Die Autoren möchten bestätigen die Mitarbeiter und Forschungspersonal, die in den Umgang mit Kaninchen und Anästhesie Training Sessions für ihr Feedback beim Erlernen dieser Technik Intubation teilgenommen haben.

die Intubation Verfahren unten beschriebenen wurde von der Mayo Klinik institutionelle Animal Care und Einsatz-Ausschuss genehmigt.
 1. Vorbereitung ( Abbildung 1) <ol><li>erhalten einen 5 französischen Polypropylen Katheter und nicht gerundeten Ende geschnitten, so dass die Gesamtlänge beträgt 8 bis 10 Zoll. Markieren Sie das abgeschnittene Ende des Schlauches, klar anzugeben, welche Ende sollte nicht in die Luftröhre (Pfeil, Abb. 1) eingefügt werden.</li>
	<li>Legen Sie eine Größe 0 oder 1 Miller Laryngoskop Klinge auf das Laryngoskop und stellen Sie sicher, dass das Licht funktioniert.</li>
	<li>0,25 mL 2 % Lidocain in eine 1 mL Spritze ziehen.</li>
	<li>Zum Jahresende eine entsprechend dimensionierte uncuffed endotracheal Schlauch (in der Regel 2,5-4,0 mm ID) steriles Gleitmittel zuweisen.</li>
	<li>Lieferungen für den Endotrachealtubus in Platz zu sichern, sobald es ist (z. B. Nabelschnur Band) eingelegt vorzubereiten.</li>
	<li>Erhalten ein Gerät um Luftstrom am Ende des Verfahrens zur Bestätigung der erfolgreichen Intubation (#5, Abbildung 1) zu erkennen. Dies ist Optional.</li>
</ol> 2. Narkose <ol><li>verwalten injizierbaren Anästhesie, z. B. 35 mg/kg Ketamin und 5 mg/kg Xylazin intramuskulär mit einer 3 mL Spritze mit einer 25 Gauge-Nadel in der Quadrizeps-Muskel des Hinterbeines eine ca. 4 Monate alt, 3,0-3,5 kg, New Zealand White Kaninchen. 
	Hinweis: Diese Narkose Therapie ist eine häufig verwendete injizierbaren Kombination bei jungen, gesunden und spezifische Erreger-freie Forschung Kaninchen, aber basierend auf den klinischen Zustand und/oder experimentelle Ziele, ein anderes Protokoll möglicherweise besser geeignet.</li>
	<li>Nachdem die Kaninchen betäubt ist, anwenden, ophthalmologische steriles Gleitmittel für die Augen, das Hornhautgewebe zu bewahren.</li>
</ol> 3. Endotracheale Intubation <ol><li>Maßnahme den Endotrachealtubus aus der Schneidezähne, die thorakalen Einlass auf die richtige Länge zum Einführen des Endotrachealtubus zu bestimmen. Platzierung am Ende des Rohres auf der Ebene der thorakalen Zulauf sichert zu, dass die Röhre Öffnung vorbei an den Kehlkopf aber kranial an der trachealen Bifurkation ist.</li>
	<li>Positionieren Sie die Kaninchen sternally auf dem Vorbereitungstisch mit seinen Kopf leicht über den Rand der Tabelle ( Abbildung 2) erweitert. Die Kaninchen sollte positioniert Quadrat mit Kopf und Wirbelsäule in gerader Ausrichtung.</li>
	<li>Den Kopf anheben, einem Tupfer verwenden, um das Kaninchen ziehen &#39; s Zunge seitlich an den Hasen &#39; s rechten unteren Schneidezähne (im Diastema), kümmert sich um Trauma aus der Schneidezähne zu vermeiden.</li>
	<li>Fassen Sie das Laryngoskop und Klinge mit der rechten Hand und legen Sie sie in den Mund hinter den Schneidezähnen, Eingabe aus dem Kaninchen &#39; s links.</li>
	<li>Das Dach des Mundes mit der Spitze des Messers in einer kaudalen Richtung folgen, bis das Gaumensegel sichtbar ist.</li>
	<li>Mit der rechten Hand Tipp das Laryngoskop vorwärts (Biegung des Handgelenks, hält das Laryngoskop nach unten) und erweitert die Kaninchen &#39; s Kopf in den Nacken und den Hals nach vorn, um eine offene Atemwege pflegen und Anzeigen des Kehlkopfes ( Abbildung 3 (A). als obligat nasale Verschnaufpausen, der Kehldeckel ist oft oberhalb der weiche Gaumen und Verwendung dieser Methode komprimiert den Zungengrund zu verdrängen die Epiglottis und Aussetzen der Stimmritze. Um Sauerstoff Entsättigung zu verhindern, es ist wichtig, um den Hals verlängert wie beschrieben um eine offene Atemwege während der Intubation erhalten.</li>
	<li>Lösen die Zunge und die Laryngoskop Klinge für die linke Hand die Rechte Hand für die Platzierung des Katheters Führer frei zu wechseln.</li>
	<li>Und halten das Laryngoskop und Blick von der Stimmritze ( Abbildung 3 B), fördern die abgerundete Spitze des Katheters Führer durch die Öffnung hinter dem Kehlkopf ( Abbildung 4 ). Der Katheter wird zum natürlichen Stillstand bei der trachealen Bifurkation kommen.</li>
	<li>Unter Beibehaltung von den Führungskatheter halten, fassen Sie den Endotrachealtubus und fädeln Sie ihn über den Katheter, kümmert sich nicht um Kraft für den Katheter zu übernehmen, durch den Fang es auf dem Endotrachealtubus-Stecker. Das Rohr schieben, bis es Widerstand der Stimmbänder ( Abbildung 5 gibt).</li>
	<li>0,25 mL 2 % Lidocain in die Öffnung des Endotrachealtubus zu vermitteln. Die Lidocain reist hinunter den Endotrachealtubus zu lokal zu betäuben, die Stimmbänder, verhindern Stimmritzenkrampf 22 ( Abbildung 6).</li>
	<li>Können etwa zwei Minuten für die topische Anästhesie wirksam, und gehen durch sanft drehen den Endotrachealtubus, voran es durch die Stimmbänder ( Abbildung 7). Sobald das Rohr die Stimmbänder verstrichen ist, entfernen Sie das Laryngoskop Klinge und Katheter, kümmert sich nicht um das Rohr zu verdrängen.</li>
	<li>Verify Platzierung des Endotrachealtubus durch Beobachtung Luftstrom. Es gibt mehrere Möglichkeiten zur Verfügung, einschließlich der Platzierung eines Gewebes oder Pelz am Ende des Rohres, Luftstrom, auf der Suche nach Beschlagen des Rohres oder Beschlagen der einen Glasspiegel am Ende des Rohres und Zuhören für Luftstrom zu erkennen. Geräte, die Luftstrom 23 oder Atmungen erkennen kann ( Abbildung 8) verwendet, um festzustellen, ob Intubation war erfolgreich (siehe Materialtabelle für Optionen). Sichern Sie den Endotrachealtubus mit eine bevorzugte Methode, z. B. Nabelschnur Band um das Rohr und Kopf gebunden. Befestigen Sie die Anästhesie-Schaltung und Auscult beide Seiten des Thorax wobei Atemzüge zu Belüftung auf beiden Seiten der Lunge zu versichern.</li>
</ol>

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Die Autoren haben nichts preisgeben.

Hier bieten wir eine detaillierte Beschreibung eines Kaninchens Intubation-Technik, die leicht in jeder klinischen Situation bewältigt werden kann. Diese Technik ähnelt dem zuvor veröffentlichten direkte Visualisierung Techniken10,15,20,25 mit einige zusätzliche Verfeinerungen, einschließlich Verwendung von einer 3,5 mm Cuff endotracheal Schlauch und eine 5 französische Blasenkatheter, wie unsere gewählten Führer, geschnitten und mit einem wasserfesten Stift auf das abgeschnittene Ende markiert wurde. Die Kaninchen Luftröhre ist leicht anfällig für Verletzungen und damit die uncuffed Endotrachealtuben wird im Allgemeinen empfohlen wenn Kaninchen Sondenschaft um Schäden an der trachealen Schleimhaut durch den Druck der Manschette. 26 der 5 französischen Blasenkatheter wählten wir als Leitfaden klein genug, um die Stimmlippen leicht durchdringen, ohne die Sicht zu behindern, während direkte Visualisierung des Kehlkopfes. Während die kleinen ist dieser Katheter steif genug, um als Leitfaden für den Endotrachealtubus in Kraft bleiben. Die distale Spitze des Katheters ist abgerundet, um Traumata zu reduzieren, wenn die Bifurkation erreicht ist. Das proximale Ende des Katheters wird geschnitten, so dass der Katheter ist eine praktikable Länge (nicht übermäßig lange) und am Ende zu entfernen, das zur Befestigung an einer Spritze erweitert. Das abgeschnittene Ende zeichnet sich mit permanent-Marker als eine visuelle Anzeige, nicht diesem Zweck in der Luftröhre, anzugeben, die die trachealen Schleimhaut schädigen können.
Die größte Einschränkung dieser Technik ist, dass da die Verwendung von einem Laryngoskop Klinge erforderlich ist, möglicherweise es nicht für sehr junge Kaninchen oder sehr kleine Rassen aufgrund kleiner Mund Größe machbar. Darüber hinaus haben einige Einrichtungen nicht diese Größe von Laryngoskop Klinge leicht verfügbar. Institution des Autors diese Methode ist für New Zealand White (≥6 Wochen) und Erwachsenen niederländischen Belted Kaninchen verwendet, aber wir haben nicht versucht, diese Methode bei jüngeren Tieren oder kleinere Rassen. In Situationen soll wo die Kaninchen-Patienten gering ist, oder wenn ein Laryngoskop mit einer kleinen Miller Klinge nicht verfügbar ist, ist eine alternative Option handheld Otoskop, anstatt das Laryngoskop verwenden. 15 , 20 mit einem Otoskop mit einem #5 Ohr Spekulum, der Kehlkopf wird visualisiert, der Führungskatheter befindet sich durch direkte Visualisierung und das Spekulum wird entfernt, bevor Sie die gleichen Schritte wie oben beschrieben fortfahren.
Es ist wichtig, sorgfältig zu verwenden, wenn der Führungskatheter gelegt wird, um zu vermeiden die Möglichkeit des Trauma oder Bronchospasmus verursachen, da das Ende des Katheters in die Luftröhre gelangt und die trachealen Bifurkation berührt. Das Risiko dieser Komplikationen kann reduziert oder vermieden durch Fütterung des Katheters mit sehr sanften Bewegungen, sobald gibt es Widerstand und Bewegung des Kopfes und des Halses zu vermeiden, sobald der Katheter eingeführt ist. Darüber hinaus Wenn endotrachealen Schlauch über den Katheter voran, gibt es das Potenzial für den Katheter auf dem Endotrachealtubus-Connector zu fangen. Daher ist es wichtig, sicherzustellen, dass der Katheter über den Connector ohne Fang gleitet; Alternativ kann die Stecker entfernt und ersetzt, wenn der endotracheal Sicherung Rohr oder Anhängen an die Narkose Schaltung.
Bei jeder Methode der Intubation ist das Potenzial für Komplikationen und Nebenwirkungen. Durch die direkte Visualisierung-Methode mit einem Laryngoskop kann unsachgemäße Einfügung Laryngoskop Klinge oder aggressive Platzierung des Endotrachealtubus führen, Kehlkopf, Zunge oder Zahn-Verletzungen. Korrekte Positionierung des Tieres ist der erste wichtige Schritt Trauma während der Visualisierung des Kehlkopfes zu minimieren. Die Wirbelsäule sollte gerade, mit dem Kopf in direkte Ausrichtung mit der Wirbelsäule; Wenn das Tier nicht gerade ist oder der Hals nach links oder rechts verdreht ist, dies wird Visualisierung des Kehlkopfes schwieriger machen und verursachen übermäßige Trauma mit dem Laryngoskop Klinge. Eine weitere wichtiger Schlüssel zum Erfolg dieser Technik ist das Dach des Mundes gegen den Kehlkopf zu folgen, und sobald der weiche Gaumen visualisiert wird, verlagern die Klinge in die richtige Position durch Biegen am Handgelenk. Dies hält den Kopf im Ort, während der Bewegung der Blattspitze in optimale Betrachtungsposition der Stimmbänder, die liegen ganz ventralen Kaninchen20,24.
Da direkter Visualisierung des Kehlkopfes schwierig ist, wenn die präzise Techniken, die, denen wir oben skizzieren, nicht befolgt werden, kann die Verwendung von alternativen Intubation Strategien, die keine Visualisierung des Kehlkopfes ansprechend sein. Die blinde Technik ist beispielsweise eine mögliche Option, die nicht erfordert ein Laryngoskop16,17,18,19,20. Jedoch Verwendung dieser Technik beruht auf der Fähigkeit, Luftstrom durch den Endotrachealtubus zu erkennen, um die Platzierung des Rohres zu lenken, und wenn das Tier atmet sehr flach oder verhaftet sind, ist die Verwendung dieser Methode nicht zuverlässig. Supraglottic Geräte können auch betrachtet werden, da die Platzierung dieser Geräte erfordert keine Visualisierung des Kehlkopfes und sie sind in der Regel sehr einfach zu platzieren. Diese Geräte nicht direkt betreten der Luftröhre, jedoch und somit besteht die Möglichkeit, aus Mangel an direkten Fluss der Atemwege, Unfähigkeit zu lüften, wenn Stimmritzenkrampf entwickelt, Fehlen einer Dichtung fest genug für Belüftung bei offenen Brust Eingriffen oder Notfall Wiederbelebung und Entwicklung von gastrischen Beckenklänge3,4,8. Neuere Geräte speziell für Kaninchen können eine viel versprechende Alternative bieten, aber weitere Studien sind notwendig, um diese Geräte zu bewerten, und bleiben die Bedenken bezüglich des Eintritts in die Luftröhre. Magen-Beckenklänge kann auch eine mögliche Komplikation bei einem intubierten Tier sein, wenn der Endotrachealtubus versehentlich in die Speiseröhre gelegt wird; jedoch minimiert eine direkte Visualisierung Technik das Risiko dieser Komplikation durch die richtige Platzierung des Katheters Führer in den Kehlkopf zu überprüfen.
Trauma auf die Arytenoid und/oder trachealen Schleimhaut ist eine weitere mögliche Sorge, wenn einen endotrachealen Schlauch einlegen, besonders wenn mit aufblasbaren Schläuchen26,27,28gefesselt. Die Luftröhre bei Kaninchen kann leicht verletzt werden, führen kann zu Komplikationen wie subkutanes Emphysem, Pneumothorax und sogar zum Tod10,27,28,29. Während der Durchführung der Technik, die wir hier beschreiben, sollte darauf geachtet werden, trachealen Verletzungen durch Verwendung von uncuffed Endotrachealtuben, sicherzustellen, dass die abgerundete Spitze des Katheters Reiseführer in die Luftröhre eingelegt wird, und nicht zwingen den Führungskatheter in die Stimmritze. Darüber hinaus ist die Auswahl an eine entsprechend dimensionierte endotracheal Schlauch von entscheidender Bedeutung. Endotracheal Schlauchgröße sollte sein gegen die Größe des Tieres in Betracht gezogen, als auch im Vergleich zur Eröffnung der Kehlkopf Zulauf, da es im Durchmesser kleiner als der Luftröhre ist. Ein endotrachealer Schlauch zu groß im Durchmesser kann Trauma Arytenoid Schleimhaut oder Knorpel führen. Auf der anderen Seite, Verwendung von einem kleineren endotracheal Schlauch führt zu erhöhter Atemwegswiderstand und erhöht die Chancen der Obstruktion durch Schleim oder einen Knick. Aus diesem Grund ist es sehr wichtig bei intubierten Kaninchen, Atemwege Überwachung. Neben Pulsoximetrie sollten Messung des Luftflusses eingesammelt werden.d mit Kapnografie; Wenn eine Capnograph nicht verfügbar ist, sind Atemwege Monitore eine Alternative, die kann verwendet werden, um den Luftstrom zu erkennen (bieten jedoch keine Messungen der ausgeatmete Kohlendioxid). Bestimmung der Beatmung kann darüber hinaus wertvoll, vor allem in Fällen, in denen kleinere Durchmesser Rohre gebrauchte24,30 sind.
Zusätzlich zu den bereits erwähnten Vorteilen der Verwendung dieser Technik ist ein weiterer großer Vorteil dieser Methode, dass es von einer einzigen Person ohne die Notwendigkeit für einen Assistenten ausgeführt werden kann, was in einem belebten klinischen Umfeld wichtig sein kann. In diesem Fall ist es wichtig, alle notwendigen Vorräte zu sammeln und sie leicht zu erreichen bei der Intubation, vor allem, wenn der Führungskatheter befindet sich in Ort und Bewegung des Kopfes vermieden werden sollte.
Die Technik, die wir hier beschreiben wird durch die Veterinär- und Forschung Mitarbeiter in unserer Einrichtung für alle Kaninchen Teilnehmer, welche beläuft sich auf ca. 200-400 Teilnehmer pro Jahr verwendet. Es ist sehr leicht in einer typischen Kaninchen-Anästhesie-Trainingseinheit gelehrt, die dauert ca. 30 Minuten. Wir haben festgestellt, dass es relativ leicht zu erlernen, mit Studenten, die es innerhalb der ersten 3 Versuche und in der Regel in der Lage zu lernen, wiederholen Sie den Vorgang erfolgreich in die nächste weiteren Versuch. Für zukünftige Studie wäre es wertvoll, Zeit, Kompetenz und Fähigkeit zur Aufrechterhaltung der Leistungsfähigkeit im Laufe der Zeit für diese Methode im Vergleich zu anderen Intubation zu vergleichen. Während dies für die Variationen des blinden Techniken16untersucht hat, wurde eine umfassende Bewertung der Lernkurve für eine Vielzahl von Intubation Techniken noch nicht durchgeführt. Eine weitere potenzielle künftige Ausrichtung der Studie könnte umfassen direkte Endotracheale Intubation, die neueren artspezifische Supraglottic Atemwege Geräte, insbesondere im Hinblick auf Funktion bei Überdruckbeatmung zu vergleichen.
Abschließend die Technik für die Intubation von Kaninchen, die wir hier beschreiben ist nicht-invasiv, zuverlässig, erfordert nicht die Verwendung von Spezialausrüstungen, ist leicht zu beherrschen und kann von einer einzigen Person ohne die Notwendigkeit eines Assistenten durchgeführt werden. Alle Atemwege Zugriffstechniken präsentieren eine gewisse Gefahr, aber durch die Verwendung einer direkten Visualisierungstechnik und Anschluss an die Schritte, die, denen wir oben beschrieben, um Komplikationen zu minimieren, die Risiken sind bei weitem übertroffen durch die Vorteile, die eine angemessene Atemwege während der Narkose.

Kaninchen haben einen schmalen, tief oralen Hohlraum, der Sichtbarkeit des Kehlkopfes für Endotracheale Intubation einschränkt. Sie haben auch eine sehr große fleischige Zunge und Backenzähne, die in Verbindung mit der schmalen Mundhöhle kann Probleme verursachen, wenn ein Laryngoskop einfügen und Visualisierung der Stimmritze einen endotracheal Schlauch1einfügen. Große Vorsicht ist geboten, um zu vermeiden, Verletzungen der Mundhöhle und Atemwege verursachen, beim Intubation. Der Kehlkopf Gewebe sind sehr brüchig und übermäßige Trauma aus wiederholte Versuche, Intubation kann erhebliche Entzündung, so dass Intubation schwieriger2.
Aus diesen Gründen wurde eine Vielzahl von alternativen Techniken beschrieben, vor allem Supraglottic Atemwege Geräte einschließlich der Larynx Rohr3,4, der Kehlkopf Maske Atemwege (LMA)4,5, 6 und eine artspezifische Supraglottic Atemwege Gerät7. Ein Kehlkopf Rohr besteht aus einem Rohr mit zwei Ballons, die direkten Luftstrom in der Luftröhre: ein größeren Ballon in der Mitte des Rohres bildet eine Dichtung in den oberen Pharynx und ein kleiner Ballon am distalen Ende dichtet die Speiseröhre Einlass-3. Die LMA besteht aus einem Rohr mit einem elliptischen Maske am distalen Ende, das aufgeblasen wird, um eine luftdichte Versiegelung über die Stimmritze4,5,6bilden. Die artspezifische ist das erste tierärztliche artspezifische Supraglottic Atemwege Gerät, derzeit für Katzen und Kaninchen, entworfen, um die anatomischen Strukturen für jede Spezies einen Druck erzeugen passen Dichtung in den Rachen-7. Da diese Geräte nicht direkt die Luftröhre eingeben, können sie jedoch Risiken für Komplikationen wie Magen Beckenklänge präsentieren. Der Mangel an eine ordnungsgemäße Abdichtung innerhalb der Luftröhre präsentiert eine Besorgnis über die Eignung für den Einsatz dieser Geräte für Überdruckbeatmung zur Unterstützung der Atmung, Notfälle oder Thoraxchirurgie3,8. Darüber hinaus führen mangelnde direkte Intubation der Trachea Personal Exposition, anästhetische Gase5zu verschwenden.
Viele Methoden für direkte Endotracheale Intubation wurden9,10,11,12,13,14,15beschrieben. Eine beliebte Methode ist die blinde Technik, die die Wahrscheinlichkeit der Verletzung der oropharyngealen Hohlraum verringern kann, da Einfügen von einem Laryngoskop nicht notwendig16,17,18,19 , 20. als visuell blind-Technik, diese Methode erfordert eine Überwachung für den Luftstrom durch den Endotrachealtubus und sorgfältige Manipulation Guide Platzierung. Obwohl diese Methode häufig in der Forschung und klinischen tierärztlichen Praxis, in der Erfahrung der Autoren verwendet wird diese Technik kann zeitaufwendig und nicht immer erfolgreich, und so ist schwieriger zu unterrichten und erfordern zusätzliche Dosierung von Anästhetika 9 , 10. Darüber hinaus weil Überwachung Atmung verwendet wird, um die richtige Platzierung des Rohres führen, diese Methode wäre schwieriger und weniger zuverlässig bei Atemstillstand. Eine andere beliebte Methode ist es, eine traditionelle Laryngoskop-Technik verwenden, um die Intubation wie bei größeren Arten. Die traditionelle Laryngoskop-Technik bei Kaninchen ist jedoch schwierig, der Blick auf die Stimmbänder behindert wird, wenn der Endotracheale Schlauch in den Mund steckt. Daher kann diese Methode wiederholte Intubation Versuche, erhöhte Narkose dosieren und Verletzungen zu den mündlichen Hohlraum und Atemwege10führen.
Es gibt auch teurere und technisch anspruchsvolle Möglichkeiten für Intubation. Das LWL-Laryngoskop ermöglicht leichtes Einführen des Endotrachealtubus indem das Laryngoskop in das Rohr und das Einfügen in die Luftröhre auf einen Bildschirm zu visualisieren. Ebenso können Endoskope verwendet werden, stellen Sie sich den Kehlkopf Bereich und Platzierung des Schlauches führen. Beide Methoden erfordern jedoch den Einsatz von teuren Geräten, die möglicherweise nicht leicht zugänglich in typischen klinischen Einstellungen9,11,12. Intubation über die Nasenhöhle ist eine alternative Methode, die beschrieben wurde, obwohl dies ein Risiko stellt für opportunistische Krankheitserreger aus der Nasenhöhle in die Lunge, besonders bei Kaninchen, die nicht spezifisch Pathogen-freies21einzuführen. Zu guter Letzt sind weitere invasiven Methoden der Intubation veröffentlicht, einschließlich retrograde Aufnahme von einem Führungskatheter durch eine Nadel in die Luftröhre, sowie die Verwendung von einer Nadel-Cricothyroidotomy gefolgt von Platzierung ein Führungsdraht perkutan gelegt, Schiff Dilatator und Scheide Einführhilfe13,14. Diese Verfahren haben als invasive Techniken mögliche Komplikationen wie Post-prozedurale Schmerzen und Infektionen. Die Technik, die wir hier beschreiben mit einem Laryngoskop und Guide Katheter mit minimalem Schulungsaufwand mit einer kurzen Zeit bis zum höchsten Leistungsniveau gelehrt werden kann, ist nicht-invasiv, kann von einer einzigen Person ohne die Notwendigkeit eines Assistenten durchgeführt werden und erfordert nicht die Verwendung von spezielle Ausrüstung.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ketalar 
			Ketamine HCl Inj.</td>
			<td>JHP Pharmaceuticals</td>
			<td>NDC 42023-113-10</td>
			<td>35mg/kg IM in epaxial muscles or quadriceps muscle (preferred)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anased 
			Xylazine (100mg/ml)</td>
			<td>Lloyd Labs</td>
			<td>NADA #139-236</td>
			<td>5mg/kg IM in epaxial muscles or quadriceps muscle (preferred)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Welch Allyn Laryngoscope Handle</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>60300</td>
			<td>Requires 2 size C alkaline batteries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Size 0 or 1 Miller Laryngoscope Blade</td>
			<td>Welch Allyn</td>
			<td>68040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.5 &#8211; 4.0 mm ID uncuffed endotracheal tube</td>
			<td>Jorgenson</td>
			<td>J0149V</td>
			<td>Suitable for 2.5-5 kg rabbits 
			3.5 mm most commonly used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Sovereign polypropylene catheter, 5 Fr x 22&#8221;</td>
			<td rowspan="2">Medtronic</td>
			<td rowspan="2">8890703310</td>
			<td rowspan="2">Cut to 8-10 inches 
			Mark the cut end with permanent marker to indicate which end not to insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine 2% HCL Inj</td>
			<td>VetOne</td>
			<td>L-2000-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-Ply Nonsterile, Bulk Packed Versalon Sponges (Gauze pads)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>KC9024A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape, Twill, Bleached &#189;&#8221; x 72 yds</td>
			<td>Encompass Textiles</td>
			<td>48210-025</td>
			<td>Used for securing endotracheal tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HR Lubricating Jelly</td>
			<td>HR Pharmaceuticals</td>
			<td>201</td>
			<td>For lubricating endotracheal tube tip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Great Plains Ballistics: BAAM (Beck Airway Airflow Monitor) 22</td>
			<td>BoundTree Medical</td>
			<td>21410</td>
			<td>For confirmation of successful intubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambu Pediatric Co2 Detector</td>
			<td>AMBU INC</td>
			<td>172713</td>
			<td>For confirmation of successful intubation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

endotracheal intubation of rabbits using a polypropylene guide catheter

Endotracheale Intubation bei Kaninchen kann aufgrund ihrer ungewöhnlichen Anatomie eine Herausforderung sein. Erreichen ein patent Atemwege während der Narkose ist entscheidend für die Vermeidung von Atemwegsobstruktion, Prävention von Magen Beckenklänge und Atemunterstützung zu ermöglichen. Wegen der Schwierigkeit der Intubation wurden alternative Methoden wie der Einsatz von laryngeal Mask Airways oder Kehlkopf Röhren untersucht. Aber diese Methoden führen zu keiner direkten Zugang zur Trachea und können somit ein Risiko für die Entwicklung von Komplikationen darstellen. Darüber hinaus führt mangelnde direkte Intubation der Trachea zu Personal Exposition, anästhetische Gase zu verschwenden. Zahlreiche Methoden für die Endotracheale Intubation beschrieben worden, einschließlich blind Platzierung, verwenden einer Glasfaser-Laryngoskop oder Endoskop und Ringknorpel-Platzierung. Trotz dieser zahlreichen Publikationen kämpfen viele noch, um Erfolge zu erzielen. Hier bieten wir eine detaillierte Beschreibung einer Intubation-Technik, die gelehrt werden kann mit minimalem Schulungsaufwand mit einer kurzen Zeit bis zum höchsten Leistungsniveau. Kurz nach der Verabreichung von injizierbaren Anästhesie und die richtige Positionierung des Kaninchens, ist ein Polypropylen Katheter in die Luftröhre durch direkte Visualisierung mit einem Laryngoskop gelegt. Der Katheter wird dann als Leitfaden zur endotrachealen Schlauch in die Luftröhre zu leiten. Diese Methode ermöglicht eine Intubation ohne die Notwendigkeit für teure Ausrüstung und kann von einer einzigen Person ohne die Notwendigkeit eines Assistenten durchgeführt werden. Abschließend diese Technik problemlos gelehrt und durchgeführt mit sehr geringem Aufwand in jeder klinischen Forschung Einstellung oder.

An die Autoren Institution wird diese Technik in der Regel Labor- und tierärztliche Personal während des Trainings auf Kaninchen Handling und Anästhesie-Techniken beigebracht. Lehrveranstaltungen werden mit speziellen Training Tieren durchgeführt. Der Trainer demonstriert die Technik einmal und Auszubildenden führen Sie dann die Technik unter Anleitung des Trainers. Auszubildende erfolgreich in der Regel innerhalb von 1-3 Versuche. Nachdem sie die Kaninchen erfolgreich intubiert haben einmal Personen verpflichtet sind, die Intubation ein zweites Mal durchführen und sind in der Regel in der Lage, erfolgreich die Kaninchen wieder auf Anhieb zusätzliche Intubation. Feedback während dieser Trainingseinheiten, besonders von Personen, die zuvor mit alternativen Techniken geschult wurden umfasst konsequent Kommentare darüber wie einfach diese Technik zu erlernen und erfolgreich abgeschlossen.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig1.jpg"> 
Abbildung 1. Liefert für die Endotracheale Intubation: (1) Laryngoskop mit Größe 0 oder 1 Miller Laryngoskop Klinge, 2) umbilical Klebeband (oder andere Vorräte für die Sicherung von endotracheal Schlauch), (3) 0,25 mL 2 % Lidocain, (4) 5-Französisch Polypropylen Katheter schneiden bis ca. 8-10 Zoll mit nicht gerundeten Ende markiert mit einem permanent-Marker, klar anzugeben, dessen Ende nicht in die Luftröhre (Pfeil), 5 eingefügt werden soll) Air Flow Detektionsgerät, 6) steriles Gleitmittel auf das distale Ende des Rohres, 7 angewendet werden) Cuff endotracheal Schlauch. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig1large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig2.jpg"> 
Abbildung 2 : Sternale Positionierung für die Endotracheale Intubation. Die Kaninchen ist sternally mit der Vorderbeine verlängert bis zum Ende des Tisches aufgestellt. Die Hinterbeine sind länger geschnittenes Rückenteil und der Hasenkopf wird mit der Wirbelsäule ausgerichtet. Die linke Hand wird verwendet, um den Kopf in Verlängerung in Vorbereitung auf die Einfügung von das Laryngoskop erheben. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig2large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig3.jpg"> 
Abbildung 3 : Einfügen von Laryngoskop. (A) das Laryngoskop wird eingefügt, in der linken Diastema mit der rechten Hand, das Dach des Mundes mit der Blattspitze nach, bis der weiche Gaumen sichtbar ist. Sobald der weiche Gaumen sichtbar ist, ist das Laryngoskop nach vorne gekippt und erweitert das Kaninchen Kopf in den Nacken und Hals nach vorn, den Kehlkopf zu visualisieren. (B) Visualisierung des Kehlkopfes. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig3large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig4.jpg"> 
Abbildung 4 : Weiterentwicklung der Führungskatheter. (A) nach Umstellung der Laryngoskop Klinge auf der linken Hand, geht die Rechte Hand die abgerundete Spitze des Katheters Führer durch die Öffnung hinter dem Kehlkopf. (B) den Führungskatheter wird durch die Stimmbänder mit direkter Visualisierung übergeben. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig4large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig5.jpg"> 
Abbildung 5 : Weiterentwicklung des trachealen Rohres. Endotracheale Schlauch wird über den Führungskatheter eingefädelt und ist fortgeschritten bis gibt es Widerstand der Stimmbänder. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig5large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig6.jpg"> 
Abbildung 6 : Lidocain Instillation. Lidocain (2 %, 0,25 mL) wird in die Öffnung des Endotrachealtubus eingeflößt. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig6large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig7.jpg"> 
Abbildung 7 : Endotrachealtubus Weiterentwicklung. Zwei Minuten nach Instillation von Lidocain, ist der Endotrachealtubus durch sanft drehen die Stimmbänder passieren weit fortgeschritten. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig7large.jpg" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56369/56369fig8.jpg"> 
Abbildung 8 : Überprüfung der Luftstrom durch den Endotrachealtubus. Ein Luftstrom-Erkennung-Gerät verwendet werden, um Luft-Strömung durch den Endotrachealtubus zu überprüfen, oder ein Mundspiegel kann auch verwendet werden, um die Kondensation von Atemzüge zeigt erfolgreiche Intubation zu erkennen. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/56369/56369fig8large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.</a>

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Endotracheal Intubation of Rabbits Using a Polypropylene Guide Catheter

Endotracheale Intubation bei Kaninchen ist schwierig wegen ihrer ungewöhnlichen Anatomie. Hier präsentieren wir eine Technik für direkte Intubation der Trachea mit einem Polypropylen Katheter als Leitfaden. Diese Methode nutzt relativ kostengünstige Versorgung erfordert eine minimale Ausbildung und kann einfach in jedem klinischen Umfeld durchgeführt werden.

Endotracheale Intubation von Kaninchen mit einem Polypropylen Führungskatheter

Endotracheal intubation in rabbits can be challenging due to their unusual anatomy. Achieving a patent airway during anesthesia is critical for the ...

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Research

JoVE Journal

Biology

33.3K Aufrufe.  Mayo Clinic. Endotracheale Intubation bei Kaninchen ist schwierig wegen ihrer ungewöhnlichen Anatomie. Hier präsentieren wir eine Technik für direkte Intubation der Trachea mit einem Polypropylen Katheter als Leitfaden. Diese Methode nutzt relativ kostengünstige Versorgung erfordert eine minimale Ausbildung und kann einfach in jedem klinischen Umfeld durchgeführt werden.

Serie: Endotracheal Intubation of Rabbits Using a Polypropylene Guide Catheter

Generation of Stable Transgenic C. elegans Using Microinjection

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1. The plasmid DNA rearranges to form extrachromosomal concatamers that are stably inherited, though not with the same efficiency as actual chromosomes 2. A gene of interest is co-injected with an obvious phenotypic marker, such as rol-6 or GFP, to allow selection of transgenic animals under a dissecting microscope. The exogenous gene may be expressed from its native promoter for cellular localization studies. Alternatively, the transgene can be driven by a different tissue-specific promoter to assess the role of the gene product in that particular cell or tissue. This technique efficiently drives gene expression in all tissues of C. elegans except for the germline or early embryo 3. Creation of transgenic animals is widely utilized for a range of experimental paradigms. This video demonstrates the microinjection procedure to generate transgenic worms. Furthermore, selection and maintenance of stable transgenic C. elegans lines is described.

This video demonstrates the technique of microinjection into the gonad of C. elegans to create transgenic animals.

Generierung von stabilen transgenen C. elegans mit Mikroinjektion

Transgenic Caenorhabditis elegans can be readily created via microinjection of a DNA plasmid solution into the gonad 1.  The plasmid DNA rearranges to ...

Forschung

Biologie

A Practical Approach to Genetic Inducible Fate Mapping: A Visual Guide to Mark and Track Cells In Vivo

Fate maps are generated by marking and tracking cells in vivo to determine how progenitors contribute to specific structures and cell types in developing and adult tissue. An advance in this concept is Genetic Inducible Fate Mapping (GIFM), linking gene expression, cell fate, and cell behaviors in vivo, to create fate maps based on genetic lineage.
GIFM exploits X-CreER lines where X is a gene or set of gene regulatory elements that confers spatial expression of a modified bacteriophage protein, Cre recombinase (CreERT). CreERT contains a modified estrogen receptor ligand binding domain which renders CreERT sequestered in the cytoplasm in the absence of the drug tamoxifen. The binding of tamoxifen releases CreERT, which translocates to the nucleus and mediates recombination between DNA sequences flanked by loxP sites. In GIFM, recombination typically occurs between a loxP flanked Stop cassette preceding a reporter gene such as GFP.
Mice are bred to contain either a region- or cell type-specific CreER and a conditional reporter allele. Untreated mice will not have marking because the Stop cassette in the reporter prevents further transcription of the reporter gene. We administer tamoxifen by oral gavage to timed-pregnant females, which provides temporal control of CreERT release and subsequent translocation to the nucleus removing the Stop cassette from the reporter. Following recombination, the reporter allele is constitutively and heritably expressed. This series of events marks cells such that their genetic history is indelibly recorded. The recombined reporter thus serves as a high fidelity genetic lineage tracer that, once on, is uncoupled from the gene expression initially used to drive CreERT.
We apply GIFM in mouse to study normal development and ascertain the contribution of genetic lineages to adult cell types and tissues. We also use GIFM to follow cells on mutant genetic backgrounds to better understand complex phenotypes that mimic salient features of human genetic disorders.
This video article guides researchers through experimental methods to successfully apply GIFM. We demonstrate the method using our well characterized Wnt1-CreERT;mGFP mice by administering tamoxifen at embryonic day (E)8.5 via oral gavage followed by dissection at E12.5 and analysis by epifluorescence stereomicroscopy. We also demonstrate how to micro-dissect fate mapped domains for explant preparation or FACS analysis and dissect adult fate-mapped brains for whole mount fluorescent imaging. Collectively, these procedures allow researchers to address critical questions in developmental biology and disease models.

A Practical Approach to Genetic Inducible Fate Mapping: A Visual Guide to Mark and Track Cells In Vivo

Genetic Inducible Fate Mapping (GIFM) marks and tracks cells with fine spatial and temporal control in vivo and elucidates how cells from a specific genetic lineage contribute to developing and adult tissues. Demonstrated here are the techniques required to fate map E12.5 mouse embryos for epifluorescent and explant analysis.

A Practical Approach to Genetic Inducible Fate Mapping: A Visual Guide to Mark und Track Cells In Vivo</em

Fate maps are generated by marking and tracking cells in vivo to determine how progenitors contribute to specific structures and cell types in developing ...

Rapid PCR Thermocycling using Microscale Thermal Convection

Many molecular biology assays depend in some way on the polymerase chain reaction (PCR) to amplify an initially dilute target DNA sample to a detectable concentration level. But the design of conventional PCR thermocycling hardware, predominantly based on massive metal heating blocks whose temperature is regulated by thermoelectric heaters, severely limits the achievable reaction speed1. Considerable electrical power is also required to repeatedly heat and cool the reagent mixture, limiting the ability to deploy these instruments in a portable format.
Thermal convection has emerged as a promising alternative thermocycling approach that has the potential to overcome these limitations2-9. Convective flows are an everyday occurrence in a diverse array of settings ranging from the Earth's atmosphere, oceans, and interior, to decorative and colorful lava lamps. Fluid motion is initiated in the same way in each case: a buoyancy driven instability arises when a confined volume of fluid is subjected to a spatial temperature gradient. These same phenomena offer an attractive way to perform PCR thermocycling. By applying a static temperature gradient across an appropriately designed reactor geometry, a continuous circulatory flow can be established that will repeatedly transport PCR reagents through temperature zones associated with the denaturing, annealing, and extension stages of the reaction (Figure 1). Thermocycling can therefore be actuated in a pseudo-isothermal manner by simply holding two opposing surfaces at fixed temperatures, completely eliminating the need to repeatedly heat and cool the instrument.
One of the main challenges facing design of convective thermocyclers is the need to precisely control the spatial velocity and temperature distributions within the reactor to ensure that the reagents sequentially occupy the correct temperature zones for a sufficient period of time10,11. Here we describe results of our efforts to probe the full 3-D velocity and temperature distributions in microscale convective thermocyclers12. Unexpectedly, we have discovered a subset of complex flow trajectories that are highly favorable for PCR due to a synergistic combination of (1) continuous exchange among flow paths that provides an enhanced opportunity for reagents to sample the full range of optimal temperature profiles, and (2) increased time spent within the extension temperature zone the rate limiting step of PCR. Extremely rapid DNA amplification times (under 10 min) are achievable in reactors designed to generate these flows.

We describe a novel method to perform DNA replication via the polymerase chain reaction (PCR). Thermal convection is harnessed to continuously shuttle reagents between denaturing, annealing, and extension conditions by maintaining opposing surfaces of the reactor at constant temperature. This inherently simple design promises to make rapid PCR more accessible.

Rapid PCR Thermocycling mit Microscale thermische Konvektion

Many molecular biology assays depend in some way on the polymerase chain reaction (PCR) to amplify an initially dilute target DNA sample to a detectable ...

A Practical Guide to Phylogenetics for Nonexperts

Many researchers, across incredibly diverse foci, are applying phylogenetics to their research question(s). However, many researchers are new to this topic and so it presents inherent problems. Here we compile a practical introduction to phylogenetics for nonexperts.&#160;We outline in a step-by-step manner, a pipeline for generating reliable phylogenies from gene sequence datasets. We begin with a user-guide for similarity search tools via online interfaces as well as local executables. Next, we explore programs for generating multiple sequence alignments followed by protocols for using software to determine best-fit models of evolution. We then outline protocols for reconstructing phylogenetic relationships via maximum likelihood and Bayesian criteria&#160;and finally describe tools for visualizing phylogenetic trees. While this is not by any means an exhaustive description of phylogenetic approaches, it does provide the reader with practical starting information on key software applications commonly utilized by phylogeneticists. The vision for this article would be that it could serve as a practical training tool for researchers embarking on phylogenetic studies&#160;and also serve as an educational resource that could be incorporated into a classroom or teaching-lab.

Here we describe a step-by-step pipeline for generating reliable phylogenies from nucleotide or amino acid sequence datasets. This guide aims to serve researchers or students new to phylogenetic analysis.&#160;

A Practical Guide to Phylogenetics für Nichtexperten

Many researchers, across incredibly diverse foci, are applying phylogenetics to their research question(s). However, many researchers are new to this ...

Determination of Protein-ligand Interactions Using Differential Scanning Fluorimetry

A wide range of methods are currently available for determining the dissociation constant between a protein and interacting small molecules. However, most of these require access to specialist equipment, and often require a degree of expertise to effectively establish reliable experiments and analyze data. Differential scanning fluorimetry (DSF) is being increasingly used as a robust method for initial screening of proteins for interacting small molecules, either for identifying physiological partners or for hit discovery. This technique has the advantage that it requires only a PCR machine suitable for quantitative PCR, and so suitable instrumentation is available in most institutions; an excellent range of protocols are already available; and there are strong precedents in the literature for multiple uses of the method. Past work has proposed several means of calculating dissociation constants from DSF data, but these are mathematically demanding. Here, we demonstrate a method for estimating dissociation constants from a moderate amount of DSF experimental data. These data can typically be collected and analyzed within a single day. We demonstrate how different models can be used to fit data collected from simple binding events, and where cooperative binding or independent binding sites are present. Finally, we present an example of data analysis in a case where standard models do not apply. These methods are illustrated with data collected on commercially available control proteins, and two proteins from our research program. Overall, our method provides a straightforward way for researchers to rapidly gain further insight into protein-ligand interactions using DSF.

Differential scanning fluorimetry is a widely used method for screening libraries of small molecules for interactions with proteins. Here, we present a straightforward method to extend these analyses to provide an estimate of the dissociation constant between a small molecule and its protein partner.

Bestimmung der Protein-Ligand-Wechselwirkungen mit Differential Scanning Fluorimetrie

A wide range of methods are currently available for determining the dissociation constant between a protein and interacting small molecules. However, most ...

A Guide to Modern Quantitative Fluorescent Western Blotting with Troubleshooting Strategies

The late 1970s saw the first publicly reported use of the western blot, a technique for assessing the presence and relative abundance of specific proteins within complex biological samples. Since then, western blotting methodology has become a common component of the molecular biologists experimental repertoire. A cursory search of PubMed using the term &#8220;western blot&#8221; suggests that in excess of two hundred and twenty thousand published manuscripts have made use of this technique by the year 2014. Importantly, the last ten years have seen technical imaging advances coupled with the development of sensitive fluorescent labels which have improved sensitivity and yielded even greater ranges of linear detection. The result is a now truly Quantifiable Fluorescence based Western Blot (QFWB) that allows biologists to carry out comparative expression analysis with greater sensitivity and accuracy than ever before. Many &#8220;optimized&#8221; western blotting methodologies exist and are utilized in different laboratories. These often prove difficult to implement due to the requirement of subtle but undocumented procedural amendments. This protocol provides a comprehensive description of an established and robust QFWB method, complete with troubleshooting strategies.

The advancement of western blotting using fluorescence has allowed detection of subtle changes in protein expression enabling quantitative analyses. Here we describe a robust methodology for detection of a range of proteins across a variety of species and tissue types. A strategy to overcome common technical problems is also provided.

A Guide to Modern Quantitative Fluoreszenz Western Blot mit Strategien zur Fehlersuche

The late 1970s saw the first publicly reported use of the western blot, a technique for assessing the presence and relative abundance of specific proteins ...

Discrimination and Characterization of Heterocellular Populations Using Quantitative Imaging Techniques

Cellular processes are complex and result from the interplay between multiple cell types and their environment. Existing cell biology techniques often do not allow for accurate interpretation of this interplay. Using a quantitative imaging-based approach, we present a high-content protocol for characterizing the dynamic phenotypic responses (i.e. morphology changes, proliferation, apoptosis) of heterogeneous cell populations to changes in environmental stimuli. We highlight our ability to distinguish between cell types based upon either fluorescence intensity or inherent morphology features depending on the application. This platform allows for a more comprehensive characterization of subpopulation response to perturbation while utilizing shorter time, smaller amounts of reagents, and lower likelihood of error than traditional cell biology assays. However, in some cases, cell populations may be difficult to identify and quantitate based on complex cellular features and will require additional troubleshooting; we highlight some of these circumstances in the protocol. We demonstrate this application using response to drug in a cancer model; however, it can easily be applied more broadly to other physiological processes. This protocol allows one to identify subpopulations within a co-culture system and characterize the particular response of each to external stimuli.

We have developed a novel protocol for studying heterocellular population dynamics in response to perturbations. This manuscript describes an imaging-based platform that produces quantitative datasets for simultaneous characterization of multiple cellular phenotypes of heterocellular populations in a robust manner.

Diskriminierung und Charakterisierung von Heterocellular Populationen mit quantitativen Imaging-Techniken

Cellular processes are complex and result from the interplay between multiple cell types and their environment. Existing cell biology techniques often do ...

A Versatile Model of Hard Tick Infestation on Laboratory Rabbits

The use of live animals in tick research is crucial for a variety of experimental purposes including the maintenance of hard tick colonies in the laboratory. In ticks, all developmental stages (except egg) are hematophagous, and acquiring a blood-meal when attached to their vertebrate hosts is essential for the successful completion of their life cycle. Here we demonstrate a simple method that uses easily openable capsules for feeding of hard ticks on rabbits. The advantages of the proposed method include its simplicity, short duration and most importantly versatile adjustment to the needs of specific experimental requirements. The method makes possible the use of multiple chambers (of various sizes) on the same animal, which permits feeding of multiple stages or different experimental groups while reducing the overall animal requirement. The non-irritating and easily accessible materials used minimizes discomfort to the animals, which can be easily recovered from an experiment and offered for adoption or reused if the ethical protocol allows it.

We have developed a simple and versatile system to feed hard ticks on laboratory rabbits. Our non-laborious protocol uses easily accessible materials and can be adjusted depending on the requirements of the various experimental settings. The method allows comfortable monitoring and/or sampling of ticks during the entire feeding period.

Ein vielseitiges Modell schwer Tick Befall an Kaninchen, Labor

The use of live animals in tick research is crucial for a variety of experimental purposes including the maintenance of hard tick colonies in the ...

A Sectioning, Coring, and Image Processing Guide for High-Throughput Cortical Bone Sample Procurement and Analysis for Synchrotron Micro-CT

Bone is a dynamic and mechanically active tissue that changes in structure over the human lifespan. The products of the bone remodeling process have been studied substantially using traditional two-dimensional techniques. Recent advancements in X-ray imaging technology via desktop micro-computed tomography (&#181;CT) and synchrotron radiation micro-computed tomography (SR&#181;CT) have allowed for the acquisition of high-resolution three-dimensional (3D) scans of a larger field of view (FOV) than other 3D imaging techniques (e.g., SEM) providing a more complete picture of microscopic structures within human cortical bone. The specimen should be accurately centered within the FOV, however, to limit the appearance of streak artifacts known to impact data analysis. Previous studies have reported procurement of irregularly shaped rectilinear bone blocks that result in imaging artifacts due to uneven edges or image truncation. We have applied a geological sampling protocol (coring) to procure consistently sized cortical bone core specimens for SR&#181;CT experiments from the anterior aspect of human femora. This coring method is efficient and minimally destructive to tissue. It creates uniform cylindrical samples that decrease imaging artifacts by nature of being isometric during rotation and providing a uniform path length for X-ray beams throughout scanning. Image processing of X-ray tomographic data of cored and irregularly shaped samples confirms the potential of the technique to improve visualization and analysis of cortical bone microarchitecture. A goal of this protocol is to deliver a reliable and repeatable method for the extraction of cortical bone cores that is adaptable for various types of high-resolution bone imaging experiments. An overarching goal of the work is to create a standardized cortical bone procurement for SR&#181;CT that is affordable, consistent, and straightforward. This procedure may further be adapted by researchers in related fields who commonly evaluate hard composite materials such as in biological anthropology, geosciences, or material sciences.

We employed a geological (coring) sampling protocol to procure cortical bone specimens of uniform size for SR&#181;CT experiments from the anterior aspect of human femora. This method is minimally destructive, efficient, results in cylindrical specimens that minimize imaging artifacts from irregular sample shapes and improves microarchitectural visualization and analysis.

Bone is a dynamic and mechanically active tissue that changes in structure over the human lifespan. The products of the bone remodeling process have been ...

A Step-by-Step Guide to Mosquito Electroantennography

Female mosquitoes are the deadliest animals on earth, claiming the lives of more than 1 million people every year due to pathogens they transmit when acquiring a blood-meal. To locate a host to feed on, mosquitoes rely on a wide range of sensory cues, including visual, mechanical, thermal, and olfactory. The study details a technique, electroantennography (EAG), that allows researchers to assess whether the mosquitoes can detect individual chemicals and blends of chemicals in a concentration-dependent manner. When coupled with gas-chromatography (GC-EAG), this technique allows to expose the antennae to a full headspace/complex mixture and determines which chemicals present in the sample of interest, the mosquito can detect. This is applicable to host body odors as well as plant floral bouquets or other ecologically relevant odors (e.g., oviposition sites odorants). Here, we described a protocol that permits long durations of preparation responsiveness time and is applicable to both female and male mosquitoes from multiple genera, including Aedes, Culex, Anopheles, and Toxorhynchites mosquitoes. As olfaction plays a major part in mosquito-host interactions and mosquito biology in general, EAGs and GC-EAG can reveal compounds of interest for the development of new disease vector control strategies (e.g., baits). Complemented with behavioral assays, the valence (e.g., attractant, repellent) of each chemical can be determined.

The present article details a step-by-step protocol for successful and low noise electroantennograms in several genera of mosquitoes, including both females and males.

Eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zur Mücken-Elektroantennographie

Female mosquitoes are the deadliest animals on earth, claiming the lives of more than 1 million people every year due to pathogens they transmit when ...