Nossa pesquisa pertencia ao campo do transtorno do uso de álcool. Este estudo destaca a metodologia comumente utilizada no modelo de camundongo de dependência de Alco estabelecido. Este modelo é um vapor de etanol intermitente crônico emparelhado com o paradigma de escolha de duas garrafas.
O paradigma de escolha de duas garrafas CIE. O equipamento automatizado de escolha de duas garrafas permite o monitoramento do comportamento de consumo de ratos registrando a frequência de super toques. Isso nos permite adquirir informações adicionais além do volume consumido, como o tempo das bebedeiras durante uma sessão de bebida.
Em estudos pré-clínicos do transtorno do uso de álcool, as abordagens como imagens cerebrais inteiras, quimiogenética e optogenética com vários camundongos transgenéticos virais são frequentemente usadas para avançar na pesquisa neste campo. Outras abordagens, como a modelagem computacional, também podem ser utilizadas. O modelo CIE de escolha de duas garrafas para dependência de álcool foi estabelecido há muitos anos.
No entanto, esperamos tornar a adoção da abordagem mais prontamente acessível à comunidade de pesquisa mais ampla. Compare com as outras técnicas usadas para estudar o transtorno do uso de álcool. A escolha de duas garrafas e o paradigma CIE apresentam várias vantagens que aumentam a relevância translacional, como a indução dos sintomas de abstinência significativos e o desenvolvimento do aumento da ingestão de álcool.
Esta abordagem é ideal para seu uso no estudo das alterações neurobiológicas relevantes causadas pela dependência do álcool. Para começar a habitação, mova os ratos alojados em grupo para suas gaiolas individuais 30 minutos antes que as luzes se apaguem. Registre o volume de cada garrafa e deixe os ratos beberem por duas horas.
Registre os volumes das garrafas após o período de bebida. Agora exponha os camundongos a pelo menos duas semanas de consumo de escolha de duas garrafas para estabelecer uma ingestão estável de etanol. Teste os camundongos dando-lhes uma garrafa de água e uma segunda garrafa contendo 15% de etanol.
Registre os volumes de cada garrafa antes e depois do período de consumo de duas horas. Uma vez que os camundongos tenham atingido uma linha de base estável de ingestão de etanol, divida-os em dois grupos com base em sua ingestão e coloque-os de volta em sua gaiola doméstica. Injete intraperitonealmente nos camundongos uma solução de etanol-pirazol.
Injetar todos os controles de ar e os outros grupos com a mesma dose de pirazol misturada com solução salina. Após as injeções, coloque os ratos de controle de ar em suas gaiolas domésticas e coloque as gaiolas CIE dentro da câmara de vapor. Tranque as portas e ajuste a bomba para o nível de vapor apropriado.
Em seguida, defina o tempo de execução do experimento e pressione start na tela de controle da câmara de vapor CIE 30 minutos antes de o sistema de vapor desligar. Determine a concentração de etanol no sangue dos camundongos. Depois de coletar o sangue, devolva os camundongos ao teste de escolha de duas garrafas na semana seguinte ao CIE.
Centrifugue as amostras de sangue a 208 G por 1,0 minutos a quatro graus Celsius para separar o plasma. Use um analisador de etanol de taxa de oxigênio para determinar a concentração de etanol no sangue. A ingestão inicial de etanol durante o período de três semanas estabilizou-se em 2,00 mais ou menos 0,21 gramas por quilograma antes do CIE.
Um teste post hoc de Bonferroni mostrou que os camundongos CIE aumentaram significativamente sua ingestão de etanol na sexta semana pós-vapor em comparação com o volume de consumo basal. Os camundongos CIE consumiram significativamente mais etanol do que os camundongos não dependentes em PV6. O teste post hoc de Bonferroni também mostrou que, no PV6, os camundongos dependentes de etanol tiveram uma ingestão significativamente maior de etanol em comparação com seus próprios camundongos basais e não dependentes.
As concentrações de etanol no sangue analisadas do grupo CIE apresentaram uma média semanal de 173,12 miligramas por decilitro.
