Stress verstärkt Angst lernen, ein stabiles Nagetier Modell der posttraumatischen Belastungsstörung

Zusammenfassung

Hier beschreiben wir die detaillierte Methodik für Stress erhöhter Angst lernen (SEFL), einem präklinischen Modell der posttraumatischen Belastungsstörung bei Ratten und Mäusen Experimente erforderlich. Das Modell nutzt Aspekte der Angst Pawlowsche Konditionierung und als Index der erhöhte Angst bei Nagetieren einfrieren.

Zusammenfassung

Angst Verhaltensweisen sind wichtig für das Überleben, aber unverhältnismäßig hohes Maß an Angst können erhöhen die Anfälligkeit für psychiatrische Erkrankungen wie posttraumatische Belastungsstörung (PTBS) entwickeln. Um die biologischen Mechanismen der Angst Dysregulation bei PTBS zu verstehen, ist es wichtig, mit einer gültigen Tiermodell der Störung zu beginnen. Dieses Protokoll beschreibt die Methodik für Stress erhöhter Angst lernen (SEFL), einem präklinischen Modell der posttraumatischen Belastungsstörung, bei Ratten und Mäusen Experimente erforderlich. SEFL wurde entwickelt, um kritische Aspekte der posttraumatischen Belastungsstörung, einschließlich der langfristigen Sensibilisierung der Angst lernen, verursacht durch eine akute Stressor zu rekapitulieren. SEFL verwendet Aspekte der Pawlowsche Konditionierung Angst sondern erzeugt eine deutliche und robuste sensibilisierten Angstreaktion weit größer als normale bedingte Angst Antworten. Das Trauma-Verfahren beinhaltet ein Nagetier in einer Klimaanlage Kammer platzieren und Verwaltung von 15 unsignaled Schocks nach dem Zufallsprinzip verteilt über 90 Minuten (für Ratte Experimente; für Maus-Experimente, Schocks, die zufällig verteilt über 60 Minuten dienen 10 unsignaled) . Am 2. Tag Nager befinden sich in einem Roman Konditionierung Kontext wo erhalten sie einen einzigen Schlag; dann, am Tag 3 sie sind wieder in demselben Kontext wie am 2. Tag platziert und für Änderungen in der eisigen Ebenen getestet. Nagetiere, die zuvor die Trauma-Anzeige verbessert Ebenen des Einfrierens auf dem Testtag im Vergleich zu denen, die keine Erschütterungen am ersten Tag erhalten. So erzeugt eine einzelne sehr stressige Erlebnis (Trauma) mit diesem Modell extreme Angst vor die Reize, die mit dem traumatischen Ereignis verknüpft.

Einleitung

Angst ist eine kritische Verhalten für das Überleben, denen Einzelpersonen zu erkennen und reagieren auf Bedrohungen. Jedoch können übertriebene Angst Antworten zur Entwicklung von psychiatrischen Erkrankungen wie posttraumatische Belastungsstörung (PTBS). Kennzeichnend für PTBS ist eine übertriebene Reaktion auf milde Stressoren, insbesondere diejenigen, die erinnern an das ursprüngliche Trauma und eine Tendenz zu entwickeln, neue Ängste^1,2. Im Labor wird Angst oft gemessen, durch Einfrieren Verhalten, das eine zuverlässige und ethologically gültige Index der Angst vor Menschen und Nagern^3,4ist. Es ist bekannt, dass PTBS Dysregulation von Angst und verstärkte Angst Ausdruck betrifft, fehlt robuste Tiermodellen der PTSD, die diese erweiterten Angstreaktion auf eine relativ harmlose Reiz zuverlässig zu erfassen.

Dieses Protokoll bietet die detaillierte Methodik zur Durchführung von Stress erhöhter Angst lernen (SEFL) versuchen, eine zuverlässige und robuste präklinischen Modell der posttraumatischen Belastungsstörung, bei Ratten und Mäusen erforderlich. SEFL nutzt Aspekte der Pawlowsche Angst Konditionierung, aber es unterschiedliche Antworten von normalen Angst Klimaanlage produziert und rekapituliert die verstärkte Angst vor folgender traumatischer Stress bei PTBS Patienten^5,6beobachtet. In diesem Modell einzelne sehr stressig (nachfolgend als Trauma) führt zu einem dauerhaften Verhaltensänderungen, einschließlich extreme Angst vor Reize mit dem traumatischen Ereignis verknüpft, erhöhte Angst, Startle Reaktivität erhöht und verändert Glukokortikoid-Signalisierung^7,8. Die große Besonderheit des SEFL ist, dass die folgenden Exposition zu einer traumatischen Stressor (eine Serie von unsignaled Schocks) in einem unterschiedlichen Kontext Tiere zeigen eine übertriebene Angstreaktion auf eine milde Stressor (zB., einen einzigen Schlag) in einem anderen Kontext. Wichtig ist, ist die SEFL Wirkung nicht durch die Verallgemeinerung aus dem Trauma-Kontext auf die neuartige Kontext oder erhöhte Schock Empfindlichkeit⁵. In unserem Modell nutzen wir gezielt Verfahren, die Verallgemeinerung zu einem neuartigen Kontext wie ausgeprägten Verkehr, Geruch und Raster Boden Muster zu reduzieren. Daher im Gegensatz zu normalen Angst Klimaanlage ist SEFL ein nicht-assoziativen Prozess, der zu einer neuen Angst lernen führt, die überproportional im Zusammenhang mit der ökologischen Hinweise, die nicht direkt mit dem traumatischen Erlebnis verbunden. Umfangreiche Arbeit zeigt, dass eine 90-minütige Sitzung mit 15 unvorhersehbaren Schocks in Ratten (oder einer 60-minütigen Sitzung mit 10 unvorhersehbaren Schocks bei Mäusen) eine lang anhaltende Sensibilisierung der Angst Klimaanlage sowie erhöhte Ängstlichkeit induziert und Dysregulation im zirkadianen Rhythmus des basalen Corticosteron. Im Gegensatz dazu vor der Exposition zu einer einzigen fußreiz SEFL⁹produziert nicht. Darüber hinaus kann SEFL zuverlässig bei Ratten und Mäusen genutzt werden.

Daher ist das SEFL Modell der posttraumatischen Belastungsstörung ein mächtiges Werkzeug zum Sondieren der biologischen Mechanismen PTSD Pathophysiologie beteiligt. Mit SEFL, können Forscher untersuchen wie die Exposition gegenüber einem Trauma Zukunft Angst lernen auswirken kann. Darüber hinaus kann dieses Modell für die Untersuchung von bestimmter zellulärer und molekularer Mechanismen, die bei der Regulierung der verstärkte Angst Ausdruck wie bei PTBS beobachtet beteiligt sein können nützlich sein.

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Protokoll

1. Themen

1. Ratten
   1. Ratten, die ankommen, wenn sie etwa 90 Tage alt und Single-untergebracht in standard Ratten Käfige sind zu bestellen.
      Hinweis: Gehäuse wird empfohlen, da Gruppenhaltung Variabilität aufgrund von Wechselwirkungen zwischen den Tieren im Hause Käfig, besonders nach Stress-Exposition produziert. SEFL wurde bei männlichen und weiblichen Ratten, in Long-Evans und Sprague-Dawley Ratten und bei Ratten im Alter von 19 Tage alt^7,10nachgewiesen.
   2. Zufallsprinzip Tiere mindestens zwei Bedingungen: Trauma (n = 8) und kein Trauma (n = 8) (siehe Rau Et Al. ⁵ zusätzliche Bedingungen).
2. Mäuse
   1. Bestellen Sie Mäuse zu kommen, wenn sie ungefähr 60 Tage alt und Single-untergebracht in Standardmaus Käfigen sind. Single-Haus die Mäuse für mindestens 4 Wochen vor dem Trauma sowie während der gesamten Experiment.
   2. Zufallsprinzip Tiere mindestens zwei Bedingungen: Trauma (n = 8) und kein Trauma (n = 8).

2. Geräte-Setup

1. Richten Sie einen Satz von Furcht-Konditionierung Kammern als Kontext A und eine zweite Reihe von Furcht-Konditionierung Kammern dienen als Rahmen B dienen (siehe Materialtabelle). Platzieren Sie jede Angst-Klimaanlage-Kammer in einer Klang-mildernde Kabine eindringen von Außenlärm zu verhindern (siehe Materialtabelle).
   1. Stellen Sie sicher, dass eine Methode beleuchten die Kammern mit sichtbarem Licht (z. B. ein weißes Overhead Haus Licht) in den Kammern, die als Kontext (siehe Materialtabelle) vorhanden ist.
   2. Sicherzustellen, dass zu reinigen die Kammern zwischen jedem Tier und bieten verschiedene Gerüche für jede Kammer gibt es verschiedene Lösungen (zB., verdünnte Lösung und 1 % Essigsäure Reinigung).
      Hinweis: Es ist wichtig, dass Tier-generierte Gerüche beseitigt¹¹sein.
   3. Platzieren Sie Kunststoff-Einsätze im Zusammenhang mit B, der innere Aufbau der beiden Kontexte zu unterscheiden. Eine schwarze Plexiglas dreieckig einfügen wird empfohlen. Alternativ können Sie eine weiße Plastikfolie eine gekrümmte Rückseite erstellen (siehe Materialtabelle).
   4. Legen Sie Gitterrosten in jeder Kammer für fußreiz Lieferung, mit einem anderen Raster für jeden Kontext Boden Textur zwischen Kontexten unterscheiden (siehe Materialtabelle) Konditionierung Angst.
      Hinweis: Hinreichend deutliche Gitter Muster umfassen flache Gitter (alle Balken in einer horizontalen Ebene angeordnet), Netze (Balken in zwei versetzte horizontale Ebenen angeordnet) gestaffelt, und abwechselnd Raster (Balken angeordnet in einer horizontalen Ebene, aber unterschiedlicher -Durchmesser).
   5. Stellen Sie sauber Metall Pfannen unter jedes Raster Boden Kot zu sammeln. Pfannen mit der Reinigungslösung Duft (siehe Materialtabelle).
2. Bereitzustellen Sie exaktes Timing und Amplitude der fußreiz Lieferung für jeden Kontext.
   1. Schließen Sie eine Schock-Generator und Scrambler 1 mA oder niedriger Amplitude Schocks jeder Netz-Etage für fußreiz Lieferung liefern (siehe Materialtabelle).
      Hinweis: Die Schock-Generatoren und Scrambler sollte außerhalb der Klang mildernde Kammer, mit Verbindungskabel zwischen Generatoren und Scrambler Gitterrosten über Öffnungen in den Klang mildernde Kammer befinden. Dies verhindert Beschädigungen durch Kauen, Reinigung, Lösung, etc..
   2. Verwenden Sie ein Multimeter zum Testen des aktuellen indem jede Sonde auf eine andere Bar von der Netz-Etage und bestätigt, dass die gewünschte Schock Amplitude entsteht (siehe Materialtabelle) durch den Schock-Generator geliefert.
   3. Stellen Sie sicher, dass eine Methode für die Steuerung, das Timing und die Amplitude der Schock Lieferung (z. B. Computer-Software) zur Verfügung (siehe Materialtabelle).
3. Stellen Sie sicher, dass eine Methode für die Video-Aufzeichnung jedes Tier während jeder experimentelle Sitzung zur Verfügung (siehe Materialtabelle).
   Hinweis: Es wird notwendig sein erfassen sowohl (1) Wenn die Kammern durch sichtbares Licht beleuchtet sind und (2) Wenn die Kammern dunkel sind. Letzteres kann erreicht werden, indem unter Verwendung einer NACHTSICHTKAMERA oder beleuchten und Aufnahme der abgedunkelten Kammern mit Infrarot- oder Nah-Infrarot-Licht.
4. Sicherstellen Sie, dass eine unverwechselbare Methode zum Transport von Tieren aus dem Vivarium in Rahmen B zur Verfügung, um die beiden Kontexte weiter zu differenzieren.
   Hinweis: Während Methoden wie eine schwarze Kunststoff-Wanne (38 x 30 x 24 cm) unterteilt in vier Fächer oder leeren Käfigen erfolgreich eingesetzt, andere Transportbox, die aus dem Hause Käfig deutlich unterscheidet genutzt werden.

(3) SEFL Verfahren für Ratten und Mäuse

1. Behandeln Sie alle Nagetiere täglich durch vorsichtig herausnehmen aus dem Homecage und halten jeweils 60-90 Sekunden für mindestens 7 Tage vor Beginn des Verfahrens SEFL.
2. Am 1. Tag des Verfahrens SEFL setzen Sie Themen in Zusammenhang mit A, wo erhalten sie die traumatische Stressor.
   1. Kontext A eingerichtet, mit einem Satz von Gitterrosten (zB., flache Gitter) und die Kammern mit sichtbarem Licht zu beleuchten.
   2. Benutzen Sie ein Multimeter testen den aktuellen indem jede Sonde auf eine andere Bar von der Netz-Etage und bestätigt, dass die gewünschte Schock Amplitude entsteht durch den Schock-Generator geliefert.
      Hinweis: Beschädigung und Korrosion der Balken kann schwach oder unebenen Schock Lieferung führen. Flüssigkeiten einschließlich Urin berühren das Gitter an der Wand entlang können Schock Lieferung auch negativ beeinflussen.
   3. Wischen Sie den Wänden und Türen und sprühen Sie die Pfannen unter den Gitterrosten mit einer Lösung (zB., verdünnte Reinigungslösung).
      Hinweis: Dies ist notwendig um Gerüche aus der vorherigen Tiere zu beseitigen.
   4. Transport Tiere aus dem Vivarium in den experimentellen Raum in ihrem Hause Käfigen platziert auf einem Wagen und Ort einzeln in die Angst-Klimaanlage-Kammern. Bringen Sie nur eine Runde im Wert von Tieren (bestimmt durch die Anzahl der Kammern Konditionierung Angst) zum Experiment Raum zu einem Zeitpunkt.
      Hinweis: Zur Vermeidung von verwirrt durch Bestellung oder timing, sollte jeder Runde Tiere in das Trauma und kein Trauma-Bedingungen enthalten.
   5. Für Ratte Experimente, verwenden Sie die Schock-Generator und Scrambler, um 15 1 s, 1-mA Footshocks, die nach dem Zufallsprinzip präsentiert über 90 Minuten zu liefern (durchschnittliche ISI = 6 min.) durch die Gitter Gitter von den Kammern Trauma Zustand Themen. Kein Trauma Steuerelemente mit dem gleichen Kontext für 90 Minuten ohne Schock Lieferung aussetzen.
   6. Für Maus-Experimente, verwenden Sie die Schock-Generator und Scrambler, um 10 1-s, 1-mA Footshocks, die nach dem Zufallsprinzip präsentiert mehr als 60 Minuten zu liefern (durchschnittliche ISI = 6 min.) durch den Gitterrosten der Kammern mit Trauma Zustand Themen. Kein Trauma Steuerelemente mit dem gleichen Kontext für 60 Minuten ohne Schock Lieferung aussetzen.
   7. Nach 90 Minuten (Ratte Experimente) oder 60 Minuten (Maus-Experimente) wieder alle Tiere an ihre Homecages und prompt das Vivarium.
3. Am 2. Tag des Verfahrens SEFL bewerten Sie die Angst vor dem Trauma-Kontext auf Wunsch.
   1. Kontext A wie am 1. Tag fertig eingerichtet.
   2. Transportieren Sie die Tiere zum Experiment Raum in ihrem Hause Käfigen wie am 1. Tag.
   3. Statt Tiere im Kontext A für 8 Minuten ohne Schock Lieferung und Video erfassen das Verhalten während der gesamten Sitzung.
   4. Nach 8 Minuten wieder alle Tiere an ihre Homecages und prompt das Vivarium.
4. Am 3. Tag des Verfahrens SEFL setzen Sie alle Themen zu den milden Stressor im Zusammenhang mit B.
   Hinweis: Dieses Verfahren kann bis zu 24 Stunden bis 90 Tage nach der traumatischen Stressor⁹überall auftreten.
   1. Richten Sie Kontext B mit einem anderen Satz von Gitterrosten aus denen, die in Zusammenhang mit A verwendet (z.B. Wechsel- oder gestaffelte Gitterrosten) und schwarz dreieckig oder weißen gebogenen Plexiglas-Einsätze. Leuchten Sie die Kammern mit sichtbarem Licht nicht; Obwohl, Infrarot- oder Nah-Infrarot-Licht nach Bedarf verwendet werden kann.
   2. Benutzen Sie ein Multimeter testen den aktuellen indem jede Sonde auf eine andere Bar von der Netz-Etage und bestätigt, dass die gewünschte Schock Amplitude entsteht durch den Schock-Generator geliefert. Benutzen Sie ein Multimeter testen den aktuellen indem jede Sonde auf eine andere Bar von der Netz-Etage und bestätigt, dass die gewünschte Schock Amplitude entsteht durch den Schock-Generator geliefert.
      Hinweis: Beschädigung und Korrosion der Balken kann schwach oder unebenen Schock Lieferung führen. Flüssigkeiten einschließlich Urin berühren das Gitter an der Wand entlang können Schock Lieferung auch negativ beeinflussen.
   3. Wischen Sie die Kammern und sprühen Sie die Pfannen unter den Gitterrosten mit der Lösung nicht in Zusammenhang mit A verwendet (zB., 1 % Essigsäure).
   4. Transport Tiere aus dem Vivarium in den experimentellen Raum in einer Methode unterscheidet sich von der Methode verwendet für Kontext ein (z. B. eine schwarze Kunststoff-Wanne) und legen Sie sie einzeln in die Angst, die Konditionierung Kammern. Bringen Sie nur eine Runde im Wert von Tieren zum Experiment Raum zu einem Zeitpunkt (bestimmt durch die Anzahl der Kammern Konditionierung Angst).
   5. Setzen Sie alle Tiere, die milde Stressor (siehe unten) und video-Aufzeichnung Einfrieren und Aktivität während der Sitzung aus.
      1. Nach einer 180-s Basisperiode liefern Sie entweder einen einzelnen 1-s, 1-mA fußreiz (Ratten) oder ein einziges 2-s, 1-mA fußreiz (Mäuse) für alle Tiere.
         Hinweis: Stellen Sie sicher, dass während der 180-s Basisperiode Einfrieren nicht mehr 5 %^{12 als sollte}.
      2. Entfernen Sie alle Tiere 30 Sekunden nach der Schock-Lieferung und prompt ins Vivarium.
5. Am 4. Tag des Verfahrens SEFL testen Sie Angst in Zusammenhang mit milder Stressor.
   1. Rahmen B als am Tag3 fertig eingerichtet.
   2. Transportieren Sie Tiere aus dem Vivarium in den experimentellen Raum in den gleichen Transport, wie am 3. Tag getan.
   3. Setzen Sie Tiere in Rahmen B für 8 Minuten ohne Schock Lieferung und Video Aufzeichnung Einfrieren während der gesamten Sitzung.
   4. Entfernen Sie alle Tiere nach 8 Minuten und prompt ins Vivarium.

(4) Datenanalyse

1. Maßnahme Angst während der aufgezeichneten experimentelle Sessions mit definiert Einfrieren, als das Fehlen aller Bewegung sei denn, dass die für die Atmung benötigt wird.
   Hinweis: Einfrieren ist am genauesten durch ein blinder Mensch Torschütze erzielte, aber es gibt mehrere automatisierte Programme, die gute Leistung. Jedoch müssen alle automatisierte Systemen für einen menschlichen Betrachter genau¹³kalibriert werden.
   1. Tor von hand Einfrieren, haben ein Experimentator blind für experimentellen Bedingungen beobachtet das Thema alle 4 Sekunden während der gesamten Zeit von Interesse³. Klassifizieren Sie bei jeder Beobachtung das Subjekt als "Einfrieren" oder "nicht einfrieren". Vergleichen Sie die Anzahl der eisigen Beobachtungen auf die Gesamtzahl der Beobachtungen zu bestimmen, das Prozent Zeit einfrieren.
   2. Um automatisierte Videoanalyse zum Einfrieren der Gäste verwenden, überprüfen Sie zunächst, dass die Ergebnisse von automatischen Videoanalyse entsprechen die Ergebnisse von Hand-scoring, da eine wesentlich andere Einfrieren Ergebnis von automatisierten Analyse ungenaue Ergebnissen führen kann.
      Hinweis: Eine Ratte oder Maus, die nie schockiert zeigen sollte zwischen 0 und 5 %, Einfrieren, während höhere Werte schlechte Kalibrierung des Gerätes deuten
2. Verwenden Sie die Methoden, die oben beschriebene um Angst während der Zeiträume von Interesse (siehe unten) zu messen.
   1. Messen Sie Angst vor dem Trauma-Kontext als die prozentuale Zeit einfrieren über die gesamte 8-min-Testsitzung am 2. Tag.
   2. Verallgemeinerung der Angst aus dem Trauma-Kontext auf den milden Stressor-Kontext als die prozentuale Zeit Einfrieren während der 3-min Basisperiode im Kontext B am 3. Tag vor Schock Lieferung zu messen.
      Hinweis: Für SEFL ist es wichtig, die Zusammenhänge gut genug zu unterscheiden, so dass es keine erheblichen Verallgemeinerung.
   3. Messen Sie Angst sofort nach dem Schock am Tag3 als die prozentuale Zeit Einfrieren während der 30-s-Periode, die den Schock folgt.
   4. Messen Sie Angst in Zusammenhang mit milder Stressor als die prozentuale aufgewendete Zeit über die gesamte 8-min-Testsitzung am 4. Tag.
3. Schock-Reaktivität durch die Menge oder die Geschwindigkeit der Bewegung während der 3-s während und unmittelbar nach dem Schock am Tag3 zu messen.
   Hinweis: ANOVAs sind zu empfehlen für alle die Datenanalyse als zusätzliche Gruppen (zB., medikamentöse Behandlung) können bei Bedarf hinzugefügt werden.

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Ergebnisse

Die Trauma-Kontext-Testergebnisse am 2. Tag sind in Abbildung 1dargestellt. Tiere in der Trauma-Zustand zeigten signifikant höhere Einfrieren im Kontext A im Vergleich zu den kein Trauma Kontrollen, Erwerb von Angst vor dem Trauma Kontext angibt [Ratten: F(1,17) = 23.58, p < 0,01; Mäuse: F(1,14) = 666.50, p < 0,0001]. Einfrieren während der Basisperiode vor der einzige Schock im neuartigen Rahmen am Tag3 in Abbildung ...

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Diskussion

SEFL ist eine robuste Verhaltensmodell von PTSD, die zusammengefaßt werden kann, bei Ratten und Mäusen und kann verwendet werden, um die sensibilisierten Angst-Reaktionen zu studieren, die PTBS charakterisieren. Nach traumatischen Stress zeigen Nagetiere eine erhöhte Angstreaktion in einem unterschiedlichen Kontext erst nach diesem Zusammenhang mit einer milden Stressor gekoppelt ist, die als eine Erinnerung an eine frühere traumatische Erfahrung dient. Nach den traumatischen Stress zeigen Nagetiere wenig überrasche...

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Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Fear Conditioning Chamber for Low Profile Floors	Med Associates Inc.	VFC-008-LP	Fear conditioning chamber
Sound Attenuating Cubicle	Med Associates Inc.	NIR-022SD	Sound-attentuaing cubicle to prevent intrusion of outside noise
NIR/White Light Control Box	Med Associates Inc.	NIR-100VR	Light control box capable of delivering white and near-infrared light
NIR VFC Light Box	Med Associates Inc.	NIR-100L2	White overhead houselight
Windex Original Glass Cleaner	Windex		Solution for cleaning and scenting fear conditioning chambers between animals
Acetic acid	Fisher Scientific	A38-212	Solution for cleaning and scenting fear conditioning chambers between animals
A-Frame Chamber Insert	Med Associates Inc.	ENV-008-IRT	Black Plexiglas triangular insert to differentiate internal layout of Contexts A and B
Curved Wall Insert	Med Associates Inc.	VFC-008-CWI	White plastic sheet to differentiate internal layout of Contexts A and B
Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Grid Rods for Mouse	Med Associates Inc.	VFC-005A	Flat grid floor for mice
Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 1/8" & 3/16" Grid Rods Mouse	Med Associates Inc.	VFC-005-S	Staggered grid floor for mice
Low Profile Contextual Grid Floor with 1/8" Staggered Grid Rods for Mouse	Med Associates Inc.	VFC-005A-L	Alternating grid floor for mice
Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Grid Rods for Rat	Med Associates Inc.	VFC-005	Flat grid floor for rats
Low Profile Contextual Grid Floor with Alternating 3/16" & 3/8" Grid Rods	Med Associates Inc.	VFC-005-L	Alternating grid floor for rats
Low Profile Contextual Grid Floor with 3/16" Staggered Grid Rods for Rat	Med Associates Inc.	VFC-005-S	Staggered grid floor for rats
Metal pans	Med Associates Inc.		Metal pans to catch droppings underneath grid floors
Standalone Aversive Stimulator/Scrambler	Med Associates Inc.	ENV-414S	Shock generator and scrambler for footshock delivery
Multimeter	Fluke	87-5	Tool for measuring footshock amplitude
VideoFreeze Software	Med Associates Inc.	SOF-843	VideoFreeze software for controlling shock delivery
High Speed Firewire Monochrome Video Camera	Med Associates Inc.	VID-CAM-MONO-4	Video camera capable of recording in near-infrared light