Diese Arbeit wurde von NCTR / FDA finanziert.

Obwohl nicht in der Video gezeigt wurden Ratten erste eine Überdosis von 300 mg / kg Pentobarbital gegeben, was zu einer Anästhesie in weniger als 3 min, und dann durch Enthauptung getötet. Ihre Gehirne wurden dann schnell, aber vorsichtig aus dem Schädel entfernt und gekühlt in eiskaltem Kochsalzlösung für 5 min. Es ist wichtig, damit das Gehirn abkühlen dieser Zeitspanne vor Sezieren des MAV so dass der MAV von der Oberfläche der Rinde getrennt werden kann (der Oberseite der Schicht I). Das Hirn wurde dann in den Boden einer Petrischale Glas ruht auf Eis, das voll war (1 cm tief) eiskalter physiologischer Kochsalzlösung oder 0,1 M Natrium-Phosphat-gepufferter Kochsalzlösung pH = 7,4 gestellt. Alle Präparation wird mit dem Gehirn zum größten Teil in Kochsalzlösung eingetaucht getan. Ein. Die Entfernung der Zirbeldrüse <ol><li> Platzieren des Gehirns dorsalen Seite nach oben (bezogen auf den Boden der Petrischale). Die Zirbeldrüse liegt am kaudalen ventralen Bereich zwischen den beiden Hemisphären nur rostral t liegter Kleinhirn (pineal Vertiefung), und ist direkt unterhalb oder an der Oberfläche der Hirnhaut über der Colliculi. Entfernen Sie die Zirbeldrüse erste mit zwei kleinen gebogenen Spitze Pinzette. Es ist rosa in der Farbe wie der Hirnrinde, wird aber oft in den Resten von Blut und Gefäßen verbleibende vom Gehirn entfernt umgeben. </li></ol> 2. Entfernen des MAV <ol><li> Flip das Gehirn über &quot;upside down&quot; und trennen Sie die A. vertebralis, kleineren Arterien und Meningen für den pons aus der Hirnhaut und Gefäßsystem des Vorderhirns. Entfernen des Vorderhirns MAV wird dann gestartet. Es ist wichtig, ventral beginnen in der Dissektion Prozess. Die großen großen Arterien aus dem Kreis der Willis, Mitte Hirnarterien (MCA) und der vorderen Arterien sind die stärksten und dienen als &quot;Gerüst&quot;, mit denen die kleineren oberflächlichen Arterien und Arteriolen des Pia- Membran kann dann aus dem Kortex der Rest der Hirnhaut entfernt werden. Siehe Überprüfung durch Scremin 7 für mErz visuelle Darstellungen und Details der Hirnoberfläche Gefäßsystem. </li><li> Beginnend mit beiden Hemisphären, verwenden Sie die kleine gebogene Spitze Pinzette die hintere kommunizieren Arterie unmittelbar hinter der A. carotis interna Stelle durchtrennen. So trennt die weitere vorderen und hinteren arteriellen Bäumen des Vorderhirns. Wiederholen Sie diesen Vorgang für die kontralaterale Hemisphäre. </li><li> Ergreifen der MCA und der vorderen Arterie mit der Zange, ziehen in einer anterioren-dorsaler Richtung, so dass der MAV Abdecken des ventralen vorderen Kortex (piriformis, Riechtuberkel) über und um den Riechbahn angehoben wird. Dadurch wird ein Großteil der MAV für den vorderen Kortex (vereinzelten und Orbital). </li><li> Schalten Sie das Gehirn in einem 45 bis 90 ° Winkel zu der Petrischale. Die seitlichen, stärker vordere Bereiche des MAV umgebenden seitlichen kortikalen Regionen (Granulat abgeschottet sekundären somatosensorischen und auditorischen Cortex) kann aus der Rinde durch Ergreifen des MCA und zugehörigen arter befreities und vorsichtig dorsal entlang der Hirnrinde. Falls erforderlich, können die Enden der Zange zum Heben und befreien die großen Arterien aus der Rinde beim Präparieren werden. </li><li> Entfernen Sie nun die weitere hinteren seitlichen Regionen des MAV. (Beachten Sie, dass es am besten, von einer Hemisphäre zur anderen wechseln während dieser Ernte, um sicherzustellen, dass die MAV kalt und hydratisiert bleibt. Auch wenn der Widerstand bei der Befreiung der MAV aus der Rinde auf einer Hemisphäre Schalter auf der kontralateralen Hemisphäre gestoßen vorübergehend und gehen Sie dann wieder auf den ursprünglichen Hemisphäre später.) </li><li> Um die am dorsalen Bereiche des MAV umgebenden primären somatosensorischen entfernen und motorischen Kortex des Gehirns drehen dorsalen Seite nach oben (bezogen auf den Boden der Petrischale). Um endlich befreien die MAV aus dem Gehirn, verwenden Sie die Enden der Zange entlang der sagittalen Sinus. Dieser Teil des geernteten MAV kann entweder temporär beibehalten werden in eiskalter Kochsalzlösung bis zur Prüfung und Analyse eingefroren oder für eine spätere Verarbeitung. Oftdie MAV, welche die populärsten posterior / kaudalen Regionen des Kortex (entorhinalen, visuellen und auditiven Kortex meisten caudal) bleibt an der Hirnrinde. Seiner Entnahme wird später im Video, wenn die zwischen dem MAV retrosplenialen Cortex und die über den Colliculi seziert gezeigt. </li></ol> 3. Entfernen der Aderhaut Plexus <ol><li> Positionieren Sie das Gehirn Dorsalseite und halten Sie ihn mit den größeren Pinzette Drücken Sie die kleineren Pinzette nach unten durch die Mittellinie zwischen den Hemisphären und dann die Enden Punktion durch die Rinde und Corpus callosum (≈ -3,3 mm bregma) in der Spitze die Mittellinie des Hippocampus. </li><li> Verwenden Sie die Zange, um den Kortex mit callosum wegziehen aus dem dorsalen Hippocampus und Septum, Aussetzen meisten der Seitenventrikel. Der Plexus geortet und identifiziert werden durch die rote Wellenlinie Abgrenzung der Hauptverkehrsader, die ihre Länge läuft. Mit den beiden Enden der Zange, um die Seitenwände des dritten ven hebelntricle und vergrößern Sie es am meisten kaudalen Ende (≈ -4,3 mm bregma 8). </li><li> Mit den kleinen Zange, ziehen Sie dieses Ende des Plexus kostenlos. Dann die sehr Frontzahnbereich zwischen Septum und caudatus / Putamen (die meisten rostral Umfang ≈ 1,6 mm von Bregma) gehen und mit der Zange Vergrößern diesen Abschnitt des Ventrikels und ziehen Sie den Plexus kostenlos. Führen Sie den gleichen Vorgang auf der kontralateralen Hemisphäre, um den zweiten verbleibenden Plexus erhalten. Auch dieses Gewebe kann entweder temporär beibehalten werden in eiskaltem Kochsalzlösung bis zur Prüfung und Analyse oder gefroren für eine spätere Verarbeitung. </li></ol> 4. Beseitigung der verbleibenden MAV im 3. Ventrikel Über der Thalamus und die Colliculi ebenso wie die auf die mehr Caudal Regionen des Cortex einschließlich retrosplenialen, auditiven und visuellen Cortex <ol><li> Entfernen Sie den gesamten Hippocampus aus beiden Hemisphären Aussetzen der MAV über den Thalamus und colliculi. Die Entfernung vondieser Teil des MAV ist viel weniger schwierig als die Entfernung von MAV über den Kortex. </li><li> Ziehen Sie diesen Teil der MAV frei durch Ergreifen des größeren Gefäßen, die über dem vorderen Teil des Thalamus und vorsichtig kaudal. Das Gefäßsystem an die supra collicular Netzwerk verbunden und liefert Blut in den dorsalen Hippocampus und dorsalen Thalamus Netzwerk. Wegziehen kaudal und allmählich frei die supracollicular Netzwerk bis zum Erreichen der letzten Teile der Schwanzflosse arteriellen Kreis Gefäßsystem. An diesem Punkt muß mehr darauf geachtet werden, alle verbleibenden hinteren ventralen MAV auf der Oberfläche des körnigen retrosplenialen, primären akustischen und visuellen Kortex zu entfernen. Wie bei dem anderen Abschnitt des MAV Abdecken der mehreren vorderen Teile des Cortex, kann dieses Gewebe entweder temporär beibehalten werden in eiskalter Kochsalzlösung bis zur Prüfung und Analyse eingefroren oder für eine spätere Verarbeitung. Ein verbleibender hinteren ventralen MAV mit diesem zweiten MAV Abschnitt geerntet sollte ein entfernt werdend hinzugefügt, um die erste seziert MAV Abschnitt über die Hirnrinde, wenn sie getrennt analysiert werden. </li></ol> 5. Repräsentative Ergebnisse Wenn die Dissektion korrekt ausgeführt wird, sollten die resultierenden MAV Geweben in zwei intakten Entitäten Wiegen etwa 35 bis 45 mg insgesamt sein. Die zunächst seziert MAV Umgebung die meisten der Cortex sollte etwa 25 mg und der MAV für den Thalamus wiegen, sollten colliculi und okzipitalen Kortex wiegen etwa 15 mg. Es sollte leicht rosa in der Farbe von der Restblut im Gefäßsystem. Die bilaterale Plexus choroideus geernteten sollte in zwei intakten Gewebeproben mit jedem Wägevorgang 1 bis 2 mg liegen. Obwohl überschüssiges Wasser aus dem MAV entfernt werden vor der Lagerung oder Verarbeitung mit einem Papiertaschentuch, wie sie in der Linse Reinigung verwendet, um Gewebe zu vermeiden ist es nicht eine gute Idee, um überschüssiges Wasser aus dem seziert Plexus zu entfernen. Abbildung 1 wurde für generierte Vergleichen der Expression profil<html> es in drei Regionen (Striatum, parietalen Kortex und MAV) unter kontrollierten Bedingungen mit Agilent-014.879 Whole Rat Genome 4x44K 60mer Oligonukleotid-Arrays (G4131F, Agilent Technologies, Palo Alto, CA; NCBI GEO Accession # GPL7294; GSE23093 und GSE29733, die anwesend sind, der NCBI GEO-Repository). Die beiden Kurven in der Figur zeigen die Expression bildlich in 1) das Striatum des parietalen Kortex verglichen und 2) der MAV der Parietalkortex verglichen. Es ist klar, dass das Striatum und Parietalkortex viel enger beieinander liegen als der MAV verwandt sind. Die Daten Vergleich der Plexus mit der MAV wird in einer zukünftigen Veröffentlichung vorgelegt. Jedoch ist es wahrscheinlich, dass die Profile in der Expression und MAV Plexus choroideus näher aneinander als sie an das Striatum und Parietalkortex sind verwandt. Abbildung 2 zeigt die differentielle Genexpression als Reaktion auf Hyperthermie (EIH) versus AMPH im Vergleich MAV zu kontrollieren und zu einander. Inhalt &quot;&gt; Die Genexpression von mehr als 11.000 Gene, die mit offiziellen NCBI-Gen Symbole in MAV von Kontrolltieren wurde die im Striatum und parietalen Kortex aufgenommen verglichen. Über 2000 dieser Gene hatten ein 2,5-fach oder mehr unterschiedlichen Ausdruck in der MAV im Vergleich zu den zwei neuronale-reiche Gewebe und 550 Gene hatte eine 10-fach größere Differenz in Ausdruck. Etwas mehr als 40% (253) von diesen waren Gene mit einer verringerten Expression von 10-fach oder mehr in MAV und wurden bzgl. neuronale Funktion. Es gab 343 Genen mit über eine 10-fache oder größer Expression in MAV gegenüber Parietalkortex und Striatum. Diese Liste von Genen als Startpunkt, mit denen wurde verwendet, um Gene mit einer sehr hohen Anreicherung im MAV bestimmen. Tabelle 1 listet die Gene mit mehr als 15-fach, um die Expression in MAV Parietalkortex und Striatum verglichen und kategorisiert sie hinsichtlich Funktion. Viele dieser Gene an das vaskuläre System und / oder das Immunsystem verwandt waren. Diese Types von Genen sollte etwa 5 angereichert werden - bis 10 - fach bis wegen der erhöhten Vaskulatur selbst und Blut darin. Aber auch für Gene mit bekannten allgemeinen vaskulären Funktionen, eine Erhöhung über 15-fach zeigt Anreicherung in MAV. Es gab auch Anzahlen von Genen, die mit sehr großer fach Veränderungen waren: 1) Proteine ​​der extrazellulären Matrix (nicht spezifisch an Vaskulatur Verwandte), 2) gelösten Transportern und 3) Lipid und Retinsäuremetabolismus. Wie gut, einige Wachstum und Differenzierung Gen oder Transkriptionsfaktoren gefunden. <img alt="Abbildung 1" src="/files/ftp_upload/4285/4285fig1.jpg" /> Abbildung 1. Vergleich der Genexpression in MAV mit parietalen Kortex und Striatum. Volcano Plot Vergleich der Genexpression des parietalen Kortex und Striatum (oben plot) und dem parietalen Kortex und MAV (unten Plot). Die roten Symbole bezeichnen die Gene, die signifikant betwe sinden Regionen p &lt;0,05 und eine 1,5-fache oder mehr unterschiedliche Expression zwischen den Regionen. Die schwarzen Symbole repräsentieren Gene, die nicht wesentlich zwischen den Regionen unterscheiden (p&gt; 0,05) und weniger als das 1,5-fache, die sich in Ausdruck. Die rosa Symbole zeigen Gene mit weniger als einer 1,5-fachen Unterschied in der Expression, aber statistisch signifikant bei p &lt;0,05. Die gelben Symbole Identifizierung von Genen, die eine 1,5-fache oder mehr Ausdruck haben, aber diese Änderung ist nicht statistisch signifikant bei p &lt;0,05. Abkürzungen AMPH Amphetamin EIH umwelt-induzierte Hyperthermie MAV Hirnhäute und zugehörige zerebrale Gefäßsystem Norm normothermen steuert <img alt="Abbildung 2" src="/files/ftp_upload/4285/4285fig2.jpg" /> Abbildung 2. Auswirkungen der Hyperthermie und Amphetamin auf die Genexpression in MAV. Volcano Parzellen verglichenGenexpressionsniveaus im MAV nach Kochsalzlösung, EIH oder AMPH an der 3 hr Zeitpunkt. Die roten Symbole deuten die Gene, die als nicht signifikant unterschiedlich, während die schwarzen Punkte / Kreise Genen, die nicht signifikant zwischen Regionen unterscheiden repräsentieren. Zusätzliche statistische Analyse wurde verwendet, um zu überprüfen, welche die Expression Unterschiede zwischen der Kontrolle und Behandlung in der Tat statistisch signifikant waren. <table border="1"><tbody><tr><td fo:width="1in"> MAV Expression Gehirn Expression </td><td fo:width="4.5in"> NCBI Gene Symbole </td><td fo:width="1.5in"> Tissue Spezifität oder gemeldet Funktion (en) </td></tr><tr><td> &gt; 50-fach </td><td> ANXA2 a, Col8a1, Des, ESM1, Glycam1, Kl a, Lect1, LEPR, Lum, MYH11, Ogn, Tagln, Thbs2, TNNT2 </td><td> Gefäßsystem &amp; Heart </td></tr><tr><td> &gt; 50-fach </td><td> CCL19, CD74 a, Defb1, Lrrc21, MGL1, Mrc1, Msln, Pla2g5, PRG4, RT1-Bb, RT1-Da </td><td> Immune System </td></tr><tr><td> &gt; 50-fach </td><td> Adh1, Aebp1, Aldh1a2, GSTM2 </td><td> Retinsäure &amp; Lipid-Verarbeitung </td></tr><tr><td> &gt; 50-fach </td><td> Cdh1, COL3A1, COL1A2, Colec12, Cpxm2, CPZ, DCN, Emp3, GPC3, Nupr1, OMD, Pcolce Slamf9, Tmem27, TSPAN8 </td><td> Extrazellulären Matrix &amp; Zell-Zell-Verbindungen </td></tr><tr><td> &gt; 50-fach </td><td> AQP1, Asgr1, Kcnj13, Slc5a5, Slc6a13, Slc6a20, Slc22a6, Sned1, Ttr </td><td> Ion &amp; Solute Homöostase </td></tr><tr><td> &gt; 50-fach </td><td> AlX3, CDKN1C, FOXC2, IGFBP2, Ifitm1, Ifitm2, Nkx6-1, OSR1, Prrx2, sFRP1, TBX15. Upk1b, Wisp2, Wnt6 </td><td> Development &amp; Transcription Verordnung </td></tr><tr><td> &gt; 50-fach </td><td> Gpha2, Mfap5, Mpzl2 Plac8, Scgb1c1, Sostdc1, Steap1 </td><td> Unknown &amp; Sonstiges </td></tr><tr><td> 30 bis 50-fache </td&gt; <td> ANXA1 a, Angpt2, C6 a, GJB2, Ptgis, Thbd, TIMP1 </td><td> Gefäßsystem &amp; Heart </td></tr><tr><td> 30 bis 50-fache </td><td> Casp12, CCL2, Ccr1, CD14, CXCL10 Ifitm3, Klra5, LGALS1, LGALS3, Ms4a4a, Ms4a7, Plscr1, SPP1, XCL1 </td><td> Immune System </td></tr><tr><td> 30 bis 50-fache </td><td> Col6a3, Cpxm1, EFEMP1, Fmod, MGP, NID2 </td><td> Extrazellulären Matrix &amp; Zell-Zell-Verbindungen </td></tr><tr><td> 30 bis 50-fache </td><td> Cp, CUBN, GCGR, S100A6, Scn7a, Sct, Slc4a5, Slc16a11, Slco1a5 </td><td> Ion &amp; Solute Homöostase </td></tr><tr><td> 30 bis 50-fache </td><td> Cfd, CH25H, CRABP2, Rarres2 </td><td> Retinsäure &amp; Lipid-Verarbeitung </td></tr><tr><td> 30 bis 50-fache </td><td> BMP6, Casp12, DAB2 Folr1, Igf2, Msx1, Tbx18, TWIST1, Wnt5b </td><td> Development &amp; Transcription Verordnung </td></tr><tr><td> 30 bis 50-fache </td><td> Cela3b, CLN6, C1qtnf7, Copz2, Dhrs7c, Gng11, Prss23, Srpx, Vim </td><td> Unknown &amp; Sonstiges </td></tr><tr><td> 15 bis 30-fache </td><td> Adm, Angpt1, Angptl2, BGN, Cklf a, CNN1, Cox8h, Ctsk, F13a1, GJA5, Klf4, Lox, Lyz, Myl9, Procr, PROS1, RT1-Ba, Serpinb10, SERPING1, Serpinf1, Tgm2, Tnmd, Trim63, Txnip a, Vamp5, Vtn </td><td> Gefäßsystem &amp; Heart </td></tr><tr><td> 15 bis 30-fache </td><td> Ada a, BST2, Ccl6, CD40, CD68, CTSC, Dap, Faim3, Fkbp9, Fxyd5, FMO1, GLIPR1, IER3, Ifi47, Igsf6, Msc, Nfatc4, RT1-Db1, Serpinb1a, TiR4, Tubb6 </td><td> Immune System </td></tr><tr><td> 15 bis 30-fache </td><td> Adamtsl4, COL1A1, Crb3, Dpt, Egfl3, FBN1, Fbln1, FBLN5, Fn1, ITGB4, Lama2, Lgals3bp, Loxl1, Mfap4, MMP14, Mmp23, PPIC, SERPINH1, TIMP3 </td><td> Extrazellulären Matrix &amp; Zell-Zell-Verbindungen </td></tr><tr><td> 15 bis 30-fache </td><td> Cybrd1, Selenbp1, SLC2A4, Slc9a2, Slc13a3, Slc16a4, Slc22a8, Slc22a18 </td><td> Ion &amp; Solute Homöostase </td></tr><tr><td> 15 bis 30-fache </td><td> AGPAT2, Bdh2, CYP26B1, Lpar3, Ltb4dh, Olr1, PON3, RBP1, RBP4 </td><td> Retinsäure &amp; Lipid-Verarbeitung </td></tr><tr><td> 15 bis 30-fache </td><td> ATF3, DKK4, Eya2, Ifitm7, LTBP1, Mustn1, Nr2f2, PTRF, SphK1, TGFBI, Tcea3 Tcfap2b, Wnt2b, Wnt5a, ZIC1 </td><td> Development &amp; Transcription Verordnung </td></tr><tr><td> 15 bis 30-fache </td><td> Adamts12, Adamtsl3, C1r, Crispld2, Crygn, CYP1B1, DSE, Enpep, Enpp2, Epn3, FLNA, FMO3, GNMT, Gprc5c, HSPB1, Klc3, KRT18, Krt19, MDK, Mesp1, Ms4a6a, Ms4a6b, Ms4a11, Net1, Pdlim2, Phactr2, PLP2, Ppp1r3b, Pqlc3, RIN3, Spag11, SULT1A1, Tmem106a, Wfikkn2 </td><td> Unknown &amp; Sonstiges </td></tr></tbody></table> * Genes in der Tabelle enthalten sind sowohl mehr als 15-fach über Expression im Striatum und Pariet seinal Cortex und 5-fach über dem Hintergrund Ebenen. Das untere der beiden Verhältnissen (MAV / Striatum oder MAV / parietalen Cortex) für jedes Gen wurde für die Gruppierung verwendet. a Gene werden in Endothelzellen gefunden, aber auch wahrscheinlich eine wichtige Rolle bei der Vermittlung Immunantworten. Tabelle 1. Genes mit einem 15-fach * oder mehr erhöhte Expression in MAV im Vergleich zum Striatum und parietalen Kortex.

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E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflicted+traumatic+brain+injury+in+infants+and+young+children.">Inflicted traumatic brain injury in infants and young children.</a> Brain Pathol. 18, 571-582 (2008).</li><li>Maas, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+value+of+computerized+tomography+scan+characteristics+in+traumatic+brain+injury:+results+from+the+IMPACT+study.">Prognostic value of computerized tomography scan characteristics in traumatic brain injury: results from the IMPACT study.</a> J. Neurotrauma. 24, 303-314 (2007).</li></ol>

Wir haben nichts zu offenbaren. Die hier vorgestellte Arbeit kann nicht notwendigerweise die Meinung der Food and Drug Administration.

Technische Aspekte der MAV und Plexus Dissektion Es ist kritisch, während der Dissektion der MAV, damit das Gehirn &quot;eingetaucht&quot; die meiste Zeit in dem normalen Kochsalzlösung oder Natriumphosphat-gepufferte Kochsalzlösung. So dass die MAV und Kortex beim Präparieren austrocknen wird in der MAV Einhaltung eng an Rindenschicht I. Dies die Menge des kortikalen Gewebes mit der MAV und / oder das Ergebnis in der Unfähigkeit, diese Einhaltung MAV Abschnitte aus der Rinde zu entfernen geerntet erhöhen führen. Außerdem ist Geduld erforderlich beim Präparieren. Noch einmal, wenn begegnet man gewissen Widerstand beim Entfernen des MAV vom Kortex in einer Hemisphäre beim Präparieren, auf die andere Halbkugel umzuschalten und gehen später wieder zu der Seite, wo Widerstand angetroffen wurde. Diese Methode dauert einige Übung, um perfekte und erfordert etwa 5 bis 15 &quot;Praxis&quot; Dissektionen, bevor eine konsequent einheitliche Ernte von MAV Gewebe erreicht. Das Verfahren zum Starten der Dissektion und removal des MAV am arteriellen Kreis an der Unterseite des Gehirns erleichtert die Entfernung der Hirnhaut mit dem größeren Gefäßsystem als Träger &quot;Gerüst&quot;. Ein Großteil des ursprünglich im Blut MAV Gefäßsystems nach der Tötung sollte während der Dissektion ausgestoßen werden, und weniger als 5% der RNA aus MAV geerntet sollte von Blut Ursprungs sein. Es ist möglich, fast alles Blut durch Perfusion des Tieres mit 50 bis 70 ml Kochsalzlösung, mittels histologischer Techniken, vor Dekapitation und Gehirn Entfernung zu entfernen. Allerdings ist es dann wesentlich schwieriger, die MAV Geweben beim Präparieren visualisieren. Die drei wahrscheinlichsten Quellen von &quot;Verunreinigung&quot; der MAV Gewebe sind die Zirbeldrüse, kortikale Schicht I Gewebe und restliches Riechkolben Gewebe aber es ist auch möglich, Hypophyse Gewebe bei der Herstellung zu erhalten. Pineal Kontamination in der MAV erhält MAV enthaltend ein rund 1 bis 2 mm Durchmesser, die farbige Kugel dunkelrot ist nachgewiesen. Die primäre Funktionder Zirbeldrüse wird normalerweise als völlig verschieden von der MAV. Seine primäre Funktion ist es, Melatonin, das Aspekte des zirkadianen Rhythmus 9 regelt, und in Lipoxygenierung 10 von Lipidvorstufen produzieren. Obwohl das Gen Lox, die Lipoxygenase-Aktivität reguliert, wurde angenommen, dass in erster Linie im Erwachsenen Zirbeldrüse 10 zeigen unsere Ergebnisse, dass es auch konsequent anwesend signifikante Niveaus in MAV. Restliches kortikalem oder Riechkolben Kontamination Ergebnisse im pinkish stegartige MAV Gewebe mit etwa 1 bis 2 mm dichteren Geweben, die viel heller in der Farbe in ihr eingeschlossen sind. Dies kann durch &quot;schwimmt&quot; der MAV auf der Oberfläche des Puffers, und dann Entfernen der schwereren kortikalen oder Birne Geweben unter Verwendung der beiden Dissektionszange gesichtet werden. Bei Verunreinigungen des MAV aus Rindenschicht Ich Gewebe, Hypothalamus Gewebe oder die Zirbeldrüse vorhanden ist, dann mehrere Gene haben eine signifikantdeutlich mehr Ausdruck als das, was normalerweise in einem &quot;sauberen&quot; dissection vorhanden. Kontamination des MAV mit Zirbeldrüse wird höhere Expression Arylalkylamin-N-acetyltransferase (AANAT), die für Melatoninsynthese ist resultieren. Leider wenn pineal Verunreinigung tritt während MAV Dissektion, werden die Niveaus der Lox in MAV möglicherweise nicht genau bestimmt werden. Kontamination des MAV mit kortikalen Gewebe wird höhere Expression von Neuron-spezifische Gene wie hippocalcin (HPCA), Parvalbumin (Pvalb) und / oder neuronalen Pentraxin Rezeptor (Nptxr) führen. Kontamination MAV mit hypothalamischen Gewebe wird im höheren Expression des Wachstumshormons 1 (GH1), Proopiomelanocortin (POMC) führen. Für den Fall, dass einige Verunreinigungen existiert in den geernteten Geweben können die meisten dieser Gene identifiziert und nicht in Genexpressionsanalyse verwendet. Dies ist besonders wichtig für Gene, die in der zirkulierenden blood, die noch vorhanden sein können, in MAV oder der Aderhaut Plexus. Interpretting Genexpression Daten aus geernteten MAV und Plexus Der zerebrale Oberfläche (oberflächlich) Gefäßsystem zusammen mit den zugehörigen Hirnhäute (MAV) und der Plexus sind notwendig für die zerebrale Durchblutung und Liquor (CSF) Homöostase 4,11, 12, 13, 14, 15, 16, 17. Das Gewebe Ernte ist geeignet für biochemische und physiologische Untersuchungen, und der MAV wurde gezeigt, dass sie empfindlich gegen Beschädigungen durch Amphetamin und Hyperthermie 1,2 durch Genexpressionsanalyse hergestellt. Diese Ergebnisse sind angemessen mit dem, was auch über schwere Hyperthermie und Exposition gegenüber Amphetaminen an das Gehirn Gefäßsystem im Allgemeinen 18,19,20 bekannt. Menschliche klinische Daten stützen die Überzeugung, dass die subduralen Gefäßsystem empfindlich auf durch Amphetamin und Methamphetamin 21,22 beschädigen. Wie gut, darunter die großen und kleinen zerebralen BlutgefäßverteilungenING die in der Pia-Schicht der Hirnhäute, die in MAV geerntet werden, sind potenziell hohes Interesse bei der Untersuchung concussive Arten von Kopfverletzungen 23,24 25. Die aktuelle Genexpressionsprofil ergab aus der MAV bedeutet, dass der Pia und möglicherweise die Arachnoidea Meningen kann eine größere Rolle als bei der Regulierung CSF Zusammensetzung erwartet spielen. In der Zukunft durch die Verwendung von Techniken Präpariermikroskop, kann es möglich sein, eine weitere Aufteilung der Gewebe umfassend den MAV so dass die pialen und Arachnoidea Membranen vom größeren arteriellen Gefäßsystem vorliegenden und ggf. voneinander getrennt werden können. Dies ermöglicht eine bessere Interpretation der Funktion eines jeden dieser drei Bestandteile des geernteten MAV.

<table border="1"><tbody><tr><td> Name des Reagenz / Ausrüstung </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Kommentare (optional) </td></tr><tr><td> Normale Kochsalzlösung (9 g Kochsalz / 1 Liter H 2 O) </td><td> Im Hause </td><td></td><td> Dissection-Puffer </td></tr><tr><td> 0,1 M Natriumphosphat pH 7,4 </td><td> Im Hause </td><td></td><td> Dissection-Puffer </td></tr><tr><td> Bone Rongeurs </td><td> Roboz </td><td> RS-8300 </td><td> Schädelknochen entfernt </td></tr><tr><td> Zange gebogenen Spitze (4 &quot;lang &amp; 0,8 mm breite Spitze) </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 oder RS-5137 </td><td> Präparierzange </td></tr><tr><td> Pinzetten-gerade Spitze (5,5 &quot;lang) </td><td> Roboz </td><td> RS-8124 oder RS-8104 </td><td> Thumb Kornzangen </td></tr></tbody></table>

a visual description of the dissection of the cerebral surface vasculature and associated meninges and the choroid plexus from rat brain

Diese Video-Präsentation wurde geschaffen, um eine Methode der Ernte die beiden wichtigsten stark vaskulären Strukturen zu zeigen, die ihren Wohnsitz nicht im Gehirn richtig, dass die Unterstützung Vorderhirn Funktion. Sie sind die Hirnoberfläche (oberflächliche) Gefäßsystem zusammen mit den zugehörigen Hirnhäute (MAV) und der Plexus, die notwendig für die zerebrale Durchblutung und Liquor (CSF) Homöostase sind. Das Gewebe geerntet ist für biochemische und physiologische Untersuchungen, und der MAV wurde gezeigt, dass sie empfindlich gegen Beschädigungen durch Amphetamin und Hyperthermie 1,2 hergestellt. Wie gut, sind die großen und kleinen zerebralen Blutgefäßverteilungen in MAV geerntet potenziell hohes Interesse bei der Untersuchung concussive Arten von Kopfverletzungen. Die MAV in dieser Präsentation seziert besteht aus der Pia-und einige der Arachnoidea (weniger Dura) der Hirnhaut und der großen und kleinen Hirnoberfläche Gefäßsystem. Der Plexus choroideus seziert ist die Struktur, in der l liegtateral Ventrikel von Oldfield und McKinley 3,4,5,6 beschrieben. Die Verfahren zum Ernten diese beiden Geweben verwendet erleichtern auch die Ernte von regionalen kortikalen Gewebe frei von Hirnhaut und größere Oberfläche zerebrale Gefäßsystem und ist kompatibel mit anderen Ernten Hirngewebe wie Striatum, Hypothalamus, Hippocampus, etc. Die Dissektion von den zwei Geweben dauert 5 bis 10 min insgesamt. Die Genexpressionsniveaus zur seziert MAV und Plexus choroideus, wie gezeigt und beschrieben in dieser Darstellung kann bei GSE23093 (MAV) und GSE29733 (Plexus choroideus) am NCBI GEO Repository. Diese Daten wurden, und wird verwendet, um weitere Verständnis der Funktionsweise des MAV und Plexus choroideus und wie neurotoxischen Ereignisse wie schwere Hyperthermie und AMPH beeinträchtigen ihre Funktion.

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A Visual Description of the Dissection of the Cerebral Surface Vasculature and Associated Meninges and the Choroid Plexus from Rat Brain

Diese Video-Präsentation zeigt ein Verfahren zur Ernte der beiden wichtigsten stark vaskuläre Strukturen, die Vorderhirn Funktion unterstützen. Sie sind die Hirnoberfläche (oberflächliche) Gefäßsystem zusammen mit den zugehörigen Hirnhäute (MAV) und der Plexus, die notwendig für die zerebrale Durchblutung und Liquor (CSF) Homöostase sind.

Ein Visual Beschreibung der Dissektion der Hirnoberfläche Gefäßsystem und assoziierten Hirnhäute und der Aderhaut Plexus aus Rattenhirn

This video presentation was created to show a method of harvesting the two most important highly vascular structures, not residing within the brain ...

a-visual-description-dissection-cerebral-surface-vasculature

Research

JoVE Journal

Neuroscience

47.9K Aufrufe.  National Center for Toxicological Research. Diese Video-Präsentation zeigt ein Verfahren zur Ernte der beiden wichtigsten stark vaskuläre Strukturen, die Vorderhirn Funktion unterstützen. Sie sind die Hirnoberfläche (oberflächliche) Gefäßsystem zusammen mit den zugehörigen Hirnhäute (MAV) und der Plexus, die notwendig für die zerebrale Durchblutung und Liquor (CSF) Homöostase sind.

Serie: A Visual Description of the Dissection of the Cerebral Surface Vasculature and Associated Meninges and the Choroid Plexus from Rat Brain

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable clinical state; in the development of animal models of focal ischemia, however, achieving reproducibility of experimentally induced infarct volume is essential. The rat is a widely used animal model for stroke due to its relatively low animal husbandry costs and to the similarity of its cranial circulation to that of humans2,3. In humans, the middle cerebral artery (MCA) is most commonly affected in stroke syndromes and multiple methods of MCA occlusion (MCAO) have been described to mimic this clinical syndrome in animal models. Because recanalization commonly occurs following an acute stroke in the human, reperfusion after a period of occlusion has been included in many of these models. In this video, we demonstrate the transient endovascular suture MCAO model in the spontaneously hypertensive rat (SHR). A filament with a silicon tip coating is placed intraluminally at the MCA origin for 60 minutes, followed by reperfusion. Note that the optimal occlusion period may vary in other rat strains, such as Wistar or Sprague-Dawley. Several behavioral indicators of stroke in the rat are shown. Focal ischemia is confirmed using T2-weighted magnetic resonance images and by staining brain sections with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) 24 hours after MCAO.

Surgical induction of ischemic brain damage in the rat is a widely used model for stroke research. Here we demonstrate the induction of focal cerebral ischemia by occlusion of the middle cerebral artery. Visualization of the resulting infarct by histological staining and magnetic resonance imaging is also shown.

Fokaler zerebraler Ischämie-Modell von Endovascular Suture Verschluss der mittleren Hirnarterie im Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

Forschung

Neurowissenschaften

Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to monitor the disease course in the follow-up period. Changes in the VEP parameters closely correlate with pathological damage in the optic nerve. This protocol provides a detailed description about the rodent model of optic nerve microinjection, in which a partial demyelination lesion is produced in the optic nerve. VEP recording techniques are also discussed. Using skull implanted electrodes, we are able to acquire reproducible intra-session and between-session VEP traces. VEPs can be recorded on individual animals over a period of time to assess the functional changes in the optic nerve longitudinally. The optic nerve demyelination model, in conjunction with the VEP recording protocol, provides a tool to investigate the disease processes associated with demyelination and remyelination, and can potentially be employed to evaluate the effects of new remyelinating drugs or neuroprotective therapies.

Focal demyelination is induced in the optic nerve using lysolecithin microinjection. Visual evoked potentials are recorded via skull electrodes implanted over the visual cortex to examine the signal conduction along the visual pathway in vivo. This protocol details the surgical procedures underlying electrode implantation and optic nerve microinjection.

Visuell evozierten Potential-Aufnahme in einem Rattenmodell für Experimentelle Optic Nerve Demyelinisierung

The visual evoked potential (VEP) recording is widely used in clinical practice to assess the severity of optic neuritis in its acute phase, and to ...

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

The choroid plexus is located in the ventricular wall of the brain, the main function of which is believed to be production of cerebrospinal fluid. Choroid plexus epithelial cells (CPECs) covering the surface of choroid plexus tissue harbor multiple unique cilia, but most of the functions of these cilia remain to be investigated. To uncover the function of CPEC cilia with particular reference to their motility, an ex vivo observation system was developed to monitor ciliary motility during embryonic, perinatal and postnatal periods. The choroid plexus was dissected out of the brain ventricle and observed under a video-enhanced contrast microscope equipped with differential interference contrast optics. Under this condition, a simple and quantitative method was developed to analyze the motile profiles of CPEC cilia for several hours ex vivo. Next, the morphological changes of cilia during development were observed by scanning electron microscopy to elucidate the relationship between the morphological maturity of cilia and motility. Interestingly, this method could delineate changes in the number and length of cilia, which peaked at postnatal day (P) 2, while the beating frequency reached a maximum at P10, followed by abrupt cessation at P14. These techniques will enable elucidation of the functions of cilia in various tissues. While related techniques have been published in a previous report1, the current study focuses on detailed techniques to observe the motility and morphology of CPEC cilia ex vivo.

Observation of the Ciliary Movement of Choroid Plexus Epithelial Cells Ex Vivo

In this study, a detailed light microscopic technique was optimized for real-time observation and analysis of the motion of CPEC cilia ex vivo together with an electron microscopic method for ultrastructural analysis.

Beobachtung der Flimmerbewegung von Plexus Epithelzellen<em&gt; Ex Vivo</em

The choroid plexus is located in the ventricular wall of the brain, the main function of which is believed to be production of cerebrospinal fluid. ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful analysis of synaptic transmission modulation when performing field potential or intracellular recordings. This manuscript describes methodological aspects that might be helpful in improving experimental conditions for the maintenance of acute brain slices and for recording field excitatory postsynaptic potentials in a commercially available submersion chamber with an outflow-carbogenation unit. The outflow-carbogenation helps to stabilize the oxygen level in experiments that rely on the recycling of a small buffer reservoir to enhance the cost-efficiency of drug experiments. In addition, the manuscript presents representative experiments that examine the effects of different carbogenation modes and stimulation paradigms on the activity-dependent synaptic plasticity of synaptic transmission.

This protocol describes the stabilization of the oxygen level in a small volume of recycled buffer and methodological aspects of recording activity-dependent synaptic plasticity in submerged acute hippocampal slices.

Aufnahme synaptische Plastizität in akuten Hippocampal Scheiben gepflegt in einem kleinvolumigen Recycling - Perfusions- und untertauchen-Typ-Kammer-System

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Live Imaging of Primary Cerebral Cortex Cells Using a 2D Culture System

During cerebral cortex development, progenitor cells undergo several rounds of symmetric and asymmetric cell divisions to generate new progenitors or postmitotic neurons. Later, some progenitors switch to a gliogenic fate, adding to the astrocyte and oligodendrocyte populations. Using time-lapse video-microscopy of primary cerebral cortex cell cultures, it is possible to study the cellular and molecular mechanisms controlling the mode of cell division and cell cycle parameters of progenitor cells. Similarly, the fate of postmitotic cells can be examined using cell-specific fluorescent reporter proteins or post-imaging immunocytochemistry. More importantly, all these features can be analyzed at the single-cell level, allowing the identification of progenitors committed to the generation of specific cell types. Manipulation of gene expression can also be performed using viral-mediated transfection, allowing the study of cell-autonomous and non-cell-autonomous phenomena. Finally, the use of fusion fluorescent proteins allows the study of symmetric and asymmetric distribution of selected proteins during division and the correlation with daughter cells fate. Here, we describe the time-lapse video-microscopy method to image primary cerebral cortex murine cells for up to several days and analyze the mode of cell division, cell cycle length and fate of newly generated cells. We also describe a simple method to transfect progenitor cells, which can be applied to manipulate genes of interest or simply label cells with reporter proteins.

Live imaging is a powerful tool to study cellular behaviors in real time. Here, we describe a protocol for time-lapse video-microscopy of primary cerebral cortex cells that allows a detailed examination of the phases enacted during the lineage progression from primary neural stem cells to differentiated neurons and glia.

Bildgebung des primären Hirnrinde Zellen unter Verwendung einer 2D Kultursystem zu leben

During cerebral cortex development, progenitor cells undergo several rounds of symmetric and asymmetric cell divisions to generate new progenitors or ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor determining patient outcome and is therefore frequently taken as a study endpoint. However, in small animal studies on SAH, quantification of cerebral vasospasm is a major challenge. Here, an ex vivo method is presented that allows quantification of volumes of entire vessel segments, which can be used as an objective measure to quantify cerebral vasospasm. In a first step, endovascular casting of the cerebral vasculature is performed using a radiopaque casting agent. Then, cross-sectional imaging data are acquired by micro computed tomography. The final step involves 3-dimensional reconstruction of the virtual vascular tree, followed by an algorithm to calculate center lines and volumes of the selected vessel segments. The method resulted in a highly accurate virtual reconstruction of the cerebrovascular tree shown by a diameter-based comparison of anatomical samples with their virtual reconstructions. Compared with vessel diameters alone, the vessel volumes highlight the differences between vasospastic and non-vasospastic vessels shown in a series of SAH and sham-operated mice.

The goal of this article is to present a method that allows a 3-dimensional reconstruction of the cerebrovascular tree in mice after micro computed tomography and determination of volumes of entire vessel segments that can be used to quantify cerebral vasospasm in murine models of subarachnoid hemorrhage.

Eine Volumetrische Methode zur Quantifizierung der zerebralen Vasospasmus in einem Mausmodell der Subarachnoidalblutung

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral vascular effects. Impact (i.e., non-blast) traumatic brain injury (TBI) is known to decrease pressure autoregulation in the cerebral vasculature in both humans and experimental animals. The hypothesis that blast-induced traumatic brain injury (bTBI), like impact TBI, results in impaired cerebral vascular reactivity was tested by measuring myogenic dilatory responses to reduced intravascular pressure in rodent middle cerebral arterial (MCA) segments from rats subjected to mild bTBI using an Advanced Blast Simulator (ABS) shock tube. Adult, male Sprague-Dawley rats were anesthetized, intubated, ventilated and prepared for Sham bTBI (identical manipulation and anesthesia except for blast injury) or mild bTBI. Rats were randomly assigned to receive Sham bTBI or mild bTBI followed by sacrifice 30 or 60 min post-injury. Immediately after bTBI, righting reflex (RR) suppression times were assessed, euthanasia at the time points post-injury was completed, the brain was harvested and the individual MCA segments were collected, mounted and pressurized. As the intraluminal pressure perfused through the arterial segments was reduced in 20 mmHg increments from 100 to 20 mmHg, MCA diameters were measured and recorded. With decreasing intraluminal pressure, MCA diameters steadily increased significantly above baseline in the Sham bTBI groups while MCA dilator responses were significantly reduced (p &#60; 0.05) in both bTBI groups as evidenced by the impaired, smaller MCA diameters recorded for the bTBI groups. In addition, RR suppression in the bTBI groups was significantly (p &#60; 0.05) higher than in the Sham bTBI groups. MCA&#39;s collected from the Sham bTBI groups exhibited typical vasodilatory properties to decreases in intraluminal pressure while MCA&#39;s collected following bTBI exhibited significantly impaired myogenic vasodilatory responses to reduced pressure that persisted for at least 60 min after bTBI.

Here, we present a protocol to describe methods for ex vivo vascular reactivity determination following a primary blast traumatic brain injury (bTBI) using isolated, pressurized, rodent middle cerebral arterial (MCA) segments. bTBI induction is accomplished using a shock tube, also known as an Advanced Blast Simulator (ABS) device.

Auswirkungen der Explosion-induzierte Neurotrauma auf Druck Nagetier mittlerer Hirnarterien

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Intra-Arterial Delivery of Neural Stem Cells to the Rat and Mouse Brain: Application to Cerebral Ischemia

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to intracranial delivery, intra-arterial administration of NSCs is less invasive and produces a more diffuse distribution of NSCs within the brain parenchyma. Further, intra-arterial delivery allows the first-pass effect in the brain circulation, lessening the potential for trapping of cells in peripheral organs, such as liver and spleen, a complication associated with peripheral injections. Here, we detail the methodology, in both mice and rats, for delivery of NSCs through the common carotid artery (mouse) or external carotid artery (rat) to the ipsilateral hemisphere after an ischemic stroke. Using GFP-labeled NSCs, we illustrate the widespread distribution achieved throughout the rodent ipsilateral hemisphere at 1 d, 1 week and 4 weeks after postischemic delivery, with a higher density in or near the ischemic injury site. In addition to long-term survival, we show evidence of differentiation of GFP-labeled cells at 4 weeks. The intra-arterial delivery approach described here for NSCs can also be used for administration of therapeutic compounds, and thus has broad applicability to varied CNS injury and disease models across multiple species.

A method for delivering neural stem cells, adaptable for injecting solutions or suspensions, through the common carotid artery (mouse) or external carotid artery (rat) after ischemic stroke is reported. Injected cells are distributed broadly throughout the brain parenchyma and can be detected up to 30 d after delivery.

Intra-arterielle Lieferung von neuronalen Stammzellen an das Ratten- und Maushirn: Anwendung auf zerebrale Ischämie

Neural stem cell (NSC) therapy is an emerging innovative treatment for stroke, traumatic brain injury and neurodegenerative disorders. As compared to ...

Measuring Post-Stroke Cerebral Edema, Infarct Zone and Blood-Brain Barrier Breakdown in a Single Set of Rodent Brain Samples

One of the most common causes of morbidity and mortality worldwide is ischemic stroke. Historically, an animal model used to stimulate ischemic stroke involves middle cerebral artery occlusion (MCAO). Infarct zone, brain edema and blood-brain barrier (BBB) breakdown are measured as parameters that reflect the extent of brain injury after MCAO. A significant limitation to this method is that these measurements are normally obtained in different rat brain samples, leading to ethical and financial burdens due to the large number of rats that need to be euthanized for an appropriate sample size. Here we present a method to accurately assess brain injury following MCAO by measuring infarct zone, brain edema and BBB permeability in the same set of rat brains. This novel technique provides a more efficient way to evaluate the pathophysiology of stroke.

This protocol describes a novel technique of measuring the three most important parameters of ischemic brain injury on the same set of rodent brain samples. Using only one brain sample is highly advantageous in terms of ethical and economic costs.

Messung des Abbaus von Hirnödem nach dem Schlaganfall, Infarktzone und Blut-Hirn-Barrierenabbau in einem einzigen Satz von Nagetier-Gehirnproben

One of the most common causes of morbidity and mortality worldwide is ischemic stroke. Historically, an animal model used to stimulate ischemic stroke ...

Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular systems, gastrointestinal systems, and nutrition, and the pig is increasingly being used as a large animal model in neuroscience. Furthermore, the pig is an accepted model to study neurodevelopment as it displays brain growth and development patterns similar to what occurs in humans. As a less common animal model in neuroscience, surgical and dissection procedures on pigs may not be as familiar or well-practiced among researchers. Therefore, a standardized visual protocol detailing consistent extraction and dissection methods may prove valuable for researchers working with the pig. The following video showcases a technique to remove the pig brain while keeping the cortex and brainstem intact and reviews methods to dissect several commonly investigated brain regions including the brainstem, cerebellum, midbrain, hippocampus, striatum, thalamus, and medial prefrontal cortex. The purpose of this video is to provide researchers with the tools and knowledge necessary to consistently perform a brain extraction and dissection on the four-week-old pig.

This protocol details the technique for removal of the pig brain in its entirety and dissection of several brain regions commonly studied in neuroscience.

Extraktion und Zerlegung des domestizierenden Schweinehirns

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...