This work is supported in part by American Heart Association Scientist Development Grant and NARSAD Young Investigator Award to Yingwei Mao.

HINWEIS: Alle Protokolle mit Tieren wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien der Tierpflege der Pennsylvania State University folgte, IACUC # 44057 1. Lentivirus Produktion HINWEIS: Der Tag vor der Transfektion sollten LentiX-293-Zellen bei 80% Konfluenz sein. <ol><li> Spülen Zellen mit DMEM kurz vor der Transfektion und Inkubation in 10 ml DMEM / 10% FBS mit Penicillin (100 IU / ml) und Streptomycin (100 ug / ml) für 5 min bei RT. </li><li> Verdünnte DNA und Polyethylenimin (PEI) (1 mg / ml) im Verhältnis 1: 3 (1 ug DNA: 3 ul PEI) in 1 ml DMEM und Vortex für 1 min. Das Volumen der DNA gegeben ist abhängig von der Konzentration der DNA. Inkubieren bei Raumtemperatur für 10 min. <ol><li> Beispielsweise verwenden 20 ug Plasmid-DNA, bestehend aus 10 ug Vektorplasmid wurden 5 ug Plasmid psPax2 14, 5 ug des vesikulären Stomatitis-Virus (VSV) mit 60 ul von PEI pro Schale. </li></ol></li><li&gt; Mischen Sie die DNA und PEI-Lösung erneut durch Vortexen für 1 min. Inkubieren bei Raumtemperatur für 10 min. </li><li> 1 / 10tel Volumen von Gesamtkulturmedium DMEM (dh 1 ml für 10 ml Kulturmedium in einem 100-mm-Schale). 1 ml der DNA-PEI-Mischung tropfenweise in die Schale und schwenken die Schale herum, bis zu dem Kulturmedium ist allgemein mit der DNA gemischt. </li><li> Inkubation für 6 Stunden bei Raumtemperatur und Entfernen des Überstandes. 5 ml Kulturmedium. </li><li> 48 h nach der Transfektion zu sammeln Virusüberstand und Schleudern bei 627 xg für 5 Minuten bei 4 ° C in einem 50 ml-Röhrchen. Filter 30 ml Virusüberstand durch ein 0,45 um-Spritzenfilter in ein Ultrazentrifugenröhrchen. </li><li> In sterilem Wasser, um die Rohre auszugleichen, und decken Rohre mit kleinen Stück Parafilm. Spin-Röhrchen bei 11.249 × g für 120 min bei 4 ° C. Entfernen Flüssigkeit unter Verwendung einer Vakuumspitze. </li><li> Füge 100 &amp; mgr; l kaltem PBS Rohres. Schwenken Sie die Röhrchen bei 4 ° CO / N. </li><li> Um erneut zu suspendieren, das Virus, Pipetten ter PBS hinzugefügt in Schritt 1.8 über die Pellet 10-mal, darauf achten, daß das Pellet mit der Spitze berühren. Das Pellet wird nicht erneut suspendiert werden, bis diese abgeschlossen ist. </li><li> Aliquot des Virus bei 10-20 &amp; mgr; l pro Röhrchen, flash-freeze in flüssigem Stickstoff und bei -80 ° C. </li></ol> 2. stereotaktische Injektion 2.1) Herstellung des Instruments <ol><li> Platzieren Sie eine Schere, blunt-end Pinzette, ein Nadelhalter, Skalpell, Wattestäbchen und ein Tuch in einer versiegelten Packung mit einem Sterilisationsindikator, und Autoklaven vor der Operation. Darüber hinaus erhalten 10% Povidon-Iod, 70% Ethylalkohol, resorbierbares Nahtmaterial, ein Heizkissen, künstliche Tränen, eine Glasperlen Sterilisator, bohren, ein Bohrer, 2 Einwegspritzen, Injektionsspritze, Elektrorasierer, analgetische (Ketoprofen), Narkose (avertin), Handschuhe und eine stereotaktische Vorrichtung mit der Einspritzpumpe. </li><li> Machen 1,25% Avertin Lösung frisch an diesem Tag, Filter in eine sterile Haube unter Verwendung eines 0,2 &amp;# 181; m sterile Spritzenfilter, und in einen sterilen Serumampulle. Mischungs 2,5 g 2,2,2-Tribromethyl Alkohols in 5 ml tert-Amylalkohol, dann lösen sich in 200 ml Wasser. Halten Sie den pH-Wert unter 5. 15 </li></ol> 2.2) Herstellung der Maus <ol><li> Verwalten avertin bezogen auf das Gewicht der Maus (375 mg / kg). 15 Spritzen Sie die Maus mit dem avertin über eine intraperitoneale (IP) Injektion, und legen Sie dann zurück in seinen Käfig, bis sie vollständig betäubt. </li><li> Geben Sie ein Analgetikum über IP-Injektion (ketaprofen, 5 mg / kg) und Platz künstliche Tränen in den Augen der Maus, um ein Austrocknen zu verhindern. </li><li> Stellen Sie sicher, dass die Maus ist komplett eingeschlafen durch Kneifen ihren Fuß. Wenn die Maus reagiert auf den Fuß Prise, dann geben Sie mehr Anästhetikum (in Dosen von 50 &amp; mgr; l). Rasieren Sie den Kopf der Maus mit einem elektrischen Rasierer. Rasieren Sie die Gegend auf (typischerweise von nur hinter den Ohren, an die Spitze der Schnauze) betrieben werden, und die Umgebung. </li><li> Platzieren Sie die Maus into stereotaktischen Apparat. Verriegeln Sie die Vorderzähne auf der vorderen Klammer, und senken Sie die Klemme und ziehen Sie sie so, dass der Kiefer ist völlig sicher. </li><li> Setzen Sie die Ohr Bars in den Gehörgang, den Kopf voll zu stabilisieren. Achten Sie darauf, die Ohr Bars in zu weit Einsatz, der das Innenohr beschädigen könnten. Sobald Sie fertig sind, sollte der Körper der Maus in der Lage, ohne Unterbrechung der Position der Kopf leicht bewegt werden können. </li><li> Legen Sie ein Heizkissen unter der Maus, um die Körpertemperatur der Maus die während des gesamten Verfahrens zu regeln. </li><li> Reinigen Sie den OP-Bereich gründlich. Mit einem Wattestäbchen, reiben 10% Povidon-Jod in einer Kreisbewegung, ausgehend von der Mitte der Operationsstelle und nach außen bewegt. Dann, mit einem Wattestäbchen zu 70% Ethylalkohol auf der Operationsstelle in der gleichen Weise zu reiben. Wiederholen Sie zweimal. </li></ol> 2.3) den ersten Schnitt <ol><li> Sobald die Maus vorbereitet, öffnen Sie die sterile Ausrüstung Tasche. Wechseln Sie die Handschuhe vor Touching der Instrumente. Nehmen Sie die sterile Tuch und legen Sie die Instrumente auf dem Tuch. Wenn jedes Instrument ein un-sterile Oberfläche berührt, verwenden Sie die Glasperle-Sterilisator für 15 Sekunden, um sie zu sterilisieren. </li><li> Nehmen Sie das Skalpell in der dominanten Hand und blunt-end Pinzette in der nicht-dominanten Hand. Verwenden Sie die stumpfen Enden Pinzette vorsichtig Griff der Haut der Maus, und einen Einschnitt mit dem Skalpell. Beginnen Sie den Schnitt etwa 1,5 cm oberhalb der Ohren (in Richtung der Nase) und erstrecken sich auf etwa 0,5 cm unterhalb der Ohren. Verlängern Sie den Schnitt vertikal in der Mitte des Kopfes der Maus zu Bregma freizulegen (Abbildung 1). </li><li> Sobald bregma visualisiert, nehmen Sie eine sterile Wattestäbchen vorsichtig den Blut, die die Oberfläche des Schädels. Verwenden Sie zwei Baumwoll-Tipps, um die Haut in Richtung der Seite des Kopfes zu drücken. </li></ol> 2.4) Geräte-Setup <ol><li> Nach jeder Blut wird von der Oberfläche des Schädels entfernt und Bregma ist deutlich sichtbar, bereiten Sie die Spritze (contration von 10 8 TU / ml, das Volumen von 1 &amp; mgr; l). Im Abzug, füllen Sie die Spritze mit dem Virus injiziert werden. Stellen Sie sicher, dass keine Luftblasen sind im Inneren. Legen Sie die Spritze in der stereotaktischen Apparat, um sicherzustellen, dass sie vollständig gesichert ist. </li><li> Langsam senken Sie die Spritze, bis er direkt über der Oberfläche des Schädels, so dass die Spitze der sterilen Spritzennadel an der Kreuzung von Bregma und der interauralen Linie gesetzt. Stellen Sie diesen Punkt als Null ist, und bestimmen, Koordinaten von diesem Punkt. </li><li> In Abhängigkeit von der Hirngebiet, variieren die stereotaktischen Koordinaten. Bestimmen Sie diese Koordinaten durch die Verwendung eines Hirnatlas 4. Sobald die Koordinaten festgelegt sind, bewegen Sie die Nadel der Spritze, um diese Koordinaten entsprechen. Ziel Gyrus dentatus unter Verwendung der Koordinaten: M / L = +/- 1 mm, A / P = -1,82 mm. Senken Sie die Nadel nach rechts über den Schädel zu visualisieren, wo das Loch muss gebohrt werden. </li><li> Heben Sie die Spritze leicht, nehmen Sie den Bohrer und setzen Sie den Bohrer bit direkt über dem Ziel Bohrstelle bei etwa 45 ° Winkel auf den Schädel. Beginnen Bohren, Bohren und halten, bis der Schädel weicht. Wenn der Schädel nachgibt, kann ein Abfall des Widerstands erfasst werden. Achten Sie darauf, in das Gehirn zu bohren, um Rindenschäden vorzubeugen. </li><li> Nehmen Sie eine sterile Wattestäbchen und wischen Sie das Blut aus dem Loch. </li><li> Senken die Spritze, so daß sich die Spitze befindet sich direkt auf der Oberfläche des Gehirns (nicht den Schädel). Gesetzt den D / V-Koordinate (Tiefe) auf 0. Nieder die Spritze in der gewünschten Tiefe auf der Grundlage der Gehirnatlas Koordinaten. Um den Gyrus dentatus, stellen D / V bis -1,79 mm zu erreichen. </li><li> Startet die Injektion mit einer Geschwindigkeit von 0,2 ul / min. Zu beobachten, um sicherzustellen, dass die Spritze nicht niedriger als rutschen die gewünschte Tiefe. Wenn dies geschieht, hebe die Spritze in der gewünschten Tiefe wieder. </li><li> Nach der Injektion abgeschlossen ist, warten Sie etwa 2 Minuten, um sicherzustellen, dass jede Restvirus absorbiert wurde. Langsam heben Sie die Spritze und verwenden Sie ein Wattestäbchen, um jede li entfernenquid von der Injektionsstelle. </li><li> Wiederholen Sie für die andere Hemisphäre. </li></ol> 2.5) Naht <ol><li> Entfernen Sie die steriles Naht und Nadel aus ihrer Verpackung und Griff die Nadel mit Hilfe der Nadelhalter. Stellen Sie sich der spitze Kante der Nadel weg von dem Nadelhalter. Halten Sie die stumpfen Enden Pinzette in der nicht-dominanten Hand, und verwenden Sie es zu greifen die Haut an der Maus. Beginnen Sie mit der dominanten Hand. </li><li> Schieben Sie den Faden durch die Haut und mit den glatten Enden Pinzette, um die Haut auf der anderen Seite des Einschnitts zu greifen. Ziehen Sie das Nahtmaterial durch, bis etwa 0,75 Zoll bleibt. </li><li> Lassen Sie die Nadel, und verwenden Sie die stumpfen Enden Zangen, um den Faden um den Nadelhalter einmal wickeln, dann greifen die restlichen 0,75 Zoll Naht mit dem Nadelhalter, und ziehen Sie den Faden durch, so dass die Nadel und Nadelhalter am Ende auf der Seite des Kopfes entgegengesetzt zu jener, die sie ursprünglich auf. Dies sollte einen Knoten zu bilden. </li><li> Wiederholen Sie diesen Schrittdrei weitere Male abwechselnd die Kopfseite der Nadelhalter endet auf jeder Zeit. </li><li> Schneiden Sie den Faden und wiederholen Sie die Schritte 2.5.1-2.5.3 bis der Schnitt geschlossen. </li></ol> 2.6) postoperative Pflege <ol><li> Entfernen Sie vorsichtig die Ohr Bars von der Maus, und entfernen Sie die Kiefer von der vorderen Klammer. </li><li> Halten Sie die Maus auf dem Heizkissen, bis er wacht auf und bewegt sich auf seine eigenen. Überwachen Sie die Maus täglich, und zu halten und Ausschau nach Anzeichen von Schmerzen, wie zum Beispiel nicht Putzen, Essen oder Trinken. Geben Sie zusätzliche analgetische als notwendig erachtet wird. </li></ol> 3. Öffnen Sie Field Test 3.1) einrichten <ol><li> Erhalten Sie leeren Platz, Kunststoff-Arena mit den Abmessungen 50 cm x 50 cm, mit 50 cm hohen Wänden (kann aber etwas größer sein). Reinigen der Arena mit 70% igem Ethylalkohol vor dem Beginn des Experiments. Stellen Sie sicher, der Ethylalkohol vollständig, bevor Sie eine Maus in die Arena getrocknet. </li><li> Legen Sie die Arena auf demBoden und versuchen sicherzustellen, wird die Beleuchtung eingestellt, um Schatten und Blendung zu minimieren. </li><li> Bei Verwendung von Tracking-Software, positionieren Sie die Kamera direkt über dem offenen Feld, etwa 1,5 Meter über dem offenen Feld (weit genug weg, um es im voller umfassen den gesamten Arena, aber nahe genug, um einen klaren Blick auf die Maus haben). </li><li> Richten Sie eine Zone in der Mitte der Box (etwa einer Fläche von 30 cm x 30 cm). 16. Um eine Zone festzulegen, klicken Sie auf der Registerkarte Zone 1 in der Seitenwand. <ol><li> Wählen Sie eine Form Umriss in der oberen Platte, und stellen den Umfang der Mittelzone. Wählen Sie hinzufügen Zone, und klicken Sie auf der Innenseite der Mittelzone. Mit den Programmeingabeaufforderungen, Name der Zone (dies wird als &quot;Zentrum&quot; für dieses Verfahren bezeichnet). Wenn die Verhaltenstest wird mit der Hand erzielt werden, stellen Sie sicher, dass der Boden des Feldes wird in 10 cm x 10 cm große Quadrate aufgeteilt, mit Klebeband markiert. </li></ol></li><li> Einrichten der Software, so dass die Einstellungen korrekt sind, und sich die Maus leicht visiBLE auf dem Bildschirm. Erreichen dies durch Einstellen der Erkennungseinstellungen auf der Maschine mit dem Testfeld (Beleuchtung) und Maus Farbe kompatibel zu sein. Hinweis: Wenn die Einstellungen korrekt sind, sollte das System nur die Maus keine Schatten oder Urin / Fäkalien zu verfolgen, und nicht. Die spezifischen Software-Einstellungen sind abhängig von der Beleuchtung der Arena, und die Farbe der Maus. </li></ol> 3.2) Akklimatisierung und Test <ol><li> Bewegen Versuchsmäusen in die Verhaltensraum 1 h vor dem Test, um sie an ihre Umgebung akklimatisieren. Lassen Sie die Mäuse in ihrem Käfig für die Akklimatisierung. </li><li> Schalten Sie die Kamera auf Band die Verhaltensaufgabe und setzen Sie die Maus auf die Mitte vor der Arena, so dass die Maus vor der Wand. </li><li> Stellen Sie den Timer für 5 Minuten, und Schritt weg von der Arena. Wenn möglich, den Raum verlassen, um die Maus nicht versehentlich zu beeinflussen. </li><li> Nach 5 Minuten um sind, entfernen Sie die Maus und legen Sie sie in ihrem Käfig. </li><li> Verwenden Sie 70% Ethylalkohol, gründlich reinigen, die Feld, bevor Sie zum nächsten Maus. Stellen Sie sicher, der Ethylalkohol vollständig getrocknet ist. </li></ol> 3.3) Scoring <ol><li> Betrachten Sie die Maus als in der Mitte des Feldes, wenn alle vier Pfoten sind in der Mitte 30 cm x 30 cm. </li><li> Quantifizieren, wie viel Zeit die Maus in der Mitte verbringt. Alternativ bestimmen diesmal mit Tracking-Software (wie Noldus ethovison). <ol><li> Um dies zu tun, gehen Sie auf die Registerkarte Analyse, und klicken Sie auf &quot;Bewegung&quot; zu analysiereProfile. Löschen Sie die aktuell eingestellten Kategorien, und wählen Sie dann &quot;in der Zone&quot; auf der Registerkarte Standort. Wählen Sie die Mittelzone. Als nächstes wählen Sie &quot;Analyse-Ausgang&quot; (unter der Registerkarte Ergebnisse), um Ergebnisse anzuzeigen. Eine Tabelle mit den Zeitaufwand für immobile für jede Studie sollte angezeigt werden. </li></ol></li><li> Ansonsten punkten die OFT mit der Hand. Das offene Feld sollte 25 10 cm x 10 cm Quadrate auf dem Boden des ope umrissen habenn Feld (wie in Schritt 3.1.3 beschrieben). Quantifizierung der Menge an Zeit verbringt die Maus in der Mitte, die neben der Anzahl der Einträge in die Mitte der Bahn. 16 HINWEIS: Die Mitte 30 cm x 30 cm Gegend gilt als das Zentrum der offenen Feld. Eine Maus wird als bewohnen die Mittelregion, wenn alle vier Pfoten sind in der 30 x 30 cm-Bereich betrachtet. </li></ol> 4. Forced Swim-Test Hinweis: Lassen Sie mindestens fünf Tage zwischen Verhaltensaufgaben. 4.1) einrichten <ol><li> Besorgen Sie sich einen 2 L klare Eimer füllen und mit 22 ° C Wasser. Setzen Sie den Eimer auf einem Tisch, und versuchen Sie es, um sicherzustellen, wird die Beleuchtung eingestellt, um Schatten und Blendung zu minimieren. </li><li> Bei Verwendung von Tracking-Software, positionieren Sie die Kamera direkt über dem Eimer. </li><li> Up-Software so einstellen, dass die Maus leicht auf dem Bildschirm sichtbar. </li></ol> 4.2) Akklimatisierung und Test <ol><li> Bewegen Versuchsmäusen in den Verhaltens room 1 Stunde vor dem Test, um die Umgebung zu gewöhnen. Lassen Sie die Mäuse in ihrem Käfig für die Akklimatisierung. </li><li> Schalten Sie die Kamera auf Band die Verhaltens-Aufgabe. Sanft, platzieren Sie die Maus in der Mitte der Eimer Wasser. Achten Sie darauf, nicht auf die Maus in fallen zu lassen. Langsam senken Sie die Maus, so dass seine Vorderpfoten zuerst das Wasser berühren. Achten Sie darauf, den Kopf von Untertauchen zu verhindern. </li><li> Stellen Sie den Timer für 6 min, und Schritt weg von der Verhaltensbereich. </li><li> Nach 6 Minuten um sind, entfernen Sie die Maus aus dem Eimer, und wischen Sie überschüssiges Wasser ab, bevor Sie die Maus wieder in ihren Käfig. </li></ol> 4.3) Scoring <ol><li> Bei Verwendung von Tracking-Software, stellen Prozent Unbeweglichkeit bis 11%, wie durch Noldus empfohlen (dies sollte die Standardeinstellung), um Zeit zu quantifizieren schwimm vs. Schwimmen. </li><li> Zur Quantifizierung mit dem Tracking-System, öffnen Sie die Registerkarte Analyse, und klicken Sie auf Bewegung unter Analyseprofile. Löschen Sie die aktuell eingestellten Kategorien, und wählen Sie dann Mobilitätszustand aufder linken Seitenwand (unter individuellen Verhalten). Eingestellt Unbeweglichkeit bis 11%. </li><li> Wählen Sie Track-Visualisierung, unter der Registerkarte Ergebnisse. Wählen Sie Analyse-Ausgang (unter der Registerkarte Ergebnisse), um Ergebnisse anzuzeigen. Eine Tabelle mit den Zeitaufwand für immobile für jede Studie sollte angezeigt werden. </li><li> Wenn die Hand Scoring, messen die Zeit, die Maus verbringt Schwimmen oder Klettern und Höhe der Zeit die Maus immobile verbringt. Zusätzlich messen die Latenz bis zum ersten Mal unbeweglich. Siehe Abbildung 2 in Ergebnisse Section. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

Erfolgreiche stereotaktische Injektionen verlassen sich auf drei Faktoren ab: Halten Sie die Maus lebendig, Einstellung der korrekten Nullpunkt für Koordinaten (Spitze der Nadel an der Kreuzung der Bregma und der interauralen Linie) und die Einstellung der richtigen Tiefe auf den Nullpunkt (Spitze der Nadel leicht berührt die Außenseite des Hirngewebe). Die Lebensfähigkeit der Mäuse ist wichtig. Chirurgie Überleben kann, indem sichergestellt wird, dass die Maus richtig betäubt und erhält eine angemessene analget...

Die Maus wurde vielfach in der Neurobiologie verwendet, weil es leicht ist, genetisch zu manipulieren. Gen-Knockout-Techniken können die Forscher untersuchen, wie die einzelnen genetischen Faktor formt Maus Verhaltensweisen. Darüber hinaus stellt die cre-loxP-System ein wertvolles Werkzeug für die Gewebe- und Zell arttypischer Gen-Knockout-Mäusen, die Forschern die Genfunktion in verschiedenen Geweben zu untersuchen. 1, in der Praxis sind jedoch Expressionsmuster von cre Promo schwer kontrollierbar und bisher viele etablierte cre Treiber nicht regionsspezifische Expression erreicht. 2,3 Alternativ ist die stereotaktische Injektion eine Methode, die spezifischen Regionen des Gehirns von erwachsenen Maus als Ziel hat. Durch Einspritzen von gentechnisch hergestellten Viren, die cDNA oder shRNA kann regionsspezifische Modulation der Genexpression erreicht werden. Obwohl das Gehirn Größe jeder Maus variiert, kann der Ort des spezifischen Hirnregionen mit stereo Koordi bestimmt werdennates gesetzt von Landmarken auf dem Schädel des Maushirn. Die am häufigsten verwendeten Landmarken Bregma, lambda und der interauralen Linie. Mit Hilfe von Koordinaten aus einer Hirnatlas erhalten können 4 die genaue Position jedes Hirnareal durch die von vorne nach hinten (A / P), medial-lateral (M / L) identifiziert werden kann, und dorsal-ventralen (D / V) Achsen aus bregma / interauralen Linie Kreuzung. Typischerweise Viren in die Gehirne von Mäusen injiziert werden, entweder rot oder grün fluoreszierendes Protein (RFP oder GFP) markiert, so dass Injektionen können durch Fluoreszenzmikroskopie bestätigt. Verhaltens Beurteilungen der Mäuse sind besonders für die Grundlagenforschung von psychiatrischen Störungen nötig. Symptome von psychiatrischen Störungen bei Patienten typischerweise abnorme Verhaltensweisen. Einige dieser Verhaltensweisen des Menschen, sind konserviert und kann direkt imitiert und in der Maus beobachtet werden. Beispielsweise kann Depressionen in der Maus durch Messen behavioral despair modelliert werden. Menschen mit Depressionen often das Gefühl, dass sie nichts tun überhaupt helfen, ein Symptom, das schließlich zum Selbstmord führen können. In Nagetiere, kann dies mit Hilfe der Zwangsschwimmtest (FST), die die Zeitdauer eine Maus schwimmen gegen schwebend in einem Pool von Wasser (als Aufgeben gesehen) misst modelliert werden. Dieses Paradigma wird durch die Rettung des Phänotyps mit Antidepressiva validiert. 7,8,9 Mäuse, die Antidepressiva erhalten haben erheblich weniger Zeit unbeweglich im Vergleich zu unbehandelten Kontrollen zu verbringen. Eine andere Verhaltenstest, der Open Field Test (OFT) wurde entwickelt, um die Fortbewegung in den Mäusen zu bewerten, und zusätzlich kann der ängstliche Phänotyp in Mäusen zu analysieren. 5,6 Dieser Test beruht auf der Prämisse, dass Mäuse fühlen sich sicherer, wenn sie in der Nähe sind an der Wand in einer neuen offenen Feld. Wildtyp-Mäusen werden schließlich entdecken Sie die neue Umgebung, wie sie neugierige Tiere sind. Jedoch weniger Zeit in der Mitte des Feldes zeigt Angst in der Maus, die Maus nicht in der Lage, um die Initia überwindenl Angst auf eine neue Umgebung gebracht. Die Angst der Maus, wie durch die Menge an Zeit in der Mitte ein offenes Feld verbracht quantifizieren kann, um klinische Angst bei Menschen, die in vielen psychiatrischen Störungen vorhanden ist, verglichen werden. Die Kombination von stereo Injektionen Verhaltensparadigmen ist eine neuartige Weise, um die Expression eines bestimmten Gens gezielt Gehirnbereich zu ändern. Die Wirkung von modulierten Genexpression Auslösern kann dann bestimmt werden. Im Gegensatz zur Gesamthirn Knockout ist dieses Verfahren besonders nützlich, da sie Ziele nur bestimmte Hirnareale. Darüber hinaus werden der stereotaktischen Injektionen typischerweise im erwachsenen Wildtyp-Maus durchgeführt wird, also die endogene Genexpression gesamten Entwicklungsstufen beibehalten. Diese Methode wird die Wirkung verwechseln zu vermeiden, wenn das Gen für das Überleben während der embryonalen und postnatalen Entwicklungsphase erforderlich. Eine wichtige Einschränkung ist, dass die Versuchsmäuse gehen müssen through eine invasive Chirurgie, in der die Schädel von Mäusen geöffnet werden. Darüber hinaus wird der Grad der Genmodulation durch den Titer und die Effizienz des Virus bestimmt. Das Virus muss in die richtige Region mit stereotaktischen Koordinaten, die spezielle Instrumente erfordert injiziert werden. Überprüfung der korrekten Injektionsstelle kann nur post mortem durchgeführt werden. Dieses Verfahren wurde früher verwendet, um die Beteiligung eines spezifischen Gens in verschiedenen neurologischen Krankheiten zu prüfen. Zum Beispiel virale vermittelte gerichtete RNAi TH-Gen (die Dopamin synthetisieren können) in die Substantia nigra compacta eingespritzt wird, und den Bewegungsverhaltensanalyse wurde durchgeführt. 10 einer anderen Studie wurden stereotaktische Injektion eines Lentivirus silencing DISC1 Maus Verhalten in Bezug zu beurteilen um Schizophrenie. Knockdown von DISC1 führte zu einer erhöhten Fortbewegung in Reaktion auf die Neuheit (Parallelen positive Symptome der Schizophrenie) und größer Unbeweglichkeit in derFST. 11 In ähnlicher Weise eine weitere Studie ergab, dass 5-HT 1B Expression zu erhöhten Explorationsverhalten im OFT, konsistent mit einem Anti-Angst-Phänotyp mit dieser Methode. 12 Stereotaktische Injektionen können cre Virus zu liefern, um die Rekombination in cre-loxP-Mäusen zu induzieren . Diese Methode wurde verwendet, um die Y2-Rezeptor in die Amygdala und der Bettkern der Stria terminalis selektiv zu löschen. Auf Verhaltensanalyse wurden diese Mäuse mit einem anti-depressive Phänotyp, wenn das Gen in der zentralen Amygdala gelöscht gefunden, aber keine Phänotyp, wenn das Gen in die basolaterale Amygdala oder Bett Kern der Stria terminalis gelöscht. 13. Somit ist diese Technik bietet ein einzigartiges Werkzeug, um die genetischen Auswirkungen auf die Tierverhalten zu studieren.

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	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
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	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:107px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Stereotactic Apparatus item 51725</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">51725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Quintessential stereotaxic pump&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">53311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Injection Styringe, 65 RN</td>
			<td style="width:107px;">Hamilton</td>
			<td style="width:119px;">7633-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMEM</td>
			<td style="width:107px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D5796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">PEI&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Polysciences Inc.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">23966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scissors</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Blunt end forceps</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Needle holder&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Drill</td>
			<td style="width:107px;">Ram Products Inc</td>
			<td style="width:119px;">Microtorque control box, Tech2000 handpiece</td>
			<td>with pedal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glass bead sterilizer</td>
			<td style="width:107px;">Inotech&#160;</td>
			<td style="width:119px;">IS-400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbable sutures&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Unify</td>
			<td style="width:119px;">M-K518r19</td>
			<td>Absorbable, reverse cutting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton swabs</td>
			<td style="width:107px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">89031-270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Heating pad</td>
			<td style="width:107px;">Gaymar</td>
			<td style="width:119px;">T-pump TP-500 PN11184-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Artificial tears</td>
			<td style="width:107px;">Rugby</td>
			<td style="width:119px;">NDC 0536-6550-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disposable syringe</td>
			<td style="width:107px;">BD Syringe</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309623</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cloth</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Gloves&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Ansell</td>
			<td style="width:119px;">Senseitouch #7823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Avertin or other anesthetic</td>
			<td style="width:107px;">see recipe citation</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ketoprofen or other analgesic</td>
			<td style="width:107px;">see veternarian&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking software</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Ethovision XT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking Camera</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Media Recorder</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

applying stereotactic injection technique to study genetic effects on animal behaviors

Stereotaktische Injektion ist eine nützliche Technik, um hohe Titer Lentiviren gezielt Gehirnbereiche in Mäusen zu liefern. Lentiviren kann entweder überexprimiert oder Zuschlags Genexpression in einer relativ fokussierten Bereich ohne signifikante Schädigung des Gehirngewebes. Nach der Wiederherstellung kann der eingespritzte Maus auf verschiedene Verhaltens Aufgaben wie die Open Field Test (OFT) und Forced Swim Test (FST) getestet werden. OFT ist entworfen, um die Fortbewegung und die bestrebt Phänotyp bei Mäusen durch Messung der Menge an Zeit, die eine Maus in die Mitte einer neuen offenen Feld ausgibt beurteilen. Ein ängstlicher Maus wird deutlich weniger Zeit in der Mitte des Romans Feld im Vergleich zu Kontrollen zu verbringen. Die FST beurteilt die anti-depressive Phänotyp durch Quantifizieren der Menge an Zeit, die Mäuse verbringen unbeweglich, wenn sie in einen Eimer Wasser gegeben. Eine Maus mit einer antidepressiven Phänotyp signifikant weniger Zeit unbeweglich Vergleich zu Kontrolltieren zu verbringen. Ziel dieses Protokolls ist es, die ster verwendeneotactic Injektion eines Lentivirus in Verbindung mit Verhaltenstests zu beurteilen, wie genetische Faktoren modulieren tierischen Verhaltensweisen.

<html> Genaue stereotaktische Injektion stützt sich stark auf die Einstellung der richtigen Koordinaten. Die Spitze der Nadel verwendet, um das Virus zu injizieren sollte direkt an der Kreuzung der Bregma und der interauralen Linie (Abbildung 1) eingestellt werden. Es ist hilfreich, ein Stereomikroskop verwenden, um festzustellen, ob die Nadel richtig sitzt. Beim Blick durch das Mikroskop, sollte die Nadel positioniert werden, dass, wenn das Virus injiziert wurden, wäre es direkt an der Kreuzung der Br...

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Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

Stereotaktische Injektion von Lentiviren ausdrücken cDNAs oder shRNAs die Genexpression in spezifischen Hirnarealen von Mäusen zu modulieren. Hier präsentieren wir ein Protokoll zur stereotaktischen Injektionen mit Verhaltensaufgaben, wie der Open Field Test (OFT) und Forced Swim Test (FST) zu kombinieren.

Anwenden Stereotaktische Injektionstechnik zu genetischen Auswirkungen auf die Tier Behaviors Studie

Stereotactic injection is a useful technique to deliver high titer lentiviruses to targeted brain areas in mice. Lentiviruses can either overexpress or ...

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Research

JoVE Journal

Behavior

14.0K Aufrufe.  The Pennsylvania State University.  Stereotaktische Injektion von Lentiviren ausdrücken cDNAs oder shRNAs die Genexpression in spezifischen Hirnarealen von Mäusen zu modulieren. Hier präsentieren wir ein Protokoll zur stereotaktischen Injektionen mit Verhaltensaufgaben, wie der Open Field Test (OFT) und Forced Swim Test (FST) zu kombinieren. 

Serie: Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

Stereotactic Injection of MicroRNA-expressing Lentiviruses to the Mouse Hippocampus CA1 Region and Assessment of the Behavioral Outcome

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an entire gene expression pathway by inducing destruction and/or inhibiting translation of these targets. Several miRNAs play key roles in maintaining neuronal structure and function and in higher-level brain functions, and methods are sought for manipulating their levels for exploring these functions. Here, we present a direct in vivo method for examining the cognitive consequences of enforced miRNAs excess in mice by stereotactic injection of miRNA-encoding virus particles. Specifically, the current protocol involves injection into the hippocampal CA1 region, which contributes to mammalian memory consolidation, learning, and stress responses, and offers a convenient injection site. The coordinates are measured according to the mouse bregma and virus perfusion is digitally controlled and kept very slow. After injection, the surgery wound is sealed and the animals recover. Lentiviruses encoding silencers of the corresponding mRNA targets serve to implicate the specific miRNA/target interaction responsible for the observed effect, with na&iuml;ve mice, mice injected with saline and mice injected with "empty" lentivirus vectors as controls. One month post-injection, the animals are examined in the Morris Water Maze (MWM) for assessing their navigation learning and memory abilities. The MWM is a round tank filled with colored water with a small platform submerged 1 cm below the water surface. Steady visual cues around the tank allow for spatial navigation (sound and the earth's magnetic field may also assist the animals in navigating). Video camera monitoring enables measuring the route of swim and the time to find and amount the platform. The mouse is first taught that mounting the hidden platform offers an escape from the enforced swimming; it is then tested for using this escape and finally, the platform is removed and probe tests examine if the mouse remembers its previous location. Repeated tests over several consecutive days highlight improved performance of tested mice at shorter latencies to find and mount the platform, and as more direct routes to reach the platform or its location. Failure to show such improvement represents impaired learning and memory and/or anxiety, which may then be tested specifically (e.g. in the elevated plus maze). This approach enables validation of specific miRNAs and target transcripts in the studied cognitive and/or stress-related processes.

MicroRNAs have significant roles in brain structure and function. Here we describe a method to enforce hippocampal miRNA over-expression using stereotactic injection of an engineered miRNA-expressing lentivirus. This approach can serve as a relatively rapid way to assess the in vivo effects of over-expressed miRNAs in specific brain regions.

Stereotaktische Injektion von microRNA-exprimierenden Lentiviren der Maus Hippocampus CA1 Region und Beurteilung der Behavioral Outcome

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an ...

Forschung

Verhalten

A Within-subjects Experimental Protocol to Assess the Effects of Social Input on Infant EEG

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants socially interact. Electroencephalography (EEG) power is an advantageous technique to assess infant functional neural activation. However, many studies record infant EEG only during one baseline condition. This protocol describes a paradigm that is designed to comprehensively assess infant EEG activity in both social and nonsocial contexts as well as tease apart how different types of social inputs differentially relate to infant EEG. The within-subjects paradigm includes four controlled conditions. In the nonsocial condition, infants view objects on computer screens. The joint attention condition involves an experimenter directing the infant's attention to pictures. The joint attention condition includes three types of social input: language, face-to-face interaction, and the presence of joint attention. Differences in infant EEG between the nonsocial and joint attention conditions could be due to any of these three types of input. Therefore, two additional conditions (one with language input while the experimenter is hidden behind a screen and one with face-to-face interaction) were included to assess the driving contextual factors in patterns of infant neural activation. Representative results demonstrate that infant EEG power varied by condition, both overall and differentially by brain region, supporting the functional nature of infant EEG power. This technique is advantageous in that it includes conditions that are clearly social or nonsocial and allows for examination of how specific types of social input relate to EEG power. This paradigm can be used to assess how individual differences in age, affect, socioeconomic status, and parent-infant interaction quality relate to the development of the social brain. Based on the demonstrated functional nature of infant EEG power, future studies should consider the role of EEG recording context and design conditions that are clearly social or nonsocial.

This novel protocol is designed to assess the neural bases of social interaction in infants. The paradigm is designed to tease apart how various social inputs such as language, joint attention, and face-to-face interaction relate to infant neural activation. Infant EEG power is recorded during both social and nonsocial conditions.

Ein Innersubjekt experimentelles Protokoll die Auswirkungen von Social Input auf Infant EEG zur Beurteilung

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

Testen tierische Angst bei Ratten: Auswirkungen der offenen Arm Gesimsen und geschlossenen Arm Wand Transparenz in erhöhter Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

Assessment of Social Transmission of Food Preferences Behaviors

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy aging groups. For example, olfactory dysfunction in AD can present as impairment in olfactory recognition, emerging during early stages of the disease and worsening while the disease progresses. The social transmission of food preferences (STFP) task is based on a rudimentary form of communication between rodents concerning distant foods dependent on the transmission of olfactory cues. Healthy wild-type mice would prefer to eat a novel, flavored food that was previously cued by a conspecific, and this food preference would be hampered in transgenic AD mice, such as the APP/PS1 model. Indeed, a strong preference for the cued food in C57Bl6/J mice of 3 months of age was found, and this was reduced in 3 months old transgenic APP/PS1 mice. In summary, STFP task could be a powerful measure to be integrated in present subclinical detection assays of AD.

This paper presents a protocol for the investigation of social transmission of food preference in mice. The advantages and possible applications for this procedure, for instance, in detecting early changes in AD mouse models, are highlighted. To conclude, interpretation of the results in light of critical details are discussed.

Bewertung der sozialen Übertragung von Essen Vorlieben Verhaltensweisen

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk for both the animals and the hands of their handlers, decreased animal welfare, and less valid research data. To minimize negative effects on experimental results and human-animal relationships, research animals are often habituated to being handled. However, the methods of habituation are highly variable and often of limited effectiveness. More potently, it is possible for humans to mimic aspects of the animals&#39; playful rough-and-tumble behavior during handling. When applied to laboratory rats in a systematic manner, this playful handling, referred to as tickling, consistently gives rise to positive behavioral responses. This article provides a detailed description of a standardized rat tickling technique. This method can contribute to future investigations into positive affective states in animals, make it easier to handle rats for common husbandry activities such as cage changing or medical/research procedures such as injection, and be implemented as a source of social enrichment. It is concluded that this method can be used to efficiently and practicably reduce rats&#39; fearfulness of humans and improve their welfare, as well as reliably model positive affective states.

This article demonstrates the standardized application of playful handling, a tickling technique designed to mimic rat rough-and-tumble play. This technique is effective at reducing fearful reactions to humans and generating positive affect when rats are handled for common husbandry activities and medical and research procedures such as injection.

Kitzeln, eine Technik zur Induktion positiven Einfluss beim Umgang mit Ratten

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Using a Classroom-Based Deese Roediger McDermott Paradigm to Assess the Effects of Imagery on False Memories

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the accuracy of memories. The purpose of the method presented here was to induce false memories using lists of either semantically or phonologically related words and to assess the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. To do this, we used a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm. We adapted word lists from previous DRM studies to suit imagery procedures and created an automated presentation to present the word lists in classroom settings. We then recruited undergraduate classes and instructed some of the classes to create mental images of the list words as they were being presented, while instructing the other classes to simply remember the words. The automated presentation presented word lists to participants, one word at a time, alternating between phonologically and semantically related lists. Participants used paper-pencil recall packets to immediately recall list items, complete a distractor activity, and take a subsequent final recognition test. Often, participants immediately recalled and later recognized words that were related to the list items but were not actually presented; these are known as critical lures and indicate a false memory. The protocol detailed here describes a four-step procedure - list presentation, immediate recall, distractor phase, and final recognition - that can assess the effects of list type and imagery instruction within the DRM paradigm on memory. The automated nature of the list presentation provides the ability to systematically vary variables of interest, and the paper and pencil method of data collection affords an easily accessible method for collecting data in classroom settings. The protocol also offers options to modify the procedure to a more traditional DRM paradigm without imagery and/or list type manipulations. The use of this protocol can provide results relevant to both classroom learning and cognitive science principles.

The method presented here induced false memories using lists of related words and also assessed the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. This protocol details a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm.

Ein Klassenzimmer-basierte Pseudoerinnerungen Roediger McDermott Paradigma bei der Beurteilung der Auswirkungen von Bilddaten auf falsche Erinnerungen

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the ...

Assessing the Coherence of Parents' Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with parents. This paper focuses on such a method, namely Five-Minute Speech Sample-Coherence (FMSS-Coherence). In this method, a parent is asked to speak for five uninterrupted minutes about her/his child and their relationship. The resulted narrative is coded for coherence, namely the extent to which the parent provides&#160;in the narrative&#160;a clear, consistent, multidimensional and well-supported portrayal of the child. FMSS-Coherence is based on attachment research that shows that the coherence of parents&#8217; narratives is indicative of the quality of the parent-child relationship and child adjustment. It overcomes the limitations of attachment narrative measures which are typically labor intensive. FMSS-Coherence is less nuanced than extant attachment narrative measures. Yet, studies of families from different cultural backgrounds, across different child ages and in the context of typically developing children as well as children with special needs suggest that coherence can be reliably evaluated using the FMSS procedure. Furthermore, parents&#8217; FMSS-Coherence is associated with parenting quality and children&#8217;s socio-emotional adjustment. Thus, it holds promise for researchers and practitioners who seek a relatively time- and cost-effective method for assessing the coherence of parents&#8217; narratives regarding their child.

Assessing the Coherence of Parents&#039; Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

This paper introduces a method for assessing the coherence of parents' short narratives regarding their child and their relationship using the five-minute speech sample procedure.

Beurteilung der Kohärenz der kurzen Erzählungen der Eltern über ihr Kind mithilfe des fünfminütigen Sprachbeispielverfahrens

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with ...

Applying an eMASS Customization Program as a Research Tool to Evaluate Consumer Benefits

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization through marketing technology. The purpose of this study is to examine how to conduct consumer research using an online survey and analysis of data. This study examines consumers&#39;&#160;perceived benefits while customizing a product as well as emotional product attachment, attitudes toward a customization program, and loyalty intentions in the context of online retailing. In addition, this study investigates how consumer responses are different based on individual characteristics such as fashion innovativeness. An online survey company in South Korea recruited 290 female apparel shoppers who purchased apparel online. To enhance external validity, this study used an existing retail website with a well-established mass customization program. After completing the customization program, participants complete the online questionnaire. Structural equation modeling (SEM) and latent mean analyses (LMAs) are then performed for analyses. This study stresses the importance of testing measurement invariance for mean comparisons. Before the SEM and LMA, this study follows the hierarchy of invariance tests (configural invariance test, metric invariance test, and scalar invariance test), which are not considered by traditional approaches such as ANOVA. These statistical analyses provide applicability of the invariance test procedures and LMA to consumer behaviors. The conclusions of mean differences have integrity and validity because they are guided by a sophisticated statistical procedure to ensure measurement invariance.

Presented here is a protocol to examine consumer responses toward mass customization in the context of online retailing. The protocol details the online survey procedure and how to analyze data using structural equation modeling and group differences using latent mean analyses.

Anwenden eines eMASS-Anpassungsprogramms als Forschungstool zur Bewertung der Vorteile der Verbraucher

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization ...

An Experimental Paradigm for Measuring the Effects of Ageing on Sentence Processing

Previous studies have found that older adults have greater difficulties in processing syntactically complex sentences than younger adults. However, the exact regions where the difficulties arise have not been fully identified. In this study, a maze task was implemented to investigate how older adults and younger adults differentially processed two types of sentences with different levels of syntactic complexity, namely subject relative clauses and object relative clauses. Participants were asked to choose between two alternatives at each segment of the sentences. The task required participants to engage in a strictly incremental mode of processing. The reading times for each segment were recorded, allowing the quantification of the difficulty of sentence reading. The task allowed us to identify the exact locations of the processing difficulty and thus facilitate a more accurate assessment of the age-related decline in sentence processing. The results indicate that the effect of ageing was found mainly at the head nouns, but not at other regions of the sentences, a finding which suggests that the maze task is an effective method to identify the exact location of the ageing effect on sentence processing. The implications of this experimental paradigm for investigating the effect of ageing on sentence processing are discussed.

Here, we present a protocol to examine the age-related decline in sentence processing using a maze task that allowed us to localize the processing difficulty at each word of the sentences during reading.

Ein experimentelles Paradigma zur Messung der Auswirkungen des Alterns auf die Satzverarbeitung

Previous studies have found that older adults have greater difficulties in processing syntactically complex sentences than younger adults. However, the ...

The Use of Traditional Fear Tests to Evaluate Different Emotional Circuits in Cattle

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli may facilitate breeding selections and identify animals that are better suited to specific management strategies. Multiple tests have been developed to evaluate cattle temperament (e.g., exit velocity, chute score, pen score, open field test, startle test, bovine zero maze), but each of these tests evaluates the animal&#39;s response to different stimuli (e.g., isolation, novel environment, startle, willingness to enter an enclosed area). Cattle temperament has been observed to be relatively stable over time. However, the evaluation of temperament has the potential to be influenced by current conditions, previous experiences, and observer bias. Many of these temperament tests have been improperly categorized as fear tests and have also been criticized for being subjective. This paper provides a framework for standardizing behavioral tests for cattle and suggests that these different evaluations assess different aspects of the animal&#39;s overall temperament.

Here, we present a protocol to conduct a variety of behavioral tests in cattle that have been designed to evaluate emotions. A battery of behavioral tests (open field test, startle test, bovine zero maze, exit velocity, pen score, and chute score) were conducted to evaluate different components of animal temperament.

Der Einsatz traditioneller Angsttests zur Bewertung verschiedener emotionaler Schaltkreise bei Rindern

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli ...