Unsere Forschung bezog sich auf den Bereich der Alkoholkonsumstörung. Diese Studie beleuchtet die Methodik, die üblicherweise im etablierten Modell der Alco-Abhängigkeitsmaus verwendet wird. Bei diesem Modell handelt es sich um einen chronisch intermittierenden Ethanoldampf, gepaart mit dem Paradigma der Zwei-Flaschen-Wahl.
Das CIE-Paradigma der Zwei-Flaschen-Wahl. Automatisierte Geräte zur Auswahl von zwei Flaschen ermöglichen die Überwachung des Trinkverhaltens von Mäusen, indem sie die Häufigkeit von Superberührungen aufzeichnen. Dies ermöglicht es uns, zusätzliche Informationen über die konsumierte Menge hinaus zu erhalten, wie z. B. den Zeitpunkt der Trinkgelage während einer Trinksitzung.
In präklinischen Studien zur Alkoholkonsumstörung werden Ansätze wie die Bildgebung des gesamten Gehirns, die Chemogenetik und die Optogenetik mit verschiedenen der viralen transgenetischen Mäuse häufig verwendet, um die Forschung auf diesem Gebiet voranzutreiben. Auch andere Ansätze wie die computergestützte Modellierung kommen zum Einsatz. Das Zwei-Flaschen-Auswahl-CIE-Modell für Alkoholabhängigkeit ist seit vielen Jahren etabliert.
Wir hoffen jedoch, die Übernahme des Ansatzes für die breitere Forschungsgemeinschaft leichter zugänglich zu machen. Vergleichen Sie mit den anderen Techniken, die zur Untersuchung der Alkoholkonsumstörung verwendet werden. Die Zwei-Flaschen-Auswahl und das CIE-Paradigma haben eine Reihe von Vorteilen, die die translationale Relevanz erhöhen, wie z.B. die Induktion der signifikanten Entzugssymptome und die Entwicklung der Eskalation des Alkoholkonsums.
Dieser Ansatz ist ideal, um die relevanten neurobiologischen Veränderungen zu untersuchen, die durch die Alkoholabhängigkeit verursacht werden. Um mit der Besiedlung zu beginnen, bringen Sie die in der Gruppe untergebrachten Mäuse 30 Minuten vor dem Ausschalten des Lichts in ihre individuellen Trinkkäfige. Notieren Sie das Volumen jeder Trinkflasche und lassen Sie die Mäuse dann zwei Stunden lang trinken.
Notieren Sie das Volumen der Flaschen nach der Trinkperiode. Setzen Sie die Mäuse nun mindestens zwei Wochen lang einer Ausgangsdosis von zwei Flaschen aus, um eine stabile Ethanolaufnahme zu etablieren. Testen Sie die Mäuse, indem Sie ihnen eine Wasserflasche und eine zweite Flasche mit 15 % Ethanol geben.
Notieren Sie das Volumen jeder Flasche vor und nach der zweistündigen Trinkperiode. Sobald die Mäuse eine stabile Ausgangsmenge an Ethanol erreicht haben, teilen Sie sie basierend auf ihrer Aufnahme in zwei Gruppen ein und setzen Sie sie wieder in ihren Heimkäfig. Injizieren Sie den Mäusen intraperitoneal eine Ethanol-Pyrazol-Lösung.
Injizieren Sie alle Luftregler und die anderen Gruppen mit der gleichen Pyrazoldosis, gemischt mit Kochsalzlösung. Setzen Sie die Luftkontrollmäuse nach den Injektionen in ihre Heimkäfige und platzieren Sie die CIE-Käfige in der Dampfkammer. Verriegeln Sie die Türen und stellen Sie die Pumpe auf den entsprechenden Dampfpegel ein.
Stellen Sie als Nächstes die Laufzeit des Experiments ein und drücken Sie dann 30 Minuten vor dem Ausschalten des Dampfsystems auf dem Bildschirm der CIE-Dampfkammer auf Start. Bestimmen Sie die Ethanolkonzentration im Blut der Mäuse. Nachdem Sie das Blut entnommen haben, bringen Sie die Mäuse in der Woche nach der CIE zu den Tests mit zwei Flaschen zurück.
Zentrifugieren Sie die Blutproben bei 208 G für 1,0 Minuten bei vier Grad Celsius, um das Plasma zu trennen. Verwenden Sie einen Ethanol-Analysator mit Sauerstoffgehalt, um die Ethanolkonzentration im Blut zu bestimmen. Die anfängliche Ethanolaufnahme zu Studienbeginn während des dreiwöchigen Zeitraums stabilisierte sich vor dem CIE bei 2,00 plus oder minus 0,21 Gramm pro Kilogramm.
Ein Post-hoc-Test von Bonferroni zeigte, dass die CIE-Mäuse ihre Ethanolaufnahme in der sechsten Woche nach dem Dampfen im Vergleich zu ihrem Ausgangstrinkvolumen signifikant erhöhten. Die CIE-Mäuse konsumierten signifikant mehr Ethanol als die nicht abhängigen Mäuse bei PV6. Der Bonferroni-Post-hoc-Test zeigte auch, dass die ethanolabhängigen Mäuse bei PV6 eine signifikant höhere Ethanolaufnahme aufwiesen als ihre eigenen Ausgangsmäuse und nicht abhängigen Mäuse.
Die analysierten Ethanolkonzentrationen im Blut der CIE-Gruppe zeigten einen Wochendurchschnitt von 173,12 Milligramm pro Deziliter.
