The authors thank Mona Chambers, Geoffrey Hidalgo and Maurissa Two Two for their technical assistance. We also thank Dr. Earl White for amino acid analysis, Dr. Roger Simonds for analysis of pollen for pesticides, and Drs. Stanley S. Schneider, Vanessa Corby-Harris and Kirk Anderson for their reviews and discussion of earlier versions of the manuscript and many helpful suggestions.

1. Gewinnung von Bienenbrot AHB und EHB Kolonien <ol><li> Zeigen Pollenfallen auf Bienenvölker und sammeln Pollen. Schleifen Sie die Pollen zu einem feinen Pulver (ähnlich wie Pollen von Staubbeuteln Schuppen) mit einer Kaffeemühle. </li><li> Stellen Sie je von AHB und EHB 5 Kolonien in einem geschlossenen Flugbereich (EFA), so dass die Bienen Futter nur auf der Pollen zur Verfügung gestellt. Um Arbeitskräfte davon abzuhalten, zwischen EHB und AHB Kolonien zu vermeiden, teilen Sie die EFA in einzelne Abschnitte, so dass die Bienen nicht zwischen ihnen zu überqueren. Zeigen einzelnen EHB oder AHB Kolonien mit 3.500-4.000 Arbeiter-Bienen, Wachs-Kamm mit Honig, Nektar, unreifen Brut und leeren Kamm in jedem Abschnitt der EFA. HINWEIS: Die Kolonien nicht Pollen gespeichert haben, wenn festgestellt. Die Rate, dass Pollen gespeichert können ohne eine Verlegung Königin in den Kolonien erhöht werden. </li><li> Futtergrund Pollen, Kolonien, indem Sie ein Tablett mit dem Pollen in jedem Abschnitt der EFA. Verbreitung über 60 g Pollen auf jedem Boden, so dass foraging Bienen sammeln als corbicular Lasten und speichern Sie die Pollen in ihren Kolonien als Bienenbrot. Weiter bietet frischen Pollen auf jedem Boden täglich für 3 Wochen. </li><li> Siehe aus den europäischen Kolonien Europäischen Bienenbrei (EBB) und von Africanized Kolonien afrikanisiert Bienenbrei (ABB) Bienenbrei. </li></ol> 2. Feeding Bienen in Käfige <ol><li> Platz Rahmen versiegelt Arbeiterinnenbrut von AHB und EHB Kolonien in getrennten Käfigen Entstehung in einer Umwelt Zimmer 32 bis 34 ° C und 40% relativer Luftfeuchte eingestellt .. </li><li> Als die Arbeiter entstehen und sind ca. 24 Stunden alt, errichten 12 Plexiglas-Bioassay Käfigen (Abmessungen = 11,5 x 7,5 x 16,5 cm 3) und fügen Sie entweder 100 neu entstandenen EHB oder 100 neu entstandenen AHB Arbeitsbienen zu jedem Käfig. Legen Sie ein Teil der Kamm mit einer bekannten Anzahl von entweder EBB oder ABB-Zellen (24-30 Zellen pro Käfig) in jeden Käfig, um die folgenden Behandlungskombinationen erzeugen: AHB gefüttert ABB, EHB gefüttert ABB, AHB gefüttert EBB und EHB gefüttert EBB. (4 Behandlungen; 6Käfige pro Behandlung; 24 Käfige insgesamt). </li><li> In Fläschchen mit Wasser und 50% Honig und Wasser-Lösung auf das Volumen an jedem Käfig formuliert. Füllen Sie den Honig und Wasser Fläschchen täglich für die 11 Tage Studiendauer. </li></ol> 3. Probenahme Arbeitskraft-Bienen und Bienenbrot und Schätzung des Verbrauchs <ol><li> Probe 10 neu, bevor Sie sie in den Käfigen heraus EHB und AHB Arbeiter. Siehe diese als Tag 0 Bienen und sie als Grundlage für Hämolymphe Proteinkonzentrationen zu dienen. </li><li> Entfernen 10 Bienen aus jedem Käfig, nachdem sie auf EBB oder ABB für 4, 7 und 11 Tage gefüttert. </li><li> Legen Sie die lebenden Bienen in einzelnen Mikrozentrifugenröhrchen und setzen auf Eis Packs. Wählen Sie eine Teilstichprobe von vier Bienen für die Analyse der Hämolymphe Proteinkonzentration. </li><li> Nach der Probenahme Bienen auf Day-11, zählen die Anzahl der Wabenzellen, die noch Bienenbrei enthalten. Dies ist ein relatives Maß für beebread Verbrauch. </li><li> Das restliche Bienenbrei aus den Zellen in jedem Käfig und lagern in separaß Mikrozentrifugenröhrchen nach Käfig. Halten die beebread Proben bei -80 ° C bis zum pH-Wert lösliche Proteinkonzentration und Aminosäuregehalt analysiert. </li></ol> 4. Abschätzung pH-Wert von Pollen und Bienenbrot <ol><li> Nehmen Sie sechs Zufalls 0,3 g Proben der Pollen für die Bienen in der EFA zugeführt und löst ihn in 300 ul destilliertem Wasser. Messen Sie den pH mit einem wasserfesten Doppelkreuz pH Speer mit einer Genauigkeit von 0,01. </li><li> Nehmen Sie 0,3 g Probe von Bienenbrot, das nach dem 11-tägigen Fütterungsperiode in jedem Käfig blieb. Löse den beebread in 300 ul destilliertem Wasser und Messen pH wie Pollen (4.1) beschrieben. </li></ol> 5. Proteinanalytik <ol><li> Nehmen Sie sechs Proben der Pollen und eine Probe von EBB und ABB aus jedem Käfig. Proben bei -20 ° C bis zum löslichen Proteinkonzentration analysiert. </li><li> Mischungs 20 mg entweder Pollen oder Bienenbrot mit 1000 ul 0,1 M Phosphatpufferlösung (PBS). </li><li> VoRTEX der Mischung für 10 sec und Zentrifuge bei 571,2 × g für 1 min. </li><li> Entfernen einer 10 ul-Probe des Überstandes und in Vertiefungen einer 96-Well-Flachboden EIA / RIA Polystyrolplatte. Replizieren Sie alle Proben in drei Brunnen. </li><li> Zeichnen Hämolymphe von Bienen von jedem Käfig durch Einfügen einer 20 ul Kapillarrohr (die erhitzt und gezogen, um einen nadelscharfen Punkt worden war) in den rechten Seitenabschnitt des Thorax in der Nähe der Befestigungsstelle der Flügel aufgefangen. Sammeln zusätzlicher Hämolymphe, falls erforderlich, durch Einfügen des gleichen Rohres in der Membran zwischen den Bauch tergites. </li><li> 1 ul Hämolymphe zu 9 ul 0,1 M PBS. Bewahren Sie die Hämolymphe Lösung bei -20 ° C bis zur Analyse für lösliches Protein. </li><li> Bestimmen gesamten löslichen Protein-Konzentrationen im Pollen, Bienenbrot, und Hämolymphe Proben unter Verwendung eines kommerziellen Bradford-Test-Kit. Folgen Sie den Anweisungen des Herstellers. </li><li> Stellen Sie eine Standardkurve, um lösliches Protein c schätzenONZENTRATION in den Proben durch Messung der Proteinabsorption mit bekannten Proteinkonzentrationen in Rinderserumalbumin (BSA). Messen Sie Protein-Absorption bei 595 nm mit einem Spektralphotometer. </li></ol> 6. Aminosäureanalyse <ol><li> Pool Einzelproben aus Wabenzellen jeder Kolonie, um eine repräsentative Stichprobe von EBB und ABB für die Analyse zu schaffen. </li><li> Nehmen Sie eine 50 mg Pollen oder Bienenbrei Wägegut in Autosampler-Fläschchen, und fügen Sie 1 ml destilliertem Wasser in das Fläschchen, zusammen mit 100 ul einer 50 ng / ul interne Standardlösung, bestehend aus 4 d-Alanin, d 23 -lauric Säure, 13 C 6 -Glucose und d 39 -arachidiac Säure. </li><li> Verschließen Sie die Probe und für 5 min beschallen. </li><li> Bedingen einen HLB Patrone durch Zugabe von 1 ml Methanol gelöst, durch Zugabe von 1 ml destilliertem Wasser, gefolgt von der Zugabe von 1 ml der beebread oder Pollen Probe äquilibriert. Mit 1 ml von 5,0% MeOH / H 2 O und Elu waschen die Patronete mit 1 ml 80% MeOH / H 2 O. </li><li> Dampfe das wird bis zur Trockne unter einem Stickstoffstrom. Rekonstituieren Sie die Probe mit 50 ul Pyridin und 100 ul N, O-Bis (trimethylsilyl) trifluoracetamid + Trimethylchlorsilan (TMCS BSTFA +). </li><li> Cap und Inkubation der Probe bei 70 ° C für 30 min. </li><li> Lassen Sie die Probe abkühlen und überträgt es auf eine saubere Autosamplergefäß. </li><li> Kappe und legen Sie die Probe in einem massenselektiven Detektor angeschlossen, um einen Gaschromatographen, um die Proben sowohl für flüchtige Verbindungen und organische Säuren analysiert. Trennen Sie die Zucker und organische Säuren folgenden TMS Derivatisierung mit BSTFA + TMCS Verwendung einer Säule (30 mx 0,25 mm ID) mit einem 1,0 &amp; mgr; m Schichtdicke. </li><li> Stellen Sie den Säulenofen bei 50 ° C für 2 Minuten, dann erhöhen Sie die Temperatur linear auf 290 ° C bei 5 ° C / min. Halten Sie für 7 min. Stellen Sie die GC-Injektor und GC / MS-Schnittstelle bis 250 ° C und 290 ° C. <ol><li> Verwenden Helium als Träger bei einer flow Rate von 1,0 ml / min. Legen Sie die MS Quellentemperatur bis 230 ° C. </li></ol></li><li> Tune und Kalibrierung des Massenspektrometers täglich mit Perfluortributylamin (PFTBA). Verwenden Sie eine 1 ul Injektion PFTBA im Scan (35-700 amu) positiven Ionenmodus um Daten über das Vorhandensein und die Konzentrationen der Aminosäuren zu erhalten. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

Unter Verwendung der oben beschriebenen Verfahren, haben wir festgestellt, dass die beebread Firma AHB wurde in größeren Mengen sowohl von AHB und EHB verbraucht. Obwohl EHB und AHB verbraucht ähnliche Mengen der einzelnen Arten von Bienenbrot hatte AHB höher Hämolymphe Protein-Titer. Erkenntnisse auf der Grundlage unserer Methoden waren ähnlich zu früheren Berichten, wo Hämolymphe Protein-Ebene in AHB höher als in EHB obwohl beide die gleichen Diäten 26 zugeführt wurden. Durch die Messung des Verbrauchs von EBB und ABB, die mit unterschiedlichen Geschwindigkeiten sowohl EHB und AHB verbraucht wurden, wurde bestimmt, dass Hämolymphe Proteinkonzentration in den einzelnen Unterarten nicht durch eine Erhöhung der Nahrungsaufnahme erhöht werden. Es scheint ein Plateau für Hämolymphe Proteinkonzentration in Arbeiter Krankenschwester Biene Alter und dass der Sollwert für die Hochebene ist in AHB als EHB höher sein. Es gibt mehrere wichtige Voraussetzungen für die Bildung Kolonien beebread Produktion, die die Rate der Pollenspeicher optimieren. Erstens, die colonies müssen Rahmen mit offenen Brut. Ohne offene Brut zu füttern, werden die Arbeiter nicht viel Pollen sammeln. Zweitens muß der Kolonie weisellos sein, so dass keine zusätzlichen Brut erzeugt. Brutaufzucht benötigt große Mengen an Pollen und nur überschüssiges Pollen gespeichert. In den kleinen Kolonien in EFA gegründet, gäbe es wenig Pollen als Bienenbrot, wenn Brutbereiche wurden erweitert, so Kolonien müssen weisellos sein gespeichert werden können. Schließlich wird für beebread gemacht werden, Pollen müssen corbicular Lasten gesammelt und in Wabenzellen gespeichert werden. Wenn der Pollen in Pollenfallen gesammelt, muss es zu einem feinen Pulver, bevor er sich für die Bienen, so dass sie es als corbicular Lasten sammeln können geschliffen werden. Die Methoden zur Messung der Verbrauch von Bienenbrei erzeugt eher qualitative als absolute Schätzungen. Der einzige, der Verbrauch gezählt wurde, war, wenn die Zellen vollständig von Bienenbrot entleert. Eine genauere Schätzung der gesamten Bienenbrot Verbrauch könnte durch Entfernen der Bienen br erhaltenead aus den Zellen und damit zu einer Pastete, die vor und nach der Studie Zeitraum gewogen werden konnte. Wollten wir jedoch, das Bienenbrot in den Zellen zu halten, damit die Bienen könnten darauf, wie sie es in einer Kolonie und vielleicht auch weiterhin während der Studiendauer Verarbeitung füttern. Der Gewichtsunterschied der Kammabschnitte vor und nach der Studie nicht als eine Schätzung des Konsums verwendet, weil das Gewicht steigt an, weil Bienen setzen Sie den verdünnten Honig, sie in einigen Zellen zugeführt. Die Arbeiter könnten auch einige der verdünnten Honig auf die Bienenbrot hinzugefügt haben. Aus diesen Gründen wurden die Zellen, das etwa gleiche Mengen von Bienenbrot vor und nach der Fütterungsperiode gezählt und erzeugt einen qualitativen Messung. Dennoch gab es einen auffallenden Unterschied zwischen den beiden Arten von beebread der Anzahl der leeren Zellen ABB Vergleich EBB gezählt nach 11 Tagen. Festlegen, wann gespeichert Pollen wird Bienenbrei kann difficult weil Bienen ständig hinzufügen Pollen, Zellen. Die für die Herstellung von Bienenbrot verwendet Kolonien wurden mit Rahmen von offenen Brut hergestellt, so würden die Bienen Pollen zu sammeln. Allerdings waren die Kolonien weisellos so gab es Larven für nur 9 Tage zu ernähren, nachdem die Kolonie gegründet wurde. Für den Rest des Zeitraums von 3 Wochen bei Kolonien wurden in EFA, Pollen, die die gesammelten Bienen wurde gespeichert und umgewandelt, um Bienenbrot. Halten Sie die gespeicherten Pollen in den Kamm Zellen für weitere 11 Tage bei Verfütterung an Bienen in Käfigen kann auch die Verarbeitung von Pollen weiter Bienenbrei haben. Die Umwandlung von Pollen Bienenbrot dauert ca. 7 Tage 8. Die auf EHB und AHB gefüttert Bienenbrei hatten niedrigere pH-Wert und reduziert die Proteinkonzentrationen im Vergleich mit dem Pollen gefüttert. Ähnliche Ergebnisse von Änderungen der Pollen nach Umwandlung Bienenbrei wurden von anderen 7,10,27 berichtet. Die Ergebnisse unterschieden sich von früheren Berichten jedoch darin, dass es Unterschiede in Konzentrationen of bestimmte Aminosäuren zwischen Bienenbrot und Pollen. Die Veränderungen der beiden Protein und Aminosäurekonzentrationen konnte aufgrund der Aktivität von proteolytischen Enzymen, könnte die Quelle, von denen die Bienen selbst oder die mikrobiellen Gemeinschaften im Bienenbrot 7,8,28,29 etabliert sein. Die verwendet werden, um die Proteinkonzentration zu messen Verfahren waren ähnlich den zuvor beschriebenen, um die Wirkungen von Nahrungsprotein auf Africanized und europäischen Bienen 26 bestimmen. Als Erweiterung der Verfahren, waren wir in der Lage, lösliche Protein in Pollen und beebread abzuschätzen. Diese Methoden erzeugt ähnliche Ergebnisse zu früheren Berichten 7,10,27. Unsere Ergebnisse liefern weitere Beweise dafür, dass AHB Nahrungsprotein effizienter assimilieren als EHB, und dass dies ein Schlüsselfaktor für den ökologischen Dominanz des AHB in den meisten Regionen, in denen sie eingewandert sind und sich etabliert hat 30-32 sein.

Ernährung spielt eine grundlegende Rolle bei der Gesundheit und Vitalität von Bienenvölkern und deren Etablierung als Populationen. Nährstoffe aus der Nahrung liefern Energie und die biochemischen Komponenten für die Brutaufzucht, Thermoregulation notwendig, Nahrungssuche und Immunantwort. Für Bienenvölker, benötigt die Nährstoffe Kolonie Bevölkerungen wachsen und pflegen ihre Gesundheit von Nektar und Pollen zu kommen. Nectar bietet Kohlenhydrate und Pollen liefert die verbleibenden diätetischen Anforderungen wie zB Protein, Lipide, Vitamine und Mineralien ein. Unterarten der Honigbienen in ernährungsphysiologisch basierten Kolonie-Level-Parameter, wie Arbeiter Langlebigkeit, Brutaufzucht und Mechanismen der sozialen Immunität 2-6 unterscheiden. Diese Unterschiede könnten, wie Lebensmittel, insbesondere Pollen wird durch die Kolonie verarbeitet und verdaut Personen verknüpft werden. Pollen ist in Wabenzellen und durch mikrobiell vermittelte Milchsäuregärung wird chemisch verändert gespeichert <sup&gt; 10.07. Das fermentierte Pollen wird als Bienenbrot. Es könnte genotypische Unterschiede zwischen den Unterarten in ihrer Fähigkeit, Nährstoffe aus dem Pollen sie sammeln und speichern zu erwerben und dies könnte Kolonie Wachstum und Überleben beeinflussen. Genotypische Auswirkungen auf die Lebensmittelverarbeitung und Nährstoff Erwerb haben in anderen Organismen dokumentiert was manche Menschen, mehr Nährstoffe und Kalorien als andere zu erhalten und verbrauchen dabei die gleichen Nahrungsmittel 11-14. Wir beschreiben hier verwendet, um die Zusammensetzung und den Verbrauch von Bienenbrei durch verschiedene Unterarten der Honigbienen gemacht vergleichen Methoden. Methoden, um die resultierenden Hämolymphe Protein-Titer bei Arbeiterinnen beschrieben sind zu messen. Frühere Studien über die Nährstoffzusammensetzung Bienenbrei wurden mit europäischen Honigbienen (EHB) 10,15,16 getan. Allerdings kann es Unterschiede in Bienenbrei von Bienen der verschiedenen Unterarten gemacht, selbst wenn sie auf der gleichen Pollen ernähren. EHB und AHB miteinander verglichen, da diese U-BootePecies haben unterschiedliche verhaltensmäßigen und physiologischen Unterschiede, die Lebensmittel- und Nährstofferfassung 17 in Zusammenhang stehen könnten. Einige der bemerkenswertesten Unterschiede sind, dass AHB sammeln und verbrauchen mehr Pollen als EHB und scheinen, um es leichter in Brut 18 umzuwandeln. AHB Kolonien haben höhere Schwärmen Raten als EHB und fliehen, wenn Nahrungsressourcen zu begrenzten 19-23. Flucht ist in EHB selten. AHB auch höhere Stoffwechselrate als EHB 24. Die Nahrungsgrundlage für die Kolonie-Pegeldifferenzen zwischen EHB und AHB könnte zu der Rate der Pollensammlung sowie dessen Nährstoffgehalt (zB Aminosäuren und Proteinen), nachdem es umgewandelt Bienenbrei hängen. Bienenbrei Verbrauch und das resultierende Protein Akquisition könnte auch eine Rolle in der Kolonie-Niveauunterschiede zwischen EHB und AHB zu spielen. Mit den entwickelten Methoden, EHB und AHB gemacht Bienenbrei aus demselben Pollenquelle. Die Bienenbrot wurde dann zurück auf die Bienen gefüttert each Unterart und kann bestimmen, ob Bienen erwerben Protein aus beebread in einer Weise kennzeichnend für deren Unterarten oder an die Source des beebread.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="792">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:308px;">Name of the Material/Equipment</td>
			<td style="width:153px;">Company</td>
			<td style="width:140px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:191px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">waterproof double junction pH spear&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td>Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Coffee Grinder</td>
			<td>Mr. Coffee&#160;</td>
			<td>model 1DS77</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Dulbecco&#39;s phosphate buffer solution</td>
			<td>Emd-millipore</td>
			<td>BSS-1005-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">EIA/RIA polystyrene plate</td>
			<td>Sigma-Aldrich-Corning</td>
			<td align="left">CLS3590-100EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">microcapillary pipets</td>
			<td>Kimble Glass Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quick Start Bradford Protein Assay Kit 2&#160;</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>#500-0202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td>Laboratories</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spectrophotometer</td>
			<td>Biotek Synergy HT&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mass Selective Detector&#160;</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5973N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">HLB cartridge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">gas chromatograph&#160;</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>6930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#160;gas chromatography column&#160;</td>
			<td>A J&#38;W Scientific&#160;</td>
			<td>DB-1701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">d4-alanine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>488917</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;">d23-lauric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>451401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">13C6-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>389374</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pyridine&#160;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>270970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">N,O-Bis (trimethylsilyl)trifluoroacetamide +&#160;&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Trimethylchlorosilane (BSTFA + TMCS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>33148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Perfluorotributylamine (PFTBA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>442747-U</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;">d39-arachidiac acid</td>
			<td>Cambridge Isotope&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;"></td>
			<td>Laboratories</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for comparing nutrients in beebread made by africanized and european honey bees and the effects on hemolymph protein titers

Honigbienen zu erhalten Nährstoffe aus Pollen sie sammeln und speichern im Bienenstock als Bienenbrot. Wir entwickelten Methoden, um die Pollenquelle, die Bienen sammeln und zu konvertieren, indem Kolonien in einem speziell konstruierten geschlossenen Fluggebiet Bienenbrei steuern. Es wurden Methoden entwickelt, um das Protein und Aminosäurezusammensetzung der Pollen und beebread analysieren. Wir beschreiben auch, wie Verbrauch des Bienenbrei wurde gemessen und Verfahren zur Behandlung von erwachsenen Arbeitnehmer Biene Hämolymphe Protein-Titer nach der Fütterung auf Bienenbrei für 4, 7 und 11 Tage nach dem Auflaufen zu bestimmen. Methoden wurden angewandt, um festzustellen, ob Genotyp beeinflusst die Umwandlung von Pollen Bienenbrot und das Tempo der Bienen verbrauchen und Protein zu erwerben von ihm. Zwei Unterarten (europäischen und Africanized Honigbienen; EHB und AHB) wurden mit demselben Pollenquelle zur Verfügung gestellt. Auf Basis der entwickelten Methoden, Bienenbrei von beiden Unterarten gemacht hatten niedrigere Proteinkonzentrationen und pH-Werte als die Pollen. Im Allgemeinen Aminosäure conzent in Bienenbrei entweder EHB oder AHB gemacht waren ähnlich und trat auf höheren Ebenen in Bienenbrei als im Pollen. Sowohl AHB und EHB verbraucht deutlich mehr der Bienenbrei von AHB als durch EHB gemacht. Obwohl EHB und AHB verbraucht ähnliche Mengen von jeder Art von Bienenbrot waren Hämolymphe Proteinkonzentrationen in AHB höher als in EHB. Unterschiede in der Protein Erwerb von AHB und EHB Umwelt Anpassungen an die geografische Region, in der jeweils Unterarten entwickelt Zusammenhang widerspiegeln könnten. Diese Unterschiede könnten auf die erfolgreiche Etablierung der AHB Populationen in der Neuen Welt wegen der Auswirkungen auf die Brutaufzucht und Koloniewachstum beitragen.

<html> Bienenbrei wurde in -80 ° C für weniger als einen Monat, bevor für pH und Proteinkonzentration analysiert gespeichert und für etwa 4 Monate vor der Aminosäureanalyse. Bienenbrei unterschied sich von der Pollen im pH und der Proteinkonzentration (Abbildung 1). Der pH beebread niedriger war als der Pollen wurde die Proteinkonzentration. Sowohl EHB und AHB verbraucht mehr ABB als EBB (Abbildung 2). Niveaus von löslichem Protein in der Hämolymphe von AHB waren signifikant höher als EHB unabhängig von der Art der Bienenbrot sie verbraucht ist (Abbildung 3). Diese Unterschiede in der Hämolymphe Proteinniveaus auftrat, obwohl EHB und AHB verbraucht ähnliche Mengen von jeder Art von Bienenbrot. Das Alter der Bienen zum Zeitpunkt der Probenahme erheblich beeinträchtigt lösliches Protein-Konzentrationen in der Hämolymphe. Verglichen mit Tag-7 oder 11, die nicht unterschied Proteinkonzentrationen waren deutlich niedriger in Tag-4 Bienen. _content &quot;&gt; Von den 10 Aminosäuren, die essentiell für Honigbienen, alle außer Histidin wurden im Pollen nachgewiesen. In den meisten Fällen waren die Aminosäurekonzentrationen in beebread gemessen höher ist als in den Pollen (Abbildung 4). Beispielsweise werden Konzentrationen von Leucin und Threonin waren ungefähr 60% höher im Vergleich beebread mit Pollen und Valin-Konzentrationen waren etwa 25% höher. Alanin wurden Asparaginsäure, Glutamin und Methionin Ebenen auch beebread höher als in Pollen. Aminosäuren Konzentrationen nicht wesentlich zwischen unterschiedlich ABB und EBB mit Ausnahme von Phenylalanin und Cystein. Phenylalanin Werte waren etwa doppelt so hoch im Vergleich zu ABB entweder EBB oder Pollen. Cystein-Konzentrationen waren niedriger in EBB im Vergleich zu ABB oder Pollen. Tryptophan war die einzige Aminosäure, die in höheren Konzentrationen in Pollen als in EBB oder ABB. Die Konzentrationen von Prolin in Pollen und ABB waren höher als in EBB. Abbildung 1: Vergleich der pH-Wert (A) und löslichen Proteinkonzentrationen (B) in Pollen und Bienenbrot von europäischen (EHB) oder Africanized (AHB) Honigbienen gemacht. Der pH-Wert von Pollen war signifikant höher als die beebread durch Varianzanalyse bestimmt (F 2,12 = 3725, p &lt;0,0001), gefolgt von einer Tukeys W- Fachvergleichstest. Die Proteinkonzentration in Pollen war signifikant höher als in beebread durch EHB (EBB) oder AHB (ABB) hergestellt (F 2,27 = 16,49; p &lt;0,0001). Mittel, gefolgt von dem gleichen Buchstaben sind nicht auf dem Niveau 0,05 signifikant unterschiedlich. <img alt="Abbildung 2" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52448/52448fig2highres.jpg" width="600" /> Bild 2: Der durchschnittliche Anteil der cells Bienenbrei, die vollständig über eine 11 Tage-Intervall von caged Bienen verbraucht wurden enthält. Die Bienenbrei wurde entweder von europäischen (EHB) oder Africanized (AHB) Bienen mit dem gleichen Pollenquelle gemacht. Die Mittelwerte wurden aus fünf Käfige jeder Behandlung geschätzt; die mit dem gleichen Buchstaben sind nicht auf dem Niveau 0,05 signifikant, wie durch eine Varianzanalyse (F 3,16 = 7,3, p = 0,003) und W Tukey bestimmt. Dieses Bild wurde von 25 modifiziert. <img alt="Figur 3" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52448/52448fig3highres.jpg" width="600" /> Abbildung 3: Die durchschnittliche Konzentration des Proteins in der Hämolymphe von europäischen (EHB) oder Africanized (AHB) Honigbienen gefüttert Bienenbrei von europäischen (EBB) oder Africanized (ABB) Bienen für 4, 7 und 11 Tagen Eine wiederholte Messungen Analyse. Varianz angegeben signifikanten Unterschiede zwischen den 4 treatment Gruppen (F 3,20 = 19,7, p &lt;0,001). Levels von löslichem Protein in AHB gefüttert ABB deutlich über EHB gefüttert ABB (p = 0,008) oder EBB (p = 0,018). Das Alter der Bienen zum Zeitpunkt der Probenahme erheblich beeinträchtigt lösliches Protein-Konzentrationen in der Hämolymphe. Verglichen mit Tag-7 (p &lt;0,0001) und 11 (p = 0,001) Ebenen waren deutlich niedriger in Tag-4 Bienen. Tag 7 und Tag 11 Bienen unterschieden sich nicht (p = 0,149). Diese Zahl hat sich von 25 modifiziert. <img alt="4" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/52448/52448fig4highres.jpg" width="600" /> Abb. 4: Die Konzentrationen von Aminosäuren (ug pro Gramm Pollen oder Bienenbrot) in Pollen oder die Bienenbrot daraus EBB besteht Bienenbrei von europäischen Bienen und ABB wurde von Africanized Bienen. Tryptophan, Cystein, Phenylalanin und Prolin wurden separat zum Zwecke der Klarheit in pre aufgetragensenting ihre Mengen. Diese Zahl hat sich von 25 modifiziert.

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Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Here are methods to quantify nutrients in pollen before and after its conversion to beebread by two subspecies of honeybees. We describe techniques to measure beebread consumption and resulting protein titers in both subspecies.

Methoden zum Vergleich der Nährstoffe in Bienenbrot Hergestellt von Africanized und europäischen Honigbienen und die Auswirkungen auf die Hämolymphe Protein Titer

Honey bees obtain nutrients from pollen they collect and store in the hive as beebread. We developed methods to control the pollen source that bees ...

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Research

JoVE Journal

Biology

10.6K Aufrufe.  USDA-ARS. Here are methods to quantify nutrients in pollen before and after its conversion to beebread by two subspecies of honeybees. We describe techniques to measure beebread consumption and resulting protein titers in both subspecies. 

Serie: Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Monitoring Acupuncture Effects on Human Brain by fMRI

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate that acupuncture mobilizes a limbic-paralimbic-neocortical network and its anti-correlated sensorimotor/paralimbic network at multiple levels of the brain and that the hemodynamic response is influenced by the psychophysical response.  Physiological monitoring may be performed to explore the peripheral response of the autonomic nerve function. This video describes the studies performed at LI4 (hegu), ST36 (zusanli) and LV3 (taichong), classical acupoints that are commonly used for modulatory and pain-reducing actions. Some issues that require attention in the applications of fMRI to acupuncture investigation are noted.

FMRI and physiological monitoring is used to study the effects of Acupuncture on the central and peripheral nervous systems. Acupuncture mobilizes a limbic-paralimbic-neocortical network, with great overlap with the default mode network, to modulate neurological activity, possibly related to its autonomic effect in the peripheral nervous system.

Überwachung Akupunktur Effects on Human Brain von fMRI

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate ...

Forschung

Biologie

Purification of the M. magneticum Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamA&Delta;41

Magnetotactic bacteria comprise a diverse group of aquatic microorganisms that are able to orientate themselves along geomagnetic fields. This behavior is believed to aid their search for suitable environments (1). This capability is conferred by the magnetosome, a subcellular organelle that consists of a linear-chain assembly of lipid vesicles each able to biomineralize and enclose a ~50-nm crystal of magnetite or greigite. A principle component of the magnetosome that was shown to be required for the formation of functional vesicles is MamA. MamA is a highly abundant magnetosome-associated protein which is one of the most characterized magnetosome-associated proteins in vivo (2-6). This article focuses on the purification of MamA, which despite being studied in vivo, no clear functional or structural details have been identified for it. Bioinformatics analysis suggested that MamA is a tetra-tricopeptide repeat (TPR) containing protein. TPR is a structural motif found as such or forming part of a bigger fold in a wide range of proteins, it serves as a template for protein-protein interactions and mediates multi-protein complexes (7). TPRs are involved in many crucial tasks in eukaryotic cell organelle processes and many bacterial pathways (8-14). In order to understand MamA, a unique TPR containing protein, highly purified protein is required as a first step. In this article, we present the purification protocol for a stable MamA deletion mutant (MamA&Delta;41) from M. magneticum AMB-1.

Purification of the &lt;em&gt;M. magneticum&lt;/em&gt; Strain AMB-1 Magnetosome Associated Protein MamA&amp;Delta;41

MamA is a unique Magnetosome associated protein which was shown to be involved in magnetosome activation. Here we present the purification protocol of MamA deletion mutant (MamA&Delta;41) from M. magneticum AMB-1.

Die Reinigung des M. magneticum Stamm AMB-1 Magnetosom assoziierten Protein MamAΔ41

Magnetotactic bacteria comprise a diverse group of aquatic microorganisms that are able to orientate themselves along geomagnetic fields. This behavior is ...

Combining Single-molecule Manipulation and Imaging for the Study of Protein-DNA Interactions

The paper describes the combination of optical tweezers and single molecule fluorescence detection for the study of protein-DNA interaction. The method offers the opportunity of investigating interactions occurring in solution (thus avoiding problems due to closeby surfaces as in other single molecule methods), controlling the DNA extension and tracking interaction dynamics as a function of both mechanical parameters and DNA sequence. The methods for establishing successful optical trapping and nanometer localization of single molecules are illustrated. We illustrate the experimental conditions allowing the study of interaction of lactose repressor (lacI), labeled with Atto532, with a DNA molecule containing specific target sequences (operators) for LacI binding. The method allows the observation of specific interactions at the operators, as well as one-dimensional diffusion of the protein during the process of target search. The method is broadly applicable to the study of protein-DNA interactions but also to molecular motors, where control of the tension applied to the partner track polymer (for example actin or microtubules) is desirable.

Here we describe the instrumentation and methods for detecting single fluorescently-labeled protein molecules interacting with a single DNA molecule suspended between two optically trapped microspheres.

Die Kombination von Einzelmolekül-Imaging und Manipulation für das Studium der Protein-DNA-Wechselwirkungen

The paper describes the combination of optical tweezers and single molecule fluorescence detection for the study of protein-DNA interaction. The method ...

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This occurs when endothelial cells, which line blood vessels, become adhesive to circulating immune cells such as monocytes. In vitro measurement of this adhesiveness has until now been done by quantifying the total number of monocytes that adhere to an endothelial layer either as a direct count or by indirect measurement of the fluorescence of adherent monocytes. While such measurements do indicate the average adhesiveness of the endothelial cell population, they are confounded by a number of factors, such as cell number, and do not reveal the proportion of endothelial cells that are actually adhesive. Here we describe and demonstrate a method which allows the enumeration of adhesive cells within a tested population of endothelial monolayer. Endothelial cells are grown on glass coverslips and following desired treatment are challenged with monocytes (that may be fluorescently labeled). After incubation, a rinsing procedure, involving multiple rounds of immersion and draining, the cells are fixed. Adhesive endothelial cells, which are surrounded by monocytes are readily identified and enumerated, giving an adhesion index that reveals the actual proportion of endothelial cells within the population that are adhesive.

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

We report an in vitro method that allows the quantitation of the actual number of adhesive cells within an endothelial cell monolayer.

Die Quantifizierung der Endothelial Cell Haftfähigkeit<em&gt; In-vitro-</em

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This ...

Gap Junctional Intercellular Communication: A Functional Biomarker to Assess Adverse Effects of Toxicants and Toxins, and Health Benefits of Natural Products

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction channels, which is a major intercellular process by which tissue homeostasis is maintained. Interruption of gap junctional intercellular communication (GJIC) by toxicants, toxins, drugs, etc. has been linked to numerous adverse health effects. Many genetic-based human diseases have been linked to mutations in gap junction genes. The SL-DT technique is a simple functional assay for the simultaneous assessment of GJIC in a large population of cells. The assay involves pre-loading cells with a fluorescent dye by briefly perturbing the cell membrane with a scalpel blade through a population of cells. The fluorescent dye is then allowed to traverse through gap junction channels to neighboring cells for a designated time. The assay is then terminated by the addition of formalin to the cells. The spread of the fluorescent dye through a population of cells is assessed with an epifluorescence microscope and the images are analyzed with any number of morphometric software packages that are available, including free software packages found on the public domain. This assay has also been adapted for in vivo studies using tissue slices from various organs from treated animals. Overall, the SL-DT assay can serve a broad range of in vitro pharmacological and toxicological needs, and can be potentially adapted for high throughput set-up systems with automated fluorescence microscopy imaging and analysis to elucidate more samples in a shorter time.

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer technique that measures intercellular communication through gap junction channels. Gap junctional intercellular communication is a major cellular process by which tissue homeostasis is maintained and disruption of this cell signaling has adverse health effects.

Interzelluläre Gap Junction-Kommunikation: Eine funktionelle Biomarker zur Beurteilung Unerwünschte Auswirkungen von Schadstoffen und Toxinen und gesundheitlichen Vorteile von Natural Products

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction ...

Comparison of Tobacco Host Cell Protein Removal Methods by Blanching Intact Plants or by Heat Treatment of Extracts

Plants not only provide food, feed and raw materials for humans, but have also been developed as an economical production system for biopharmaceutical proteins, such as antibodies, vaccine candidates and enzymes. These must be purified from the plant biomass but chromatography steps are hindered by the high concentrations of host cell proteins (HCPs) in plant extracts. However, most HCPs irreversibly aggregate at temperatures above 60 &#176;C facilitating subsequent purification of the target protein. Here, three methods are presented to achieve the heat precipitation of tobacco HCPs in either intact leaves or extracts. The blanching of intact leaves can easily be incorporated into existing processes but may have a negative impact on subsequent filtration steps. The opposite is true for heat precipitation of leaf extracts in a stirred vessel, which can improve the performance of downstream operations albeit with major changes in process equipment design, such as homogenizer geometry. Finally, a heat exchanger setup is well characterized in terms of heat transfer conditions and easy to scale, but cleaning can be difficult and there may be a negative impact on filter capacity. The design-of-experiments approach can be used to identify the most relevant process parameters affecting HCP removal and product recovery. This facilitates the application of each method in other expression platforms and the identification of the most suitable method for a given purification strategy.

Three heat precipitation methods are presented that effectively remove more than 90% of host cell proteins (HCPs) from tobacco extracts prior to any other purification step. The plant HCPs irreversibly aggregate at temperatures above 60 &#176;C.

Vergleich von Tabakwirtszellprotein Abbaumethoden von Intact Pflanzen oder Blanchieren durch Wärmebehandlung von Extrakten

Plants not only provide food, feed and raw materials for humans, but have also been developed as an economical production system for biopharmaceutical ...

Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment methods. Here we describe methods to measure the quantities of adult bees, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, by photographing frames, and by installing hives on scales and with internal sensors. Data from these periodic evaluations are then combined with running average and daily detrended data on hive weight and internal hive temperature. The resulting datasets have been used to detect colony-level effects of imidacloprid applied in a sugar syrup as low as 5 parts per billion. The methods are objective, require little training, and provide permanent records in the form of sensor output and photographs.

Sublethal doses of pesticides may affect colonies in ways that are difficult to detect using only periodic or visual methods. Methods to measure total adult bee mass, brood, and food resources by weighing hives and hive parts, photographing frames, and installing sensors, are provided. Data analysis is also addressed.

Überwachung der Kolonie-Ebene Auswirkungen der subletalen Schädlingsbekämpfungsmittelbelichtung auf Honigbienen

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These age-associated disorders are characterized by the appearance of protein aggregates with fibrillary structure in the brains of these patients. Exactly why normally soluble proteins undergo an aggregation process remains poorly understood. The discovery that protein aggregation is not limited to disease processes and instead part of the normal aging process enables the study of the molecular and cellular mechanisms that regulate protein aggregation, without using ectopically expressed human disease-associated proteins. Here we describe methodologies to examine inherent protein aggregation in Caenorhabditis elegans through complementary approaches. First, we examine how to grow large numbers of age-synchronized C. elegans to obtain aged animals and we present the biochemical procedures to isolate highly-insoluble-large aggregates. In combination with a targeted genetic knockdown, it is possible to dissect the role of a gene of interest in promoting or preventing age-dependent protein aggregation by using either a comprehensive analysis with quantitative mass spectrometry or a candidate-based analysis with antibodies. These findings are then confirmed by in vivo analysis with transgenic animals expressing fluorescent-tagged aggregation-prone proteins. These methods should help clarify why certain proteins are prone to aggregate with age and ultimately how to keep these proteins fully functional.

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

The goal of the method presented here is to explore protein aggregation during normal aging in the model organism C. elegans. The protocol represents a powerful tool to study the highly insoluble large aggregates that form with age and to determine how changes in proteostasis impact protein aggregation.

Methoden zur Untersuchung Veränderungen inhärenten Proteinaggregation mit dem Alter in Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

Quantification of Site-specific Protein Lysine Acetylation and Succinylation Stoichiometry Using Data-independent Acquisition Mass Spectrometry

Post-translational modification (PTM) of protein lysine residues by N&#400;-acylation induces structural changes that can dynamically regulate protein functions, for example, by changing enzymatic activity or by mediating interactions. Precise quantification of site-specific protein acylation occupancy, or stoichiometry, is essential for understanding the functional consequences of both global low-level stoichiometry and individual high-level acylation stoichiometry of specific lysine residues. Other groups have reported measurement of lysine acetylation stoichiometry by comparing the ratio of peptide precursor isotopes from endogenous, natural abundance acylation and exogenous, heavy isotope-labeled acylation introduced after quantitative chemical acetylation of proteins using stable isotope-labeled acetic anhydride. This protocol describes an optimized approach featuring several improvements, including: (1) increased chemical acylation efficiency, (2) the ability to measure protein succinylation in addition to acetylation, and (3) improved quantitative accuracy due to reduced interferences using fragment ion quantification from data-independent acquisitions (DIA) instead of precursor ion signal from data-dependent acquisition (DDA). The use of extracted peak areas from fragment ions for quantification also uniquely enables differentiation of site-level acylation stoichiometry from proteolytic peptides containing more than one lysine residue, which is not possible using precursor ion signals for quantification. Data visualization in Skyline, an open source quantitative proteomics environment, allows for convenient data inspection and review. Together, this workflow offers unbiased, precise, and accurate quantification of site-specific lysine acetylation and succinylation occupancy of an entire proteome, which may reveal and prioritize biologically relevant acylation sites.

Here, we present unbiased quantification of site-specific protein acetylation and/or succinylation occupancy (stoichiometry) of an entire proteome through a ratiometric analysis of endogenous modifications to modifications introduced after quantitative chemical acylation using stable isotope-labeled anhydrides. In combination with sensitive data-independent acquisition mass spectrometry, accurate site occupancy measurements are obtained.

Quantifizierung der standortspezifischen Protein Lysin Acetylierung und Succinylation Stöchiometrie mittels Massenspektrometrie Daten-unabhängige Übernahme

Post-translational modification (PTM) of protein lysine residues by N&#400;-acylation induces structural changes that can dynamically regulate protein ...

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm cell to penetrate the zona pellucida and fertilize the egg. It is therefore of great interest to test compounds (e.g., environmental chemicals or drug candidates) for their effect on Ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm either to examine the potential adverse effects on human sperm cell function or to investigate a possible role as a contraceptive. Here, two medium-throughput assays are described: 1) a fluorescence-based assay for assessment of effects on Ca2+-signaling in human sperm, and 2) an image cytometric assay for assessment of acrosome reaction in human sperm. These assays can be used to screen a large number of compounds for effects on Ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm. Furthermore, the assays can be used to generate highly specific dose-response curves of individual compounds, determine potential additivity/synergism for two or more compounds, and to study the pharmacological mode of action through competitive inhibition experiments with CatSper inhibitors.

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Here, two medium-throughput assays for assessment of effects on Ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm are described. These assays can be used to quickly and easily screen large amounts of compounds for effects on Ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm.

Medium-Throughput Screening Tests zur Beurteilung der Auswirkungen auf Ca2 +-Signalisierung und Akrosom Reaktion in menschliches Sperma

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...