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Infektion von In vivo und In Vitro Kiefern mit dem Kiefernfadenwurm Bursaphelenchus xylophilus und Isolierung von induzierten flüchtigen Bestandteilen

Transkript

Wir haben ein In-vitro-Co-Kultursystem von Kiefernsprossen mit den Kiefernnematoden etabliert, um Veränderungen in der flüchtigen Reaktion des Wirts auf diese Phytoparasiten zu vermarkten und zu untersuchen. Gewächshaus-Biohäuser ermöglichen die Kontrolle der Umweltvariabilität. Die genetische Vielfalt der Kiefernsämlinge beeinflusst jedoch immer noch die resultierenden flüchtigen Profile.

In-vitro-Kiefernsprossen, die mit den Kiefernnematoden infiziert sind, ermöglichen die Probenahme von leicht erhältlichen Pflanzenklonen, was den Einfluss der Variabilität durch die genetische Vielfalt der Kiefer verringert. Pflanzliche flüchtige Bestandteile werden bei der Destillationsextraktion durch Hydrodestillation isoliert, aber Headspace-Techniken ermöglichen die Profilierung der von der Pflanze emittierten flüchtigen Bestandteile. Mit Harz gepackte Säulen werden als nicht-invasive Technik verwendet, um flüchtige Bestandteile zu profilieren, die von in vitro gemahlener Kiefer emittiert werden, die mit Kiefernnematoden infiziert ist, für eine direkte Analyse des chemischen Zusammenspiels zwischen dem Wirt und dem Phytoparasiten.

Das Protokoll beschreibt die in vivo und in vitro Kiefernholznematodeninfektion von Pinus pinaster und deren Volatilomanalyse mittels Gaschromatographie (GC) und GC gekoppelt mit Massenspektrometrie (GC-MS).

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