Oxford Üniversitesi Açık Erişim finansman sağlamak için Wellcome Trust. Robert Deacon, Wellcome Trust hibe WT084655MA tarafından finanse edilen Oxford OXION grubunun bir üyesidir.

1. Sığıntı 1. Cihaz Çeşitli konteyner tasarımları yargılandı (örneğin kolaylıkla temizlenebilir bir metal sürahi, ancak fare girmek için istekli değildi). Sonunda plastik downpipe uzunluğu (evleri oluklar bağlı) gıda pelet yanlışlıkla deplasman (kasti) önlemek için bir ucunu hafifçe yükselmiş olduğunu keşfetti ve diğer ucunda imzalandı cihazlarının verimli bir parçası oldu. Burrows artık plastik downpipe, 68 mm çap, 20 cm uzun (Şekil 1) oyulmuş yapılır. Bir ucu 12 mm ve orta yoğunlukta lif levha (MDF), bir fiş ile kapatılır. (Mdf ile çalışırken Solunum koruması tavsiye edilir). , Amaç ve su yalıtımı temizlik için su geçirmez bir yapıştırıcı mastik bileşik burrowing tüp içine tutkal bu hizmet olarak mdf, iç ve dış yüzeylerde de uygulanabilir. Makine vidaları (5 cm uzunluğunda) diğer ucunu o yükseltmek için kullanılır.f yerden tüp 3 cm. Takılı 90 ° ve vidaları bir açıyla burrowing tüpün açık ucundan 1 cm iki delik delinir ve 4 sıkılır. Burrows çapı muhtemelen kritik öneme sahiptir; Schmid-Holmes ve ark 19 yabani farelerin özellikle boyutu yapay olanlara benzer Burrows &quot;burrow temizlenir&quot; olduğu görülmektedir. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1 bir burrowing tüp içinde bir fare. 2. Prosedür <ol><li> Alışma Sığıntı normal spontan, ancak belirli bir öğrenme öğesi vardır. Öğrenme sürecinin sosyal kolaylaştırma tarafından geliştirilmiştir. Bu nedenle bir tedavi ile test daha sonra farelerin grup ev kafes içine bir gecede tam burrow yerleştirin. Her burrow 200 gr normal diyet olarak verilen gıda pelet ile doludur. (Bu tdiyet yoğun sıkıştırılmış tipi; bir &quot;genişletilmiş&quot; diyet burrow kullanmak ise) daha az 200g yapacak. Burrowing substrat seçerken deneyciler dikkate gibi faktörleri dikkate almalıdır. Farelerin yiyecek karnesi (örneğin, eşzamanlı bir labirent öğrenme görevi çalıştırmak için onları motive etmek) ise gıda-dışı maddeler kapalı bitki saksılar toprağın yüzey hattı için kullanılır, örneğin, kil toplar, kullanılan olabilir; bezelye shingle (küçük taşlar ~ 1 cm çapında) ve kum. Farelerin bir &quot;tavan etkisi&quot; önlemek için, çok şiddetle burrowing eğer gıda pelet göre üç kat daha ağır Bezelye çakıl ve kum, gıda pelet için yararlı yerine. </li><li> Baselining Run (tercihen iki) önerilen tedaviden sonra test etmek için yapılacaktır aynı şekilde ayrı testler 48 saat burrowing taban çizgisi. 0700-1900 saat karanlık ışık döngüsü farelerin yerleştirilmiştir test optimal 16:00 civarında başladı. Bu hassas bir zaman.şu anda normal uyanık ve burrowing daha yavaş ve dolayısıyla karanlık aşamasına iyi olsaydı daha çok aktif başlar, test etmek için. Başladıktan sonra iki saat, bir &quot;anlık&quot; ölçme sızdılar gıda kilo alınır; burrow tared bir kap içine boşaltılır ve tartılır ve pelet kafes içine geri koymak burrow değiştirilmelidir. Burrow fare ise, sadece tartım kabı içine yavaşça ve içeriğini dökün ve fare kafes değiştirin. Sonra iki saat sızdılar ağırlık orijinal 200 g. çıkarma tarafından hesaplanır. Ertesi sabah son okuma alınır. Zamanlama farelerin uyku geri dönmüş olacaktır (genellikle burrow) ve artık aktif burrowing gibi önemli değildir. Ikinci deneme başlangıç ​​performans için dengeli bir grup oluşturmak için alınan 2 saat ölçüm kullanın. Uygulama 17 ile artar burrowing olarak, baselining farelerin daha istikrarlı asymp ulaşmak için yardımcı olurtedavi etkilerinin daha iyi ortaya koymaktadır totic performans. </li><li> Test Test edilmesi için, uygulanan tedavilerden sonra farelerin burrowing test baselining aşamada tam olarak aynı verilmiştir. Burrowing testi kronik kullanılmak üzere ise, en az 48 saat ayrı testler prosedürü aşırı maruz kalma nedeniyle performansında bir düşüş önlemek için tavsiye edilir. </li><li> Not Burrow içine kafes katta sızdılar gıda yerine yapmayın. Fare şey sızdılar olsa bile burrowing meydana gelmiş olsaydı, tartım işlemi gerçekleştirmek; ağırlığında neden rahatsızlık davranışları teşvik etmek ve zaten bazı yüzey sızdılar farelerde, sonra sık sık yenilenen gayretle burrowing başlayacak eğilimindedir süreci ağırlığında. </li></ol> 2. Beklenen sonuçlar C57 ~ BL / 6 fareler burrow, genellikle ilk iki saat içinde yaklaşık 70 gr ve 200 gr yakıngeceleme. Hipokampal Lezyonlu fareler genellikle burrow az 5 gr 11 (Şekil 2). Prion hastalığı 1,2 burrowing inhibe lipopolisakkarid yönetiminin 20. Klinik belirtileri ise sadece 22 hafta 13 Sığıntı, hastalıklı beyin Homojenat enjeksiyondan sonra 10-12 hafta prion (scrapie) hastalığı saptayabilir. (Şekil 3). Sığıntı farklılıkları potasyum iyon kanalı alt birimden 10 15 ve knock-out suşu duyarlı olduğu gösterilmiştir. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig2.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2, gıda kontrolü ve hipokampal Lezyonlu fareler tarafından iki saat içinde sızdılar pelet (medyan ve interquartil aralıkları) ağırlığı . Sonuncusu (p = 0.0001) kontrollere göre anlamlı derecede daha az sızdılar. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3. Ağırlıkgıda kontrolü ve scrapie ile enfekte farelerde gecede sızdılar pelet (anlamına gelir). Haftanın 7 ila 10 enjeksiyon sonrası her iki grupta da (uygulama) artar Sığıntı, ancak hafta 12 burrowing scrapie grubundaki düşüşler ve gruplar arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı hale gelir (ortalamanın iki standart hataları aşan). 3. Tartışma Sıçan, Gerbils, hamster ve Mısır dikenli fareler 8 - Biz kemirgenler diğer türler burrowing test ettik. Tüm ama ikincisi, çakıl veya kum gibi karasal yüzeyler burrow önemli miktarda uyarılan, ancak gıda pelet burrowing olabilir karasal malzemeler ile geniş bir deneyime sonra bile, daha az oldu. Farelerden elde edilen bu farkın nedeni bilinmemektedir. Bu çalışmanın yapıldığını sonra, aslında Mısır dikenli bir farelerin vahşi Burrows yapamaz olduğunu keşfetti; Burrows doğal ha yüzey Gerbils tarafından yapılan işgalbitat genellikle hard rock. Nairobi son gözlem cinsi Acomys içinde, vahşi yuva Wilson dikenli bir fare (Acomys wilsoni) ve Percival dikenli bir fare (Acomys percivali), laboratuvarda da sızdılar, gösterdi. 4. Yuvalama 1. Cihaz Bu test bireysel kafeslerde yapılır; burrowing için kullanıldığı gibi aynı olanlar uygundur. Normal yataklar 0.5 cm derinlikte zemin kapsamalıdır. (Varyasyon, derinlemesine ve çok derin yataklar, yuva inşaatı etkileyebilecek). Her kafes &quot;Nestlet&quot;, preslenmiş pamuk vuruş (Ancare) 5 cm kare ile verilir. 2. Prosedür Fareler karanlık evre önce yaklaşık bir saat yuvalama kafesler içine tek tek yerleştirilir ve ertesi sabah değerlendirilir. Burrowing ile ve benzeri nedenlerle, zamanlama kritik değildir. 3.Puanlama Yuvaları 5 puanlık bir ölçek (Şekil 4-8) değerlendirilir ve untorn Nestlet miktarı da 5 tartılır. <ol><li> Nestlet (&gt;% 90 sağlam) büyük ölçüde el değmemiş. </li><li> Nestlet kısmen (% 50-90 bozulmadan kalan) yırttılar. </li><li> Nestlet çoğunlukla parçalanmış ama genellikle hiçbir tanımlanabilir yuva sitesi var: &lt;Nestlet% 50 pamuk kafesinin etrafında bir yuva ama yayılması halinde bir araya getirilmiş değildir yani, ama &lt;% 90, kafes taban alanı çeyrek içinde bozulmadan kalır . Not: Bazen malzeme, geniş tanımlı bir yuva alan olabilir ama kritik bir tanım% 50-90 parçalanmış olmasıdır. </li><li> Tanımlanabilir, ama düz bir yuva:&gt;% 90 Nestlet yırtılmış, malzemenin kafes taban alanı dörtte içinde bir yuva içine toplanmış, ancak yuva ile, düz fare gövde yüksekliği daha yüksek duvarlar (yukarı kıvrılmış çevresi% 50 daha az yan). </li><li> (Yakın) mükemmel bir nest: Nestlet% 90 paramparça&gt;, çevresi% 50 daha fazla fare vücut yüksekliğinden daha yüksek duvarları ile iç içe, bir krater. </li></ol> Nerede kriterler fark bölmek aynı fikirde değilim. Örneğin unshredded 0.7g bir parça ile mükemmel bir yuva 4.5 puan olacak. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig4.jpg" alt="Şekil 4" /> Şekil 4. Nest 1 puan <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig5.jpg" alt="Şekil 5" /> Şekil 5.. Nest skoru 2 <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig6.jpg" alt="Şekil 6" /> Şekil 6.. Nest skoru 3 <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig7.jpg" alt="Şekil 7" /> Şekil 7 Nest puan 4 <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig8.jpg" alt="Şekil 8" /> Şekil 8 Nest puanlıE 5 4. Beklenen sonuçlar Onların amacı termoregülasyon yanı sıra üreme ile ilişkili olarak kadın ve erkeklerde, yuva yapmak. C57BL / 6 fareler için, biz tek bir deneyde kontrollü bir karşılaştırma yapmadı olmasına rağmen erkekler ve kadınlar için yuva puanları, aynı aralıkta. En C57BL / 6 fareler yuva inşaat 4-5 puan, ancak hipokampus Lezyonlu olduğunda ortanca skoru 1-2 civarında olacağını; 3 puan olası değildir (Şekil 9) aşılmamalıdır. Yuvalama ayrıca yaklaşık 10-12 hafta 1,2,16 prion hastalığı duyarlı olduğunu kanıtladı. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig9.jpg" alt="Şekil 9" /> Şekil 9 kontrol fareler ve dorsal, ventral ve tam hipokampus lezyonu olan fareler Nest puanları (medyan ve interquartil aralıkları). Sadece tam Lezyonlu farelerin iç içe inhibisyonu, bu nedenle selektif dorsal ve ventr etkilerial bölgelerin alt eşik ama katkı görünür. 5. Istifleme 1. Cihaz &quot;Bir dizi&quot; ev üsleri, tel örgü yapılmış tüplere bağlı, gıda pelet yerleştirilen distal ucunda ve geçici olarak ahşap bir fişi proksimal sonunda kalıcı kapatılmış. Bu ana üs uyum occurred7 önce tüpler giren fareler önlemek için kullanılır. (Şekil 10) Cihaz temel ilkelerine uyulduğu sürece, çeşitli yollarla yapılabilir. Bizimki 8 ahşap kutular bir satır oluşuyor, her biri 30 x 13 x 15 cm şeffaf pleksiglas kapaklı. Her bir su şişesi ile birlikte, istifleme tüp push-donatılmış içine arkasında bir delik vardır. Tüpler, 10 cm uzunluğunda siyah plastik, 40 mm çapında, 50 cm, toplam uzunluğu oluşturmak için, 45 cm uzunluğunda bir tel örgü tüp, 4 cm çapında katıldı. Örgü, 13 mm kareler oluşur.ve küçük kafes delikleri ve gıda pelet yoluyla bırakarak önlemek için yanlış sıralanmış kafes ile bir çift rulo. 6 mm kare örgü varsa bu bir rulo yeterli olacağı gibi daha iyi bir malzemedir. Gıda pelet yerleştirilen tüp, distal ucu kapatılmış. Proksimal ucu çıkarılabilir bir ahşap fişi ile mühürlenir. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig10.jpg" alt="Şekil 10" /> Istifleme tüpler Şekil 10 Fare. 2. Prosedür <ol><li> Tipik olarak, ilk kez istifleme çok değişken ve bazı farelerin tüm istif olmayabilir. İstifçiliğine burrowing gibi, uygulama ile geliştirir. Bu nedenle bir tedavi uygulanmadan önce, deneysel tasarım sağlar, baselining oturumları en iyi şekilde verilmektedir. Açıkçası, bu bağımsız değişken doğuştan ise, farklı fare suşlarının test ederken (non-koşullu) mutant fare ile veya pratik değildir. </li><li> Bir fare koymakher kutuda günün erken alışmakta. Kutusu &quot;ev&quot; gibi hissettirmek için de en az bir gece için gerçek grup evde kafes içinde bir karton tünel, kirli yataklar cömert bir kısmı, ile sağlanır. Ahşap bir bung akşama kadar istifleme tüp erişim engellenmiş olur. 100 g gıda pellet (küçük ve büyük bir karışımı) (tüp dik tutularak diğer ucunda geliþtirilen) distal ucunda istifleme tüp yerleştirilir. Fare test başlamadan önce hafif aç olduğundan emin olmak için, ev kutusu gıda ile sağlanmaz. </li><li> Tıpkı karanlık aşaması başlamadan önce, istifleme tüp fare erişimine izin vermek ahşap bung kaldırmak. Ertesi sabah (tekrar, zamanlama çok önemli değildir) toplamak ve ana üs kutuya stoklandı olan tüm gıda pelet tartmak. </li></ol> 6. Beklenen sonuçlar Kadın C57BL / 6 farelerin kullanarak, stoklandı medyan miktarı etrafında olurdu50-70 g. Prefrontal korteks lezyonları sadece zayıf bir etkisi 12 (Şekil 11) ise hipokampal lezyonlar kuvvetle bastırmak, hoarding11. <img src="/files/ftp_upload/2607/2607fig11.jpg" alt="Şekil 11" /> Şekil 11 gıda pelet Kilo kontrolü ve medial prefrontal korteks Lezyonlu fareler (medyan ve interquartil aralıkları) stoklandı. Medyan oldukça farklı olmasına rağmen, kontrol grubunda yüksek değişkenliği sonuç (P = 0.3) istatistiksel olarak anlamlı olmaktan uzaktır anlamına gelir.

<ol>
	<li>Cunningham, C., Deacon, R. M. J., Chan, K., Boche, D., Rawlins, J. N. P., Perry, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathologically+distinct+prion+strains+give+rise+to+similar+temporal+profiles+ofbehavioural+deficits.">Neuropathologically distinct prion strains give rise to similar temporal profiles ofbehavioural deficits.</a> Neurobiol. Dis. 18, 258-269 (2005).</li><li>Cunningham, C., Deacon, R., Wells, H., Boche, D., Waters, S., Picanco Diniz, C., Scott, H., Rawlins, J. N. P., Perry, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+changes+characterize+early+behavioural+signs+in+the+ME7+model+of+murine+prion+disease.">Synaptic changes characterize early behavioural signs in the ME7 model of murine prion disease.</a> Eur. J. Neurosci. 17, 2147-2215 (2003).</li><li>Damiani, R., Modesto, S., Yates, A., Neveling, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Earliest+evidence+of+cynodont+burrowing.">Earliest evidence of cynodont burrowing.</a> Proc. R. Soc. Lond. B. 270, 1747-1751 (2003).</li><li>Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burrowing+in+rodents:+a+sensitive+method+for+detecting+behavioral+dysfunction.">Burrowing in rodents: a sensitive method for detecting behavioral dysfunction.</a> Nat. Protocols. 1, 118-121 (2006).</li><li>Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+nest+building+in+mice.">Assessing nest building in mice.</a> Nat. Protocols. 1, 1117-1119 (2006).</li><li>Deacon, R. M. J., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digging+in+Mice:+Marble+Burying,+Burrowing,+and+Direct+Observation+Reveal+Changes+in+Mouse+Behavior.">Digging in Mice: Marble Burying, Burrowing, and Direct Observation Reveal Changes in Mouse Behavior.</a> Mood and anxiety related phenotypes in mice. , (2009).</li><li>Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+hoarding+in+mice.">Assessing hoarding in mice.</a> Nat. Protocols. 1, 2828-2830 (2006).</li><li>Deacon, R. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burrowing:+A+sensitive+behavioural+assay,+tested+in+five+species+of+laboratory+rodents.">Burrowing: A sensitive behavioural assay, tested in five species of laboratory rodents.</a> Behav. Brain. Res. 200, 128-133 (2009).</li><li>Deacon, R. M. J., Bannerman, D. M., Kirby, B. P., Croucher, A., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+cytotoxic+hippocampal+lesions+in+mice+on+a+cognitive+test+battery.">Effects of cytotoxic hippocampal lesions in mice on a cognitive test battery.</a> Behav. Brain. Res. 133, 57-68 (2002).</li><li>Deacon, R. M. J., Brook, R. C., Meyer, D., Haeckel, O., Ashcroft, F. M., Miki, T., Seino, S., Liss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+phenotyping+of+mice+lacking+the+KATP+channel+subunit+Kir6.2.">Behavioral phenotyping of mice lacking the KATP channel subunit Kir6.2.</a> Physiol. Behav. 87, 723-733 (2006).</li><li>Deacon, R. M. J., Croucher, A., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+cytotoxic+lesion+effects+on+species-typical+behaviors+in+mice.">Hippocampal cytotoxic lesion effects on species-typical behaviors in mice.</a> Behav. Brain. Res. 132, 203-213 (2002).</li><li>Deacon, R. M. J., Penny, C., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+medial+prefrontal+cortex+cytotoxic+lesions+in+mice.">Effects of medial prefrontal cortex cytotoxic lesions in mice.</a> Behav. Brain. Res. 139, 139-155 (2003).</li><li>Deacon, R. M. J., Raley, J. M., Perry, V. H., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burrowing+into+prion+disease.">Burrowing into prion disease.</a> Neuroreport. 12, 2053-2057 (2001).</li><li>Deacon, R. M. J., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippocampal+lesions,+species-typical+behaviours+and+anxiety+in+mice.">Hippocampal lesions, species-typical behaviours and anxiety in mice.</a> Behav. Brain. Res. 156, 241-249 (2005).</li><li>Deacon, R. M. J., Thomas, C. L., Rawlins, J. N. P., Morley, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+behavior+of+C57BL/6+and+C57BL/10.">A comparison of the behavior of C57BL/6 and C57BL/10.</a> Behav. Brain. Res. 179, 239-247 (2007).</li><li>Guenther, K., Deacon, R. M. J., Perry, V. H., Rawlins, J. N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+behavioural+changes+in+scrapie-affected+mice+and+the+influence+of+dapsone.">Early behavioural changes in scrapie-affected mice and the influence of dapsone.</a> Eur. J. Neurosci. 14, 401-409 (2001).</li><li>Mallucci, G. R., White, F. a. r. m. e. r., Dickinson, M., Khatun, A., Powell, H., Brandner, A. D., Jefferys, S., R, J. G., Collinge, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+Cellular+Prion+Protein+Reverses+Early+Cognitive+Deficits+and+Neurophysiological+Dysfunction+in+Prion-Infected+Mice.">Targeting Cellular Prion Protein Reverses Early Cognitive Deficits and Neurophysiological Dysfunction in Prion-Infected Mice.</a> Neuron. 53, 325-335 (2007).</li><li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The principles of humane experimental technique. , (1959).</li><li>Schmid-Holmes, S., Drickamer, L. C., Robinson, A. S., Gillie, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burrows+and+burrow+cleaning+behaviour+of+house+mice.">Burrows and burrow cleaning behaviour of house mice.</a> Am. Mid. Nat. 146, 53-62 (2001).</li><li>Teeling, J. L., Felton, L. M., Deacon, R. M. J., Cunningham, C., Rawlins, J. N. P., Perry, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sub-pyrogenic+systemic+inflammation+impacts+on+brain+and+behavior,+independent+of+cytokines.">Sub-pyrogenic systemic inflammation impacts on brain and behavior, independent of cytokines.</a> Brain Behav. Immun. 21, 836-850 (2007).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

<html> Bu testleri çalıştırmak için son derece basit ama etkisi boyutları çok büyük, Russel ve Burch 3 Rs &quot;18&quot; Sadeleştirme &quot;yönü uygun tedaviler, gerilme farklılıkları, vb onları son derece duyarlı hale. Gerçekten de, burrowing gibi testlerde iyi performans hayvanların genel sağlık durumu iyi göstergesi gibi görünüyor. Bu nedenle bu hayvan refahı değerlendirilmesi için iyi bir test olabilir. Laboratuvar kemirgenler için çevre zenginleştirme önemi bu gün kabul edilmektedir. Yuvalama malzeme temini, çok sayıda hayvan barınağı artık standart bir uygulama olduğunu ve bunu yapmak kolaydır. Coşku ile fareler burrow bir potansiyel mükemmel zenginleştirme, ama ne yazık ki bu henüz geliştirilmiş değil sağlayan pratik bir yolu olacaktır &quot;self-yeniden yükleme&quot; burrow burrowing yapar. Fareler bulmak ister istifleme zenginleştirici henüz tespit edilmiştir değil. _content &quot;&gt; Bir dezavantajı bu testler tarafından oluşturulan veriler genellikle non-parametrik (Gauss dağılım) olduğunu, bu nedenle uygun non-parametrik istatistikler, örneğin ikili karşılaştırmalar Mann-Whitney U testi, bunları analiz için gerekli olan Kruskal- çok grup veri Wallis ANOVA tekrarlayan ölçümler tasarımları, non-parametrik veriler için hiç uygun ANOVA testi olmadığından kullanılması durumunda, sonuçları örneğin karekök veya günlük prosedürleri onlara daha normal bir dağılım uygun yapmak için, dönüştürülecek. . Cihazların ölçümleri biraz metin belirtilenlerden farklı (ABD deneyciler için yararlı), ancak geniş farklar kaçınılmalıdır. Ancak, bazı durumlarda diğer deneyciler, burada açıklanan dışında farklı yapılar daha iyi çalışmasını bulabilirsiniz. Tüm davranışsal ölçümleri için gibi, farelerin aktivite düzeyleri normal olup olmadığını, hareketsizlik gibi açıkça bir detrim olacak görmek için test edilmelidirental türlerin tipik davranışları üzerindeki etkisi. Scrapie ile enfekte farelerde engelli burrowing ve yuvalama gösteren, aktivite düzeyleri (açık alan aparatı test) normal idi. Gerçekten de, hiperaktivite bir dönem bu türün tipik davranışlar ilk 2 engelli yaklaşık 2-4 hafta sonra ortaya çıkar. Burrowing hipokampal lezyonları tarafından üretilen güçlü bir bozulma, yerleştirme ve istifleme, tüm bu türün tipik davranışlar, bu lezyonların gibi köklü etkileri uzamsal öğrenme ve memory9 bozuklukları tamamlar. Bu karakteristik MS 14 günlük yaşam faaliyetlerine bozuklukları eşdeğer gibi görünüyor. Bu türlerin tipik testleri de preklinik tarama, Alzheimer ve diğer nörodejeneratif hastalıklar 14 tedaviler için büyük bir kullanım olarak karşımıza çıkabilir . Birçok insan beyin bozuklukları kaybı veya azaltılmış yeteneği normal arifesinde gerçekleştirmekryday görevleri kognitif bozukluk gibi hastalığın diğer özellikleri kadar önemlidir. Özellikle, bu kayıp, bakıcılar ve bu yüzden sık sık empoze büyük sosyo-ekonomik yük katılımı gerekebilir.

assessing burrowing, nest construction, and hoarding in mice

&quot;Günlük yaşam aktiviteleri (ADL) gerçekleştirmek için yeteneğinde bozulma (AD), Alzheimer hastalığının erken bir işareti. AD için olası tedaviler Preklinik davranışsal tarama şu anda büyük ölçüde bilişsel test, sık sık pahalı ekipman ve deneyci zaman çok talep üzerinde duruluyor. Ancak, insan epizodik bellek (MS bellek en ağır etkilenen yönü), büyük ölçüde olmayan epizodik görünüyor kemirgen bellek, farklı. Bu nedenle, kemirgenler AD için yeni MS tedavisi için tarama mevcut yolları, başarılı olmak özünde olası değildir. Farelerin ADL karakterize klinik öncesi tarama için yeni bir yaklaşım olacaktır. Tesadüfen, birkaç tür testlerin son Oxford&#39;da geliştirildi, ve burada üç en hassas ve en iyi karakterize sunulmaktadır. Sığıntı, ilk olarak Oxford 13 geliştirilmiştir. Bu bir fare istifleme paradigma geliştirmek için ihtiyaç gelişti. En yayınlamaked kemirgen istifleme paradigmalar, uzak bir besin kaynağı evde kafes bağlayan geçit ile bağlantılı olduğu gereklidir. Bu evde kafes değiştirerek yanı sıra bir fare geçirmez bağlayan geçit ve besin kaynağı içerecektir. Yani o kafesin içindeki besin kaynağı koymak mümkün olup olmayacağını kabul edildi. Bir kap zemine yerleştirilmiş olsaydı ertesi sabah tarafından boşaltılmış olduğunu tespit edildi, gıda pelet, ancak, sadece bir yığın konteyner girişinde biriken ziyade, konteyner uzak ayrı bir yere yerleştirilir. farelerin istifleme onları gerçekten olsaydı, tahmin edilebileceği gibi. Dikkat edilirse, seçilen bir yere ağızlarına pelet taşıyan fareler, (&quot;burrowing&quot;) hareketleri kazma performanslı olduğunu gösterdi olduğu gibi eğer gerçekten istifleme. 6 Gıda pelet burrowing için önemli bir substrat değildir; fareler boş tüpleri, kum, çakıl, hatta kendi kafesi kirli yataklar dolu. Daha fazlaüzerinde, boş bir kimse bu 8 yanına bile tam bir tüp boş. Literatürde çok sayıda yuvalama protokolleri mevcuttur. Mevcut Oxford prosedürü kolaylaştırır ve yuva kalite 5 için iyi tanımlanmış bir puanlama sistemi vardır. Istifleme paradigma, daha sonra farelerin yerine, gerçek bir ev kafesine geri istifleme, istifleme aparatı &quot;ana üs&quot; yaşamaya adapte edildiği geliştirilmiştir. Bu ana üs, tel örgü, içerdiği besin kaynağı olan distal ucu yapılmış bir tüp bağlanmıştır. Bu düzenleme, iyi bir istifleme davranışı, gün boyunca farelerin &quot;ana üs&quot; yaşam için uyarlanmış ve sadece geceleri istifleme tüp girmek için izin gibi uzun verim olduğunu kanıtladı.

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Burrowing, Nest Construction, and Hoarding in Mice at JoVE.com

Assessing Burrowing, Nest Construction, and Hoarding in Mice

Sığıntı, yerleştirme ve istifleme farelerin kolayca laboratuvar ortamında gerçekleştirmek, türün tipik faaliyetler. Bu makale, kolayca ve ucuza nasıl değerlendirilmelidir açıklamaktadır. Bu protokoller fare suşu, beyin lezyonları ve hastalıklara karşı son derece duyarlıdır. Dahası, fareler için &quot;çevre zenginleştirme&quot; oluşturur ve &quot;3 Rs&quot; 18 &quot;Sadeleştirme&quot; yönü somutlaştırmak.

Değerlendirilmesi Fare, Nest İnşaat ve İstifçiliğine Sığıntı

Deterioration in the ability to perform "Activities of daily living" (ADL) is an early sign of Alzheimer's disease (AD). Preclinical behavioural screening ...

assessing-burrowing-nest-construction-and-hoarding-in-mice

Research

JoVE Journal

Neuroscience

31.9K Görüntüleme.  University of Oxford. Sığıntı, yerleştirme ve istifleme farelerin kolayca laboratuvar ortamında gerçekleştirmek, türün tipik faaliyetler. Bu makale, kolayca ve ucuza nasıl değerlendirilmelidir açıklamaktadır. Bu protokoller fare suşu, beyin lezyonları ve hastalıklara karşı son derece duyarlıdır. Dahası, fareler için "çevre zenginleştirme" oluşturur ve "3 Rs" 18 "Sadeleştirme" yönü somutlaştırmak.

Video: Assessing Burrowing, Nest Construction, and Hoarding in Mice

Design and Construction of a Cost Effective Headstage for Simultaneous Neural Stimulation and Recording in the Water Maze

Headstage preamplifiers and source followers are commonly used to study neural activity in behavioral neurophysiology experiments. Available commercial products are often expensive, not easily customized, and not submersible. Here we describe a method to design and build a customized, integrated circuit headstage for simultaneous 4-channel neural recording and 2-channel simulation in awake, behaving animals. The headstage is designed using a free, commercially available CAD-type design package, and can be modified easily to accommodate different scales (e.g. to add channels). A customized printed circuit board is built using surface mount resistors, capacitors and operational amplifiers to construct the unity gain source follower circuit. The headstage is made water-proof with a combination of epoxy, parafilm and a synthetic rubber putty. We have successfully used this device to record local field potentials and stimulate different brain regions simultaneously via independent channels in rats swimming in a water maze. The total cost is &lt; $30/unit and can be manufactured readily.

We present a low-cost method to design and construct a light headstage pre-amplifier system with simultaneous neural recording and stimulation capability. This device can be waterproofed for use in swimming animals.

Eşzamanlı Sinir Uyarım ve Su Maze Kayıt için Tasarım ve İnşaat Maliyet Etkin headstage

Headstage preamplifiers and source followers are commonly used to study neural activity in behavioral neurophysiology experiments. Available commercial ...

Nörobilim

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in rodents. In our laboratory, we evaluated the two types of memory in more than 30 strains of genetically engineered mice using the automated version of this apparatus. Here, we present the modified T-maze apparatus operated by a computer with a video-tracking system and our protocols in a movie format. The T-maze apparatus consists of runways partitioned off by sliding doors that can automatically open downward, each with a start box, a T-shaped alley, two boxes with automatic pellet dispensers at one side of the box, and two L-shaped alleys. Each L-shaped alley is connected to the start box so that mice can return to the start box, which excludes the effects of experimenter handling on mouse behavior. This apparatus also has an advantage that in vivo microdialysis, in vivo electrophysiology, and optogenetics techniques can be performed during T-maze performance because the doors are designed to go down into the floor. In this movie article, we describe T-maze tasks using the automated apparatus and the T-maze performance of &alpha;-CaMKII+/- mice, which are reported to show working memory deficits in the eight-arm radial maze task. Our data indicated that &alpha;-CaMKII+/- mice showed a working memory deficit, but no impairment of reference memory, and are consistent with previous findings using the eight-arm radial maze task, which supports the validity of our protocol. In addition, our data indicate that mutants tended to exhibit reversal learning deficits, suggesting that &alpha;-CaMKII deficiency causes reduced behavioral flexibility. Thus, the T-maze test using the modified automatic apparatus is useful for assessing working and reference memory and behavioral flexibility in mice.

This article presents the protocol of T-maze tests using a modified automated apparatus for assessing the learning and memory functions in mice.

T-labirent Zorla Değişim ve Çalışma ve Fareler Referans Bellek değerlendirilmesi için sağ-sol Ayrımcılık Görevler

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of thermal nociceptors1,2 while the second involves a wholesale (global) activation of most or all such neurons3. Together, these techniques allow visualization and quantification of the behavioral functions of Drosophila nociceptive sensory neurons.
The Drosophila larva is an established model system to study thermal nociception, a sensory response to potentially harmful temperatures that is evolutionarily conserved across species1,2. The advantages of Drosophila for such studies are the relative simplicity of its nervous system and the sophistication of the genetic techniques that can be used to dissect the molecular basis of the underlying biology4-6 In Drosophila, as in all metazoans, the response to noxious thermal stimuli generally involves a "nocifensive" aversive withdrawal to the presented stimulus7. Such stimuli are detected through free nerve endings or nociceptors and the amplitude of the organismal response depends on the number of nociceptors receiving the noxious stimulus8. In Drosophila, it is the class IV dendritic arborization sensory neurons that detect noxious thermal and mechanical stimuli9 in addition to their recently discovered role as photoreceptors10. These neurons, which have been very well studied at the developmental level, arborize over the barrier epidermal sheet and make contacts with nearly all epidermal cells11,12. The single axon of each class IV neuron projects into the ventral nerve cord of the central nervous system11 where they may connect to second-order neurons that project to the brain.
Under baseline conditions, nociceptive sensory neurons will not fire until a relatively high threshold is reached. The assays described here allow the investigator to quantify baseline behavioral responses or, presumably, the sensitization that ensues following tissue damage. Each assay provokes distinct but related locomotory behavioral responses to noxious thermal stimuli and permits the researcher to visualize and quantify various aspects of thermal nociception in Drosophila larvae. The assays can be applied to larvae of desired genotypes or to larvae raised under different environmental conditions that might impact nociception. Since thermal nociception is conserved across species, the findings gleaned from genetic dissection in Drosophila will likely inform our understanding of thermal nociception in other species, including vertebrates.

Local and Global Methods of Assessing Thermal Nociception in Drosophila Larvae

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of thermal nociceptors1,2 while the second involves a wholesale (global) activation of most or all such neurons3. Together, these techniques allow visualization and quantification of the behavioral functions of Drosophila nociceptive sensory neurons.

Termal nosisepsiyon değerlendirilmesi Yerel ve Küresel Yöntemleri<em&gt; Drosophila</em&gt; Larva

In this article, we demonstrate assays to study thermal nociception in Drosophila larvae. One assay involves spatially-restricted (local) stimulation of ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life. The cold plantar assay allows the objective and inexpensive assessment of cold sensitivity in mice, and can quantify both analgesia and hypersensitivity. Mice are acclimated on a glass plate, and a compressed dry ice pellet is held against the glass surface underneath the hindpaw. The latency to withdrawal from the cooling glass is used as a measure of cold sensitivity.
Cold sensation is also important for survival in regions with seasonal temperature shifts, and in order to maintain sensitivity animals must be able to adjust their thermal response thresholds to match the ambient temperature. The Cold Plantar Assay (CPA) also allows the study of adaptation to changes in ambient temperature by testing the cold sensitivity of mice at temperatures ranging from 30 &#176;C to 5 &#176;C. Mice are acclimated as described above, but the glass plate is cooled to the desired starting temperature using aluminum boxes (or aluminum foil packets) filled with hot water, wet ice, or dry ice. The temperature of the plate is measured at the center using a filament T-type thermocouple probe. Once the plate has reached the desired starting temperature, the animals are tested as described above.
This assay allows testing of mice at temperatures ranging from innocuous to noxious. The CPA yields unambiguous and consistent behavioral responses in uninjured mice and can be used to quantify both hypersensitivity and analgesia. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

The Cold Plantar Assay (CPA) measures cold responsiveness between 30 &#176;C and 5 &#176;C, and can also measure cold adaptation. This protocol describes how to use the CPA to measure cold hypersensitivity, analgesia, and adaptation in mice.

Fareler Soğuk Hassasiyeti ve Uyum belirlenmesi için Basit ve ucuz Yöntem

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Primary neurogenesis is a dynamic and complex process during embryonic development that sets up the initial layout of the central nervous system. During this process, a portion of neural stem cells undergo differentiation and give rise to the first populations of differentiated primary neurons within the nascent central nervous system. Several vertebrate model organisms have been used to explore the mechanisms of neural cell fate specification, patterning, and differentiation. Among these is the African clawed frog, Xenopus, which provides a powerful system for investigating the molecular and cellular mechanisms responsible for primary neurogenesis due to its rapid and accessible development and ease of embryological and molecular manipulations. Here, we present a convenient and rapid method to observe the different populations of neuronal cells within Xenopus central nervous system. Using antibody staining and immunofluorescence on sections of Xenopus embryos, we are able to observe the locations of neural stem cells and differentiated primary neurons during primary neurogenesis.

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

This article presents a convenient and rapid method for visualizing different neuronal cell populations in the central nervous system of Xenopus embryos using immunofluorescent staining on sections.

İlköğretim nöron değerlendirilmesi<em&gt; Xenopus</em&gt; Embriyolar kullanarak immün

Primary neurogenesis is a dynamic and complex process during embryonic development that sets up the initial layout of the central nervous system. During ...

Assessing Spatial Learning and Memory in Small Squamate Reptiles

Clinical research has leveraged a variety of paradigms to assess cognitive decline, commonly targeting spatial learning and memory abilities. However, interest in the cognitive processes of nonmodel species, typically within an ecological context, has also become an emerging field of study. In particular, interest in the cognitive processes in reptiles is growing although experimental studies on reptilian cognition are sparse. The few reptilian studies that have experimentally tested for spatial learning and memory have used rodent paradigms modified for use in reptiles. However, ecologically important aspects of the physiology and behavior of this taxonomic group must be taken into account when testing for spatially based cognition. Here, we describe modifications of the dry land Barnes maze and associated testing protocol that can improve performance when probing for spatial learning and memory ability in small squamate reptiles. The described paradigm and procedures were successfully used with male side-blotched lizards (Uta stansburiana), demonstrating that spatial learning and memory can be assessed in this taxonomic group with an ecologically relevant apparatus and protocol.

This paper describes a modification of the Barnes maze, a standard rodent paradigm used to assess spatial memory and learning, for use in small squamate reptiles.

Küçük pul pul Sürüngenler Mekansal Öğrenme ve Bellek değerlendirilmesi

Clinical research has leveraged a variety of paradigms to assess cognitive decline, commonly targeting spatial learning and memory abilities. However, ...

An Objective and Reproducible Test of Olfactory Learning and Discrimination in Mice

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and parenting. Importantly, mice can be trained to associate novel odors with specific behavioral responses to provide insight into olfactory circuit function. This protocol details the procedure for training mice on a Go/No-Go operant learning task. In this approach, mice are trained on hundreds of automated trials daily for 2&#8211;4 weeks and can then be tested on novel Go/No-Go odor pairs to assess olfactory discrimination, or be used for studies on how odor learning alters the structure or function of the olfactory circuit. Additionally, the mouse olfactory bulb (OB) features ongoing integration of adult-born neurons. Interestingly, olfactory learning increases both the survival and synaptic connections of these adult-born neurons. Therefore, this protocol can be combined with other biochemical, electrophysiological, and imaging techniques to study learning and activity-dependent factors that mediate neuronal survival and plasticity.

Here, we train mice on an associative learning task to test odor discrimination. This protocol also allows for studies on learning-induced structural changes in the brain.

Koku öğrenme ve ayrımcılık farelerde bir objektif ve tekrarlanabilir testi

Olfaction is the predominant sensory modality in mice and influences many important behaviors, including foraging, predator detection, mating, and ...

Assessing Pupil-linked Changes in Locus Coeruleus-mediated Arousal Elicited by Trigeminal Stimulation

Current scientific literature provides evidence that trigeminal sensorimotor activity associated with chewing may affect arousal, attention, and cognitive performance. These effects may be due to widespread connections of the trigeminal system to the ascending reticular activating system (ARAS), to which noradrenergic neurons of the locus coeruleus (LC) belongs. LC neurons contain projections to the whole brain, and it is known that their discharge co-varies with pupil size. LC activation is necessary for eliciting task-related mydriasis. If chewing effects on cognitive performance are mediated by the LC, it is reasonable to expect that changes in cognitive performance are correlated to changes in task-related mydriasis. Two novel protocols are presented here to verify this hypothesis and document that chewing effects are not attributable to aspecific motor activation. In both protocols, performance and pupil size changes observed during specific tasks are recorded before, soon after, and half an hour following a 2 min period of either: a) no activity, b) rhythmic, bilateral handgrip, c) bilateral chewing of soft pellet, and d) bilateral chewing of hard pellet. The first protocol measures level of performance in spotting target numbers displayed within numeric matrices. Since pupil size recordings are recorded by an appropriate pupillometer that impedes vision to ensure constant illumination levels, task-related mydriasis is evaluated during a haptic task. Results from this protocol reveal that 1) chewing-induced changes in performance and task-related mydriasis are correlated and 2) neither performance nor mydriasis are enhanced by handgrip. In the second protocol, use of a wearable pupillometer allows measurement of pupil size changes and performance during the same task, thus allowing even stronger evidence to be obtained regarding LC involvement in the trigeminal effects on cognitive activity. Both protocols have been run in the historical office of Prof. Giuseppe Moruzzi, the discoverer of ARAS, at the University of Pisa.

To verify whether trigeminal effects on cognitive performance involve locus coeruleus activity, two protocols are presented that aim to evaluate possible correlations between the performance and task-related pupil size changes induced by chewing. These protocols may be applied to conditions in which locus coeruleus contribution is suspected.

Trigeminal Stimülasyon tarafından Ortaya Çıkan Locus Coeruleus aracılı Uyarılma'da Gözbebeği Ile Bağlantılı Değişikliklerin Değerlendirilmesi

Current scientific literature provides evidence that trigeminal sensorimotor activity associated with chewing may affect arousal, attention, and cognitive ...

Quantitative Measurement of Intrathecally Synthesized Proteins in Mice

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the CSF protein composition delivers crucial information in basic neuroscience research as well as neurological diseases. One caveat is that proteins measured in CSF may derive from both intrathecal synthesis and transudation from serum, and protein analysis of CSF can only determine the sum of these two components. To discriminate between protein transudation from the blood and intrathecally produced proteins in animal models as well as in humans, CSF protein profiling measurements using conventional protein analysis tools must include the calculation of the albumin CSF/serum quotient (Qalbumin), a marker of the integrity of the blood-brain interface (BBI), and the protein index (Qprotein/Qalbumin), an estimate of intrathecal protein synthesis. This protocol illustrates the entire procedure, from CSF and blood collection to quotients and indices calculations, for the quantitative measurement of intrathecal protein synthesis and BBI impairment in mouse models of neurological disorders.

Elevated spinal fluid protein levels can either be the result of diffusion of plasma protein across an altered blood-brain barrier or intrathecal synthesis. An optimized testing protocol is presented in this article that helps to discriminate both cases and provides quantitative measurements of intrathecally synthesized proteins.

Farelerde İntrathecally Sentezlenmiş Proteinlerin Kantitatif Ölçümü

Cerebrospinal fluid (CSF), a fluid found in the brain and the spinal cord, is of great importance to both basic and clinical science. The analysis of the ...

Electrocorticographic Recording of Cerebral Cortex Areas Manipulated Using an Adeno-Associated Virus Targeting Cofilin in Mice

The use of electrocorticographic (ECoG) recordings in rodents is relevant to sleep research and to the study of a wide range of neurological conditions. Adeno-associated viruses (AAVs) are increasingly used to improve understanding of brain circuits and their functions. The AAV-mediated manipulation of specific cell populations and/or of precise molecular components has been tremendously useful to identify new sleep regulatory circuits/molecules and key proteins contributing to the adverse effects of sleep loss. For instance, inhibiting activity of the filamentous actin-severing protein&#160;cofilin&#160;using AAV prevents sleep deprivation-induced memory impairment. Here, a protocol is&#160;described that combines the manipulation of cofilin function in a cerebral cortex area with the recording of ECoG activity to examine whether cortical cofilin modulates the wakefulness and sleep ECoG signals. AAV injection is performed during the same surgical procedure as the implantation of ECoG and electromyographic (EMG) electrodes in adult male and female mice. Mice are anesthetized, and their heads are shaved. After skin cleaning and incision, stereotaxic coordinates of the motor cortex are determined, and the skull is pierced at this location. A cannula prefilled with an AAV expressing cofilinS3D, an inactive form of cofilin, is slowly positioned in the cortical tissue. After AAV infusion, gold-covered screws (ECoG electrodes) are screwed through the skull and cemented to the skull with gold wires inserted in the neck muscles (EMG electrodes). The animals are allowed three weeks to recover and to ensure sufficient expression of cofilinS3D. The infected area and cell type are verified using immunohistochemistry, and the ECoG is analyzed using visual identification of vigilance states and spectral analysis. In summary, this combined methodological approach allows the investigation of the precise contribution of molecular components regulating neuronal morphology and connectivity to the regulation of synchronized cerebral cortex activity during wakefulness and sleep.

This article describes a protocol for the manipulation of molecular targets in the cerebral cortex using adeno-associated viruses and for monitoring the effects of this manipulation during wakefulness and sleep using electrocorticographic recordings.

Farelerde Cofilin Hedef Alan Adeno İlişkili Bir Virüs Kullanılarak Manipüle Edilen Serebral Korteks Alanlarının Elektrokortikografik Kaydı

The use of electrocorticographic (ECoG) recordings in rodents is relevant to sleep research and to the study of a wide range of neurological conditions. ...