Der Wellcome Trust für die Bereitstellung von Open-Access-Finanzierung der Universität Oxford. Robert Deacon ist ein Mitglied der Oxford OXION Gruppe, die von Wellcome Trust gewähren WT084655MA finanziert.

1. Burrowing 1. Apparat Verschiedene Container Designs wurden versucht (zum Beispiel ein Metall Krug, der leicht zu reinigen sein könnte, aber Mäuse zögerten, es zu betreten). Schließlich wurde entdeckt, dass eine Länge von Kunststoff-Fallrohr (wie auf Häuser Dachrinnen verbunden) leicht erhöht an einem Ende mit zufälligen (nicht bewusste) Verschiebung der Futterpellets zu verhindern und versiegelt am anderen Ende, war eine effiziente Apparat. Burrows sind nun aus Kunststoff Fallrohr, 68 mm Durchmesser, in 20 cm lange Längen (Abbildung 1) Schnitt. Ein Ende ist mit einem Pfropfen aus 12 mm MDF-Platten (MDF) abgedichtet. (Atemschutz wird empfohlen, bei der Arbeit mit mdf). Zur Reinigung und Abdichtung kann eine wasserdichte Kleber Mastix Verbindung zur Innen-und Außenflächen der mdf sowie dazu dienen, kleben Sie es in den Graben Rohr aufgebracht werden. Maschinenschrauben (5 cm lang) werden verwendet, um das andere Ende o erhöhenf der Röhre 3 cm über dem Boden. Zwei Löcher sind 1 cm vom offenen Ende der grabenden Rohr gebohrt in einem Winkel von 90 ° und die Schrauben eingesetzt und festgezogen 4. Der Durchmesser der Röhren ist wahrscheinlich kritisch; Schmid-Holmes et Al 19 beobachtet, dass Mäuse in freier Wildbahn &quot;Höhle gereinigt&quot; vor allem aus Höhlen eine ähnliche Größe wie unsere künstliche.. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig1.jpg" alt="Abbildung 1" /> Abbildung 1. Eine Maus in einer grabenden Röhre. 2. Verfahren <ol><li> Gewöhnung Burrowing ist in der Regel spontan, aber es gibt eine gewisse Lern-Element. Der Lernprozess wird durch soziale Erleichterung verbessert. Deshalb Ort eine komplette Bau über Nacht in die Gruppe Heimkäfig von Mäusen, die später mit einer Behandlung getestet werden. Jede Höhle ist mit 200 g der Lebensmittel Pellets in der Regel als Nahrung zugeführt gefüllt. (Dies bezieht sich auf ter dicht komprimierten Art der Ernährung, wenn eine &quot;erweiterte&quot; Ernährung ist in die Höhle hält weniger als 200g). Experimentatoren sollten berücksichtigt diese Faktoren nehmen bei der Auswahl eines grabenden Substrat. Wenn die Mäuse auf Lebensmittelmarken (z. B. um sie zu motivieren, um eine gleichzeitige Labyrinth Lernaufgabe run) sind Non-Food-Substanzen verwendet werden, zum Beispiel Tonkugeln als benutzt, um die Oberfläche des Bodens in Innenräumen Pflanzentöpfe Linie; Erbse Schindeln (kleine Steine ​​~ 1 cm Durchmesser) und Sand. Pea Kies und Sand, wobei drei Mal schwerer als Futterpellets, sind nützlich, Ersatz für Futterpellets, wenn die Mäuse sehr kräftig sind grabende, zu einem &quot;Ceiling-Effekt&quot; zu vermeiden. </li><li> Baselining Run (vorzugsweise zwei) Baseline grabenden Tests 48 h auseinander in der gleichen Weise wie für die Prüfung nach der vorgeschlagenen Behandlung durchgeführt werden. Der Test ist optimal um 16.00 Uhr gestartet werden, wenn die Mäuse auf 0700-1900 h Hell-Dunkel-Zyklus untergebracht sind. Das ist eine heikle Zeitum zu testen, da sie normalerweise nicht wach sind zu diesem Zeitpunkt und wühlen beginnt langsamer, als wenn sie auch in der dunklen Phase und damit sehr aktiv. Zwei Stunden nach dem Start wird ein &quot;Schnappschuss&quot; Messung des Gewichtes von Lebensmitteln eingegraben werden; die Höhle in einen tarierten Behälter geleert und gewogen, und die Pellets in die Höhle, die zurück in den Käfig gelegt wird ersetzt. Wenn die Maus in die Höhle, nur vorsichtig gießen und den Inhalt in die Wägebehälter und ersetzen Sie die Maus im Käfig. Das Gewicht bei 2 Stunden wühlte sich dann durch Subtraktion von den ursprünglichen 200 g. berechnet Die abschließende Lesung genommen wird am nächsten Morgen. Das Timing ist nicht kritisch, da die Mäuse zurück gegangen zu schlafen (oft in der Höhle) und sind nicht mehr aktiv graben. Verwenden Sie die 2 h-Messung an dem zweiten Versuch unternommen, um Gruppen ausgeglichen, um grundlegende Performance bilden. Wie gräbt steigt mit der Praxis 17, Baselining hilft auch die Mäuse zu stabileren asymp erreichenTotic Leistung, die Behandlungseffekte zeigt besser. </li><li> Testen Für die Prüfung werden nach Behandlungen verabreicht den Mäusen sind die grabenden Test genau das gleiche wie in der Baseline Phase. Wenn der Graben Tests ist es, chronisch eingesetzt werden, empfiehlt es sich, mindestens 48 h trennen die Tests zu einem Rückgang der Leistung durch übermäßige Belastung durch das Verfahren zu verhindern. </li><li> Note Ersetzen nicht die eingegraben Essen auf dem Käfigboden in die Höhle. Auch wenn die Maus hat noch nichts eingegraben, führen Sie die Wägung als würden Sie, wenn grabende stattgefunden hatte, die Störung durch Wiegen verursacht tendenziell Verhalten anzuregen und Mäusen, die bereits einige der Substrat eingegraben wird oft beginnen graben mit neuem Elan nach der Wägevorgang. </li></ol> 2. Erwartete Ergebnisse C57 ~ BL / 6 Mäusen in der Regel graben rund 70 g in den ersten zwei Stunden, und in der Nähe 200 güber Nacht. Hippocampus lädierten Mäusen oft graben weniger als 5 g 11 (Abbildung 2). Prion Krankheit hemmt grabenden 1,2, ebenso wie Lipopolysaccharid Verwaltung 20. Burrowing können Prionen (Scrapie) Krankheit bei 10-12 Wochen zu erkennen nach der Injektion von kranken Hirnhomogenat, während klinische Symptome nur bei 22 Wochen 13 erscheinen. (Abbildung 3). Burrowing hat sich gezeigt, dass empfindlich auf Unterschiede 15 und Knock-out von Kalium-Ionen-Kanal-Untereinheiten 10 Stamm. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig2.jpg" alt="Abbildung 2" /> Abbildung 2. Gewicht von Lebensmitteln Pellets (Mediane und Interquartilbereichs) in zwei Stunden mit dem Steuer-und Hippocampus-behandelten Mäusen gegraben. Letzterer wühlte deutlich weniger als die Kontrollen (P = 0,0001). <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig3.jpg" alt="Abbildung 3" /> Abbildung 3. GewichtFutterpellets (Mittel) über Nacht durch Kontroll-und Scrapie-infizierten Mäusen gegraben. Burrowing erhöht (mit Praxis) in beiden Gruppen ab Woche 7 bis 10 nach der Injektion, sondern von Woche 12 grabenden Rückgänge in den Scrapie-Gruppe und der Unterschied zwischen den Gruppen wird statistisch signifikant (mehr als zwei Standardabweichungen vom Mittelwert). 3. Diskussion Wir haben getestet, graben in anderen Arten von Nagetieren - Ratten, Rennmäuse, Hamster und ägyptischen stacheligen Mäusen 8. Alle diese aber konnte zu graben erhebliche Mengen von terrestrischen Untergründen wie Schotter oder Sand induziert werden, sondern gräbt der Futterpellets war viel weniger, selbst nachdem umfangreiche Erfahrungen mit dem irdischen Materialien. Der Grund für diesen Unterschied von Mäusen ist nicht bekannt. Nach dieser Arbeit geleistet hatte, wurde entdeckt, dass die ägyptischen stachelige Mäuse nicht in der Tat machen Höhlen in der Wildnis, sie möglicherweise zu besetzen Höhlen von Rennmäusen gemacht, auch die Oberfläche ihrer natürlichen haBitat oft hard rock. Aktuelle Beobachtungen in Nairobi hat gezeigt, dass innerhalb der Gattung Acomys, Wilson stacheligen Maus (Acomys wilsoni) und Percival die stacheligen Maus (Acomys percivali), die Höhle zu tun in der freien Natur, auch im Labor eingegraben. 4. Nisten 1. Apparat Dieser Test ist in einzelnen Käfigen durchgeführt, die gleichen wie für das Graben verwendet werden, eignen. Normale Betten sollte der Boden bis in eine Tiefe von 0,5 cm abdecken. (Variation in der Tiefe, und sehr tief Bettwäsche, konnte Nestbau beeinflussen). Jeder Käfig ist mit einem &quot;Nestlet&quot;, ein 5 cm Quadrat gedrückt Watte (Ancare) geliefert. 2. Verfahren Mäuse sind einzeln in die Verschachtelung Käfigen etwa eine Stunde vor der dunklen Phase gelegt, und die Ergebnisse bewertet werden am nächsten Morgen. Wie bei grabenden und aus ähnlichen Gründen, ist das Timing nicht kritisch. 3.Wertung Die Nester werden auf einer 5-Punkte-Skala (Abbildungen 4-8) beurteilt, und die Menge der unzerrissen Nestlet ist auch 5 gewogen. <ol><li> Die Nestlet ist weitgehend unberührt (&gt; 90% erhalten). </li><li> Die Nestlet ist teilweise bis (50-90% noch intakten) gerissen. </li><li> Die Nestlet ist meist geschreddert, aber oft gibt es keine erkennbare Nistplatz: &lt;50% der Nestlet bleibt intakt, aber &lt;90% innerhalb von ein Viertel der Käfigfläche, dh die Baumwolle ist nicht in ein Nest, sondern verteilt auf der ganzen Käfig gesammelt . Hinweis: Das Material kann manchmal in einer breit definierten Nestbereich werden, aber die kritische Definition ist, dass 50-90% wurde geschreddert. </li><li> Eine identifizierbare, aber flachen Nest:&gt; 90% der Nestlet ist zerrissen, wird das Material in ein Nest in einem Viertel der Käfigfläche gesammelt, aber das Nest ist flach, mit Wänden höher als Maus Körperhöhe (bis auf eingerollt seiner Seite) auf weniger als 50% ihres Umfanges. </li><li> Ein (fast) perfekte nest:&gt; 90% der Nestlet gerissen ist, ist das Nest eines Kraters, mit Wänden höher als Maus Körpergröße von mehr als 50% ihres Umfanges. </li></ol> Wo Kriterien nicht einverstanden Split the Difference. Zum Beispiel ein perfektes Nest mit einem unshredded 0,7 g Stück würde Score 4,5. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig4.jpg" alt="Abbildung 4" /> Abbildung 4. Nest Note 1 <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig5.jpg" alt="Abbildung 5" /> Abbildung 5. Nest Note 2 <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig6.jpg" alt="Abbildung 6" /> Abbildung 6. Nest Note 3 <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig7.jpg" alt="Abbildung 7" /> Abbildung 7. Nest Note 4 <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig8.jpg" alt="Abbildung 8" /> Abbildung 8. Nest SCORe 5 4. Erwartete Ergebnisse Sowohl Männchen und Weibchen bauen Nester, als ihr Zweck ist Thermoregulation sowie als mit der Fortpflanzung verbunden. Für C57BL / 6 Mäuse, Nest Noten für Männer und Frauen in der gleichen Größenordnung, obwohl wir nicht ein kontrollierter Vergleich in einem einzigen Experiment getan haben. Die meisten C57BL / 6 Mäusen Score 4-5 auf Nestbau, aber wenn der Hippocampus lädierten ist der Medianwert würde etwa 1-2 werden; einen Wert von 3 ist unwahrscheinlich, überschritten werden (Abbildung 9). Nesting erwies sich als empfindlich gegen Prionen-Erkrankung um 10-12 Wochen 1,2,16. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig9.jpg" alt="Abbildung 9" /> Abbildung 9. Nest Scores (Mediane und Interquartilbereichs) für Kontroll-Mäusen und Mäusen mit Läsionen der dorsalen, ventralen und vollständige Hippocampus. Nur die komplette lädierten Mäusen Hemmung der Verschachtelung zu zeigen, so dass die Auswirkungen der selektiven dorsalen und ventral Regionen erscheinen unterhalb der Schwelle, sondern additiv. 5. Bauzaun 1. Apparat Eine Reihe von &quot;Heimatmarkt&quot; sind Röhren aus Drahtgeflecht verbunden, versiegelt dauerhaft am distalen Ende, wo das Essen Pellets gelegt und vorübergehend am proximalen Ende mit einem Holzpflock. Diese wird verwendet, um die Mäuse in die Rohre vor der Anpassung an die Heimatbasis hat occurred7 verhindern. Der Apparat (Abbildung 10) kann auf verschiedene Weise hergestellt werden, solange die Grundprinzipien eingehalten werden. Ours besteht aus einer Reihe von 8 Kisten, je 30 x 13 x 15 cm mit transparenten Plexiglas-Deckel. Jeder ist mit einer Flasche Wasser versorgt und hat ein Loch in der Rückseite, in die das Horten von Rohr ist Push-ausgestattet. Rohre aus schwarzem Kunststoff, 10 cm lang, 40 mm Durchmesser hergestellt werden, verbunden mit einem Drahtgeflecht Rohr, 45 cm lang, 4 cm Durchmesser, auf einer Gesamtlänge von 50 cm bilden. Die Masche besteht aus 13 mm Quadrate,und ist eine Doppel-Rolle mit den Maschen falsch ausgerichtet, um die Löcher in die Maschen kleiner zu machen und zu verhindern, Futterpellets fallen durch. Wenn 6 mm Maschenweite ist dies ein besseres Material als eine Walze ausreichen würde. Das distale Ende des Rohres, wo das Essen Pellets platziert sind, wird geschlossen. Das proximale Ende ist mit einer abnehmbaren hölzernen Stopfen verschlossen. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig10.jpg" alt="Abbildung 10" /> Abbildung 10. Mice in den Horten Rohre 2. Verfahren <ol><li> Typischerweise wird das Horten sehr variabel zum ersten Mal und einige Mäuse können nicht horten überhaupt. Hoarding, wie Wühlen, verbessert sich mit der Praxis. Deshalb, wo experimentelle Design erlaubt sind Baselining Sitzungen Bestes gegeben, bevor eine Behandlung verabreicht wird. Natürlich ist dies nicht praktikabel, wenn die unabhängige Variable ist angeboren, wie bei einer (nicht-bedingte) mutierten Maus oder beim Testen verschiedener Mausstämme. </li><li> Eine Maus ist in gestelltjede Box am Anfang des Tages, um sie zu gewöhnen. Die Box ist mit einem Karton-Tunnel, die in der realen Gruppe Heimkäfig für mindestens eine Nacht wurde auch eine großzügige Portion verschmutzte Einstreu, damit es sich wie &quot;zu Hause&quot; zur Verfügung gestellt. Der Zugang zu den Horten Rohr wird bis zum Abend mit einem hölzernen Stöpsel verhindert. 100 g Futterpellets (eine Mischung aus kleinen und großen) ist am distalen Ende des Horten Röhrchen gegeben (durch Gießen in am anderen Ende mit dem Rohr senkrecht gehalten). Um sicherzustellen, dass die Maus leicht hungrig vor dem Testen beginnt, ist die Heimat box nicht mit Essen versorgt. </li><li> Kurz vor dem Beginn der dunklen Phase, entfernen Sie die hölzernen Zapfen, die Maus Zugang zu den Horten Rohr zu ermöglichen. Am nächsten Morgen (wieder ist das Timing nicht kritisch) zu sammeln und wiegen alle Lebensmittel Pellets, die in die Heimatbasis box wurden gehortet. </li></ol> 6. Erwartete Ergebnisse Mit weibliche C57BL / 6 Mäusen, würde der mittlere Betrag gehortet um sein50-70 g. Hippokampalen Läsionen stark unterdrücken hoarding11, während präfrontalen Kortex Läsionen nur eine schwache Wirkung 12 (Abbildung 11). <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig11.jpg" alt="Abbildung 11" /> Abbildung 11. Gewicht von Futterpellets gehortet durch Kontrolle und medialen präfrontalen Kortex-lädierten Mäusen (Mediane und Interquartilbereichs). Obwohl die Mediane deutlich unterscheiden, ist die hohe Variabilität in der Steuerung das Ergebnis ist alles andere als statistisch signifikant (P = 0,3).

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Keine Interessenskonflikte erklärt.

<html> Diese Tests sind sehr einfach zu laufen, aber der Effekt Größen sind sehr groß, so dass sie extrem empfindlich auf Behandlungen, unterschiedliche Stämme, etc. Sie entsprechen den &quot;Refinement&quot; Aspekt von Russell und Burch die 3 Rs &quot;18. In der Tat scheint eine gute Leistung bei Tests wie Wühlen, um ein Anzeichen für gute allgemeine Gesundheit bei Tieren. Deshalb könnte dies ein guter Test für die Beurteilung des Tierschutzes werden. Die Bedeutung der ökologischen Bereicherung für Labornagern ist allgemein anerkannt, in diesen Tagen. Bereitstellung von Nistmaterial ist jetzt gängige Praxis in vielen Ställen, und das ist einfach zu tun. Die Begeisterung, mit der Mäuse wühlen macht grabenden eine potenziell gute Bereicherung, aber leider ein &quot;self-Nachladen&quot; graben, die eine praktische Art und Weise der Bereitstellung dieser noch nicht entwickelt worden wäre. Ob Mäuse finden Horten bereichert wurde noch nicht bestimmt. _content &quot;&gt; Ein Nachteil ist, dass die Daten von diesen Tests generiert in der Regel nicht-parametrische (nicht Gauß in Verteilung), so entsprechende nicht-parametrische Statistiken benötigt, um sie zu analysieren, zB die Mann-Whitney-U-Test für paarweise Vergleiche, Kruskal- Wallis ANOVA für Multi-Gruppe Daten. Wenn wiederholte Messungen Designs verwendet werden, da es keine geeigneten ANOVA-Test für nicht-parametrische Daten, können die Ergebnisse umgewandelt werden, zB durch Quadratwurzel oder log Verfahren, um sie zu einer normalen Verteilung entsprechen . Die Messungen des Geräts kann zu geringfügigen Abweichungen zwischen den im Text angegebenen (nützlich für USA Experimentatoren), aber große Unterschiede sollten vermieden werden. Doch in einigen Fällen andere Experimentatoren können Sie verschiedene Konstruktionen besser funktionieren als die hier beschriebene. Wie bei allen Verhaltens-Messungen sollten die Mäuse getestet, um zu sehen, wenn ihre Tätigkeit normal sind, wie Inaktivität wird offensichtlich eine detrimental Wirkung auf artspezifische Verhaltensweisen. Wenn Scrapie-infizierten Mäuse zeigten beeinträchtigt graben und nisten, waren ihre Aktivität normal (getestet auf einem offenen Feld Gerät). Tatsächlich kommt es zu einem Zeitraum von Hyperaktivität etwa 2-4 Wochen nach diesen arttypischen Verhaltensweisen werden zunächst 2 beeinträchtigt. Die starke Beeinträchtigung durch Hippocampus Läsionen am Graben hergestellt, Nist-und Horten, von denen alle arttypischen Verhaltensweisen sind, ergänzt die Beeinträchtigungen im räumlichen Lernen und Speicher9 die solche etablierten Auswirkungen dieser Veränderungen sind. Sie erscheinen als gleichwertig zu den Beeinträchtigungen in den Aktivitäten des täglichen Lebens so charakteristisch für AD 14. Diese Spezies-typischen Tests könnte sich als sehr nützlich in der präklinischen Screening für Behandlungen für Alzheimer und andere neurodegenerative Erkrankungen 14 sein. In vieler menschlicher Gehirnerkrankungen einem Verlust oder verminderte Fähigkeit, die normalen everyday Aufgaben ist ebenso wichtig wie andere Merkmale der Krankheit, wie kognitive Beeinträchtigung. Insbesondere kann dieser Verlust erfordern Beteiligung der Betreuer und die große sozioökonomische Belastung dieser so oft verhängt.

assessing burrowing, nest construction, and hoarding in mice

Verschlechterung der Fähigkeit, &quot;Aktivitäten des täglichen Lebens&quot; (ADL) durchzuführen ist ein frühes Anzeichen der Alzheimer-Krankheit (AD). Präklinische Verhaltens-Screening von möglichen Behandlungen für AD derzeit weitgehend konzentriert sich auf die kognitiven Tests, die häufig verlangt teure Ausrüstung und viel Experimentator Zeit. Allerdings ist die menschliche episodische Gedächtnis (der am stärksten betroffenen Aspekt des Gedächtnisses in AD) unterscheidet sich von Nagetier-Speicher, der sich als weitgehend nicht-episodische scheint. Daher ist die vorliegende Art von Screening für neue AD-Behandlungen für AD bei Nagetieren sind untrennbar kaum Erfolg haben. Ein neuer Ansatz zur präklinischen Screening wäre, die ADL von Mäusen zu charakterisieren. Zufällig haben mehrere solcher Tests vor kurzem in Oxford entwickelt worden, und hier die drei empfindlichsten und gut charakterisierte vorgestellt. Burrowing wurde zum ersten Mal in Oxford 13 entwickelt. Es entwickelte sich aus einer Notwendigkeit, einer Maus Horten Paradigma zu entwickeln. Die meisten veröffentlichened Nagetier Horten Paradigmen notwendig eine entfernte Nahrungsquelle, um in den Käfig durch einen Verbindungsgang verbunden werden. Dies würde bedeuten, Änderung der Heimkäfig sowie Herstellung einer Maus-proof Verbindungsgang und Nahrungsquelle. So war es zu prüfen, ob es möglich wäre, die Nahrungsquelle in den Käfig gesetzt. Es wurde festgestellt, dass, wenn ein Container auf dem Boden platziert war es am nächsten Morgen geleert wurde., Das Essen Pellets, aber einfach deponiert in einem Haufen auf dem Behälter Eingang, anstatt in einen diskreten Ort, entfernt von dem Container, wie zu erwarten, wenn die Mäuse waren wirklich horten sie. Eine genaue Untersuchung zeigte, dass die Mäuse durchführen zu graben (&quot;Graben&quot;) Bewegungen, die nicht den Pellets in den Mund zu einem ausgewählten Ort, als wären Sie wirklich horten sie. 6 Lebensmittel Pellets sind kein wesentliches Substrat zum Wühlen, Mäuse leeren Tuben mit Sand, Kies gefüllt, auch verschmutzte Einstreu aus ihren eigenen Käfig. Mehrüber, werden sie leer ein volles Rohr, auch wenn eine leere daneben 8 ist gesetzt. Mehrere Schachteln Protokolle existieren in der Literatur. Die vorliegende Oxford ein vereinfacht das Verfahren und hat einen gut definierten Punktesystem für die Nest-Qualität 5. Ein Horten von Paradigma wurde später entwickelt, in denen die Mäuse, anstatt Horten zurück in die wahre Heimat Käfig, in der &quot;Homebase&quot; einer Horten Apparat lebten angepasst. Diese Heimatbasis war ein Rohr aus Drahtgitter, das distale Ende die Nahrungsquelle enthaltenen verbunden. Diese Anordnung erwies sich als gute Horten Verhalten, solange die Mäuse in der &quot;Homebase&quot; lebten im Laufe des Tages angepasst und darf nur das Horten Rohr in der Nacht geben ergeben.

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Assessing Burrowing, Nest Construction, and Hoarding in Mice

Burrowing, Nist-und Horten sind Spezies-typischen Aktivitäten, dass Mäuse ohne weiteres im Labor durchzuführen. Dieser Artikel beschreibt, wie sie einfach und kostengünstig beurteilt werden kann. Diese Protokolle sind sehr empfindlich gegen Maus-Stamm, Hirnläsionen und Krankheiten. Darüber hinaus bilden sie &quot;Environmental Enrichment&quot; für die Mäuse und verkörpern die &quot;Refinement&quot; Aspekt der &quot;3 R&quot; 18.

Die Beurteilung Burrowing, Nest Bau und Horten in Mäuse

Deterioration in the ability to perform "Activities of daily living" (ADL) is an early sign of Alzheimer's disease (AD). Preclinical behavioural screening ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

31.9K Aufrufe.  University of Oxford. Burrowing, Nist-und Horten sind Spezies-typischen Aktivitäten, dass Mäuse ohne weiteres im Labor durchzuführen. Dieser Artikel beschreibt, wie sie einfach und kostengünstig beurteilt werden kann. Diese Protokolle sind sehr empfindlich gegen Maus-Stamm, Hirnläsionen und Krankheiten. Darüber hinaus bilden sie "Environmental Enrichment" für die Mäuse und verkörpern die "Refinement" Aspekt der "3 R" 18.

Serie: Assessing Burrowing, Nest Construction, and Hoarding in Mice

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a significant public health concern, particularly in children. Both of these conditions are highlighted by the repeated expression of meaningless behaviors. Individuals with OCD often show checking, frequent hand washing, and counting. Children with ASDs also engage in repetitive tapping, arm or hand flapping, and rocking. These behaviors can vary widely in intensity and frequency of expression. More intense forms of repetitive behaviors can even result in injury (e.g.&#160;excessive grooming, hand washing, and self-stimulation). These behaviors are therefore very disruptive and make normal social discourse difficult. Treatment options for repetitive behaviors in OCD and ASDs are somewhat limited and there is great interest in developing more effective therapies for each condition. Numerous animal models for evaluating compulsive-like behaviors have been developed over the past three decades. Perhaps the animal models with the greatest validity and ease of use are the marble burying test and the nestlet shredding test. Both tests take advantage of the fact that the target behaviors occur spontaneously in mice. In the marble burying test, 20 marbles are arrayed on the surface of clean bedding. The number of marbles buried in a 30 min session is scored by investigators blind to the treatment or status of the subjects. In the nestlet shredding test, a nestlet comprised of pulped cotton fiber is preweighed and placed on top of cage bedding and the amount of the nestlet remaining intact after a 30 min test session is determined. Presently, we describe protocols for and show movie documentation of marble burying and nestlet shredding. Both tests are easily and accurately scored and each is sensitive to small changes in the expression of compulsive-like behaviors that result from genetic manipulations, disease, or head injury.

Disease, head injury, genetic modifications, and treatment of mice with drugs can have profound effects on behavior. Utilizing well-characterized and validated approaches such as marble burying and nestlet shredding, compulsive-like behaviors can be documented accurately in mice as models of human obsessive-compulsive disorder and autism spectrum disorder.

Obsessive-compulsive disorder (OCD) and autism spectrum disorders (ASD) are serious and debilitating psychiatric conditions and each constitutes a ...

Forschung

Verhalten

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

The minimization and alleviation of suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this negative experience one must be able to identify when an animal is actually in distress. Pain, illness, or distress cannot be managed if unrecognized. Evaluation of pain or illness typically involves the measurement of physiologic and behavioral indicators which are either invasive or not suitable for large scale assessment. The observation of nesting behavior shows promise as the basis of a species appropriate cage-side assessment tool for recognizing distress in mice. Here we demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an ethologically relevant indicator of welfare. The methods presented can be successfully used to identify thermal stressors, aggressive cages, sickness, and pain. Observation of nest building behavior in mouse colonies provides a refinement to health and well-being assessment on a day to day basis.

We demonstrate the utility of nest building behavior in laboratory mice as an indicator of welfare. Nest scoring is a sensitive technique that is altered by temperature, illness, and aggression. The time to integrate into nest test (TINT) is a simple cage-side assessment that can detect postoperative pain.

The minimization and alleviation of  suffering has moral and scientific implications. In order to mitigate this  negative experience one must be able to ...

Assessment of Social Interaction Behaviors

Social interactions are a fundamental and adaptive component of the biology of numerous species. Social recognition is critical for the structure and stability of the networks and relationships that define societies. For animals, such as mice, recognition of conspecifics may be important for maintaining social hierarchy and for mate choice 1.
A variety of neuropsychiatric disorders are characterized by disruptions in social behavior and social recognition, including depression, autism spectrum disorders, bipolar disorders, obsessive-compulsive disorders, and schizophrenia. Studies of humans as well as animal models (e.g., Drosophila melanogaster, Caenorhabditis elegans, Mus musculus, Rattus norvegicus) have identified genes involved in the regulation of social behavior 2. To assess sociability in animal models, several behavioral tests have been developed (reviewed in 3). Integrative research using animal models and appropriate tests for social behavior may lead to the development of improved treatments for social psychopathologies.
The three-chamber paradigm test known as Crawley's sociability and preference for social novelty protocol has been successfully employed to study social affiliation and social memory in several inbred and mutant mouse lines (e.g. 4-7). The main principle of this test is based on the free choice by a subject mouse to spend time in any of three box's compartments during two experimental sessions, including indirect contact with one or two mice with which it is unfamiliar. To quantitate social tendencies of the experimental mouse, the main tasks are to measure a) the time spent with a novel conspecific and b) preference for a novel vs. a familiar conspecific. Thus, the experimental design of this test allows evaluation of two critical but distinguishable aspects of social behavior, such as social affiliation/motivation, as well as social memory and novelty. "Sociability" in this case is defined as propensity to spend time with another mouse, as compared to time spent alone in an identical but empty chamber 7. "Preference for social novelty" is defined as propensity to spend time with a previously unencountered mouse rather than with a familiar mouse 7. This test provides robust results, which then must be carefully analyzed, interpreted and supported/confirmed by alternative sociability tests. In addition to specific applications, Crawley's sociability test can be included as an important component of general behavioral screen of mutant mice.

Here we describe a detailed protocol for examination of sociability in mice by using Crawley's sociability and preference for social novelty test. We describe the advantages and possible applications for this procedure, including critical details important for correct interpretation of the results.

Bewertung der sozialen Interaktion Behaviors

Social interactions are a fundamental and adaptive component of the biology of numerous species. Social recognition is critical for the structure and ...

Neurowissenschaften

A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often stereotyped actions elicited in response to innately aversive sensory stimuli, but their success requires enough flexibility for adapting to different spatial environments, which can change rapidly. Here, we describe a behavioral assay to evaluate the influence of learned spatial knowledge on defensive behaviors in mice. We have adapted the widely used Barnes maze spatial memory assay to investigate how mice navigate to a shelter during escape responses to innately aversive sensory stimuli in a novel environment, and how they adapt to acute changes in the environment. This new assay is an ethological paradigm that does not require training and exploits the natural exploration patterns and navigation strategies in mice. We propose that the set of protocols described here are a powerful means of studying goal-directed behaviors and stimulus-triggered navigation, which should be of interest to both the fields of instinctive behaviors and spatial memory.

This protocol describes a behavioral assay, based on the Barnes maze test, to study how instinctive defensive actions are modified by the knowledge of spatial environment.

Ein Verhaltens-Assay für die Untersuchung der Rolle des räumlichen Gedächtnisses während der instinktiven Verteidigung bei Mäusen

Evolution has selected a repertoire of defensive behaviors that are essential for survival across all animal species. These behaviors are often ...

Systematic Assessment of Well-Being in Mice for Procedures Using General Anesthesia

In keeping with the 3R Principle (Replacement, Reduction, Refinement) developed by Russel and Burch, scientific research should use alternatives to animal experimentation whenever possible. When there is no alternative to animal experimentation, the total number of laboratory animals used should be the minimum needed to obtain valuable data. Moreover, appropriate refinement measures should be applied to minimize pain, suffering, and distress accompanying the experimental procedure. The categories used to classify the degree of pain, suffering, and distress are non-recovery, mild, moderate, or severe (EU Directive 2010/63). To determine which categories apply in individual cases, it is crucial to use scientifically sound tools.
The well-being-assessment protocol presented here is designed for procedures during which general anesthesia is used. The protocol focuses on home cage activity, the Mouse Grimace Scale, and luxury behaviors such as burrowing and nest building behavior as indicators of well-being. It also uses the free exploratory paradigm for trait anxiety-related behavior. Fecal corticosterone metabolites as indicators of acute stress are measured over the 24-h post-anesthetic period.
The protocol provides scientifically solid information on the well-being of mice following general anesthesia. Due to its simplicity, the protocol can easily be adapted and integrated in a planned study. Although it does not provide a scale to classify distress in categories according to the EU Directive 2010/63, it can help researchers estimate the degree of severity of a procedure using scientifically sound data. It provides a way to improve the assessment of well-being in a scientific, animal-centered manner.

We developed a protocol to assess well-being in mice during procedures using general anesthesia. A series of behavioral parameters indicating levels of well-being as well as glucocorticoid metabolites were analyzed. The protocol can serve as a general aid to estimate the degree of severity in a scientific, animal-centered manner.

Systematische Bewertung des Wohlbefindens bei Mäusen für Verfahren mit Vollnarkose

In keeping with the 3R Principle (Replacement, Reduction, Refinement) developed by Russel and Burch, scientific research should use alternatives to animal ...

Analyzing Spatial Learning and Prosocial Behavior in Mice Using the Barnes Maze and Damsel-in-Distress Paradigms

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. The Barnes maze can also assess other mouse behaviors, such as general motivation to escape from the maze platform and exploratory behavior. The Barnes maze can measure whether a genetic mutation or environmental variable can impact the acquisition and retention of spatial memories, as well as provide information about the search strategy employed by the mice. Here we use the Barnes maze to detect a memory deficit in adult mice following a single developmental ethanol exposure event. The newly described Damsel-in-Distress paradigm exposes a male mouse to a female mouse trapped in a chamber in the open center field of the arena. It provides an opportunity for the mouse to socially respond to the trapped female and exhibit prosocial behavior. The Damsel-in-Distress paradigm can also be used to examine mouse behavior in a novel arena and measure locomotor activity. Both the Barnes Maze and the Damsel-in-Distress protocols require minimal financial investment and most aspects of the tests can be constructed from common lab supplies. These flexible and accessible tools can also be used to detect behavioral changes over the course of development.

This protocol measures spatial learning and memory using the Barnes maze. A novel Damsel-in-Distress paradigm is used to assess locomotor activity and prosocial behavior in mice.

Analyse der räumlichen Lernens und prosoziales Verhalten bei Mäusen mit dem Barnes Labyrinth und Damsel in Distress Paradigmen

The Barnes maze is a reliable measure of spatial learning and memory that does not require food restriction or exposure to extremely stressful stimuli. ...

Nest Building Behavior as an Early Indicator of Behavioral Deficits in Mice

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents synthetic and/or natural materials (such as twine, tissue, cotton, paper, and hay) as a gauge of their overall well-being and as an ancillary assessment to predict the possible decline in cognition. Typically, changes in nesting behaviors, such as failure to create a nest, indicate a change in health or welfare. In addition, nesting behavior is sensitive to many environmental and physiological challenges, as well as many genetic mutations underlying pathological disease states. The following protocol describes a nesting behavior paradigm that explores the usage of four types of nesting material. In addition, the protocol utilizes intraclass correlations to demonstrate that inter-rater reliability is higher when nests are constructed out of shredded paper compared to other common nesting materials such as cotton squares, paper twists, and soft cob bedding. The chosen methodology and statistical considerations (i.e., intraclass correlation) for this assay may be of interest for those conducting experiments assessing the quality of living of mice.&#160;

Here, we present a protocol to quantify nest building behavior in mice, which is known to be impaired in several neurological disorders and diseases. This protocol examines the utility of four materials and offers the opportunity to quantify the rater agreement in scoring, improving the validity and reliability of the assay.

Nest building Behavior als Frühindikator für Verhaltensdefizite bei Mäusen

Nest building is an innate behavior in male and female rodents, even when raised in laboratory settings. As such, many researchers provide rodents ...

Assessment of Mouse Judgment Bias through an Olfactory Digging Task

Judgment biases (JB) are differences in the way that individuals in positive and negative affective/emotional states interpret ambiguous information. This phenomenon has long been observed in humans, with individuals in positive states responding to ambiguity 'optimistically' and those in negative states instead showing 'pessimism'. Researchers aiming to assess animal affect have taken advantage of these differential responses, developing tasks to assess judgment bias as an indicator of affective state. These tasks are becoming increasingly popular across diverse species and fields of research. However, for laboratory mice, the most widely used vertebrates in research and a species heavily relied upon to model affective disorders, only one JB task has been successfully validated as sensitive to changes in affective state. Here, we provide a detailed description of this novel murine JB task, and evidence of its sensitivity to mouse affect. Though refinements are still necessary, assessment of mouse JB opens the door for answering both practical questions regarding mouse welfare, and fundamental questions about the impact of affective state in translational research.

This article provides a detailed description of a novel mouse judgment bias protocol. Evidence of this olfactory digging task's sensitivity to affective state is also demonstrated and its utility across diverse research fields is discussed.

Bewertung der Mausurteilsverzerrung durch eine olfaktorische Grabaufgabe

Judgment biases (JB) are differences in the way that individuals in positive and negative affective/emotional states interpret ambiguous information. This ...

<meta charset="utf8"></head><body>Verhaltensassays für Autismus-Spektrum-Störungen in Mausmodellen

Strategies for Assessing Autistic-Like Behaviors in Mice

Autism spectrum disorder (ASD) is a neurobiologically complex condition with a heterogeneous genetic etiology. Clinically, ASD is diagnosed by social communication impairments and restrictive or repetitive behaviors, such as hand flapping or lining up objects. These behavioral patterns can be reliably observed in mouse models with ASD-linked genetic mutations, making them highly useful tools for studying the underlying cellular and molecular mechanisms in ASD. Understanding how genetic changes affect the neurobiology and behaviors observed in ASD will facilitate the development of novel targeted therapeutic compounds to ameliorate core behavioral impairments. Our lab has employed several protocols encompassing well-described training and testing procedures that reflect a wide range of behavioral deficits related to ASD. Here, we detail two assays to study the core features of ASD in mouse models: self-grooming (a measure of repetitive behavior) and the three-chamber social interaction test (a measure of social interaction approach and preference for social novelty).

<meta charset="utf8"></head><body>Strategien zur Beurteilung autistischer Verhaltensweisen bei Mäusen

Rodent models are valuable tools for studying core behaviors related to autism spectrum disorder (ASD). In this article, we expound on two behavioral tests for modeling the core features of ASD in mice: self-grooming, which assesses repetitive behavior, and the three-chamber social interaction test, which documents social impairments.

Strategien zur Beurteilung autistischer Verhaltensweisen bei Mäusen

Autism spectrum disorder (ASD) is a neurobiologically complex condition with a heterogeneous genetic etiology. Clinically, ASD is diagnosed by social ...

Die Beurteilung Burrowing, Nest Bau und Horten in Mäuse

Zusammenfassung

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Kapitel in diesem Video

Marble Burying and Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Compulsive-like Behaviors in Mice

Nest Building as an Indicator of Health and Welfare in Laboratory Mice

Bewertung der sozialen Interaktion Behaviors

Ein Verhaltens-Assay für die Untersuchung der Rolle des räumlichen Gedächtnisses während der instinktiven Verteidigung bei Mäusen

Systematische Bewertung des Wohlbefindens bei Mäusen für Verfahren mit Vollnarkose

Analyse der räumlichen Lernens und prosoziales Verhalten bei Mäusen mit dem Barnes Labyrinth und Damsel in Distress Paradigmen

Nest building Behavior als Frühindikator für Verhaltensdefizite bei Mäusen

Bewertung der Mausurteilsverzerrung durch eine olfaktorische Grabaufgabe

Strategien zur Beurteilung autistischer Verhaltensweisen bei Mäusen

Strategien zur Beurteilung autistischer Verhaltensweisen bei Mäusen