

用相同剂量的吡唑与生理盐水混合注射所有空气对照和其他组。注射后，将空气对照小鼠放在它们的家笼中，并将 CIE 笼子放在均热板内。锁上门并将泵设置为适当的蒸汽水平。

接下来，设置实验的运行时间，然后在蒸汽系统关闭前 30 分钟按下 CIE 均温板控制屏幕上的开始。测定小鼠的血液乙醇浓度。采集血液后，在 CIE 后一周将小鼠放回两个瓶子选择测试中。

将血液样品在 4 摄氏度下以 208 G 离心 1.0 分钟以分离血浆。使用氧速率乙醇分析仪测定血液乙醇浓度。在 CIE 之前，三周期间的初始基线乙醇摄入量稳定在每公斤 2.00 正负 0.21 克。

Bonferroni 事后测试表明，与基线饮水量相比，CIE 小鼠在蒸汽后第 6 周的乙醇摄入量显着增加。在 PV6 时，CIE 小鼠消耗的乙醇明显多于非依赖小鼠。Bonferroni 事后测试还表明，在 PV6 时，与它们自己的基线和非依赖小鼠相比，乙醇依赖小鼠的乙醇摄入量明显更高。

CIE 组分析的血液乙醇浓度显示每周平均每分升 173.12 毫克。