Die geringe Anzahl von vaskularisierten Komposit-Allotransplantaten, die klinisch durchgeführt wurden, erfordern ein zuverlässiges, reproduzierbares Tiermodell, um die zugrunde liegenden Ursachen der Transplantatabstoßung zu untersuchen. Klinisch relevante Gewebe wie Haut, Muskel und Knochen sind alle im Modell vorhanden. Darüber hinaus ermöglicht die nicht-funktionelle Natur unseres Modells eine schnellere Operation, weniger ischämische Zeit für die Klappe und eine geringere Morbidität im Vergleich zu orthotopischen Modellen von VCA.
Bei Handtransplantationsempfängern kann die Vaskulopathie von Spendergefäßen zu einem vollständigen Verschluss der Gefäße und ischämischen Schäden an der transplantierten Hand führen. Dieses Modell ist ein Werkzeug, um die Entwicklung dieser vaskulopathischen Ereignisse zu untersuchen. Vor dem Versuch dieses chirurgischen Modells sollte der Primärchirurg mit makrovaskulären chirurgischen Techniken vertraut und kompetent sein.
Dies ist ein kompliziertes und langwieriges Verfahren. Die visuelle Demonstration wird anderen Labors helfen, sich entsprechend vorzubereiten und die Schritte der Operation zu verstehen. Zuerst ernten Sie zuerst das hintere Glied einer Spenderratte, indem Sie einen Hautschnitt in der Leistenkonkavität machen und die Oberschenkelgefäße entblößen.
Machen Sie einen ventralen Hautschnitt, der bei der Zerlegung des Pedikels hilft. Nach der Deartikulation des Knies und des Knöchels, machen Dorsale Hautschnitte, transect die Pedikle, um das Transplantat zu befreien, und transportieren Sie das Transplantat sofort zum Empfänger-OP-Tisch, wo die chirurgische Stelle des Empfängertiers im Voraus vorbereitet wird, um die ischämische Zeit des Transplantats zu minimieren. Auf dem Empfängertier die Femoralgefäße wie bisher aussetzen und sezieren und dann das Transplantat, die Vene Ende-zu-Ende, arteriend, anastomose.
Setzen Sie das Transplantat in die Leistentasche ein und richten Sie es auf den Kopf. Schließlich, Naht die Haut. Um das Verfahren zu beginnen, rasieren Sie eine anästhesierte Spenderratte, und verwenden Sie dann Enthaarungscreme.
Injizieren Sie 30 Einheiten Heparin subkutan in den Scruff-Bereich. Legen Sie die Tiersuppe auf ein Heizkissen und produzieren Sie ein steriles Operationsfeld, indem Sie den Operationsbereich, einschließlich des dorsalen Aspekts des Beins, vorzuschneiden, zu schrubben und drapieren. Verwenden Sie Skalpellklinge Nummer 15, um einen 3-Zentimeter-Hautschnitt in der Leistenkonkavität der Spenderratte zu machen.
Verwenden Sie IrisSchere, um seitlich das Leistenfettpad zu reflektieren. Mit stumpfer Sesection mit einem Wattestäbchen, setzen Sie die gemeinsamen Femoralgefäße, und legen Sie dann einen Drahthaken mit einem elastischen Band, um die Bauchmuskeln zurückzuziehen. Verwenden Sie unter einem Sezierendes Mikroskop mit bis zu 40-facher Vergrößerung Mikroscheren, Nummer drei gerade Juwelierzangen und Nummer fünf 45-Grad-Winkelzangen, um den Pedikulus proximal von der Entstehung der gemeinsamen Femoralgefäße unter dem Leistenband und distally bis zum Zusammenfluss von Poplitealgefäßen in das Transplantat zu sezieren.
Mit Mikroclips und bipolaren Juwelieren zangen, ligaten und teilen Sie die großen arteriellen und venösen Zweige, um die wichtigsten Femoralgefäße zu mobilisieren. Verwenden Sie feine bipolare Zangen, um kleine Zweige zu kauterisieren. Verwenden Sie IrisSchere, um einen Hautschnitt von der Mitte der vorherigen Haut entlang der ventralen Seite des Hinterglieds zum Knöchelbereich geschnitten zu machen.
Schneiden Sie den Gracilis-Muskel und die anderen Adduktorenmuskeln darunter vertikal, um die medialen proximalen Genikulärgefäße, tief verzweigte kleine Gefäße und den Ischiasnerv zu belichten und zu ligieren. An dieser Stelle, auf einem separaten Operationstisch, sollte der andere Chirurg das Empfängertier intubieren und anästhesieren, um den Empfänger chirurgischen Platz rechtzeitig für die Transplantation vorzubereiten, und die ischämische Zeit des Transplantats zu minimieren. Machen Sie umlaufende Hauteinschnitte auf der Ebene des Knies und Knöchels, disartikulieren Sie das Knie und den Knöchel und entfernen Sie fremde Muskeln und Gewebe.
Machen Sie einen vertikalen Hautschnitt auf der Rückenseite des Hinterbeins, um das Transplantat zu befreien, bestehend aus Fibel und Tibia, und jetzt nur durch den Pedikulus verbunden. Kleine Klammern so proximal wie möglich auf die Oberschenkelarterie und Vene legen und den Pediküre so nah wie möglich am Leistenband schneiden. Verwenden Sie eine 27-Gauge Spülung stumpf kanüle heparinisierte Saline in die Oberschenkelarterie zu injizieren, um das Transplantat des Blutes zu spülen.
Das isolierte Transplantat in warme, mit Herzsamen getränkte Gaze wickeln und sofort mit dem Empfängertier auf den Tisch transportieren, wobei die operationschirurgische Stelle bereits für gefäßvaskuläre Anastomose vorbereitet ist. Intubieren Sie die Empfängerratte und beanten Sie mit 2,5 bis 3% verdampftem Isofluran, das mit einem Liter pro Minute Sauerstoff ausgeglichen wird. Legen Sie das Tier supine auf einem Heizkissen, und schrubben und drapieren sie die chirurgische Stelle.
Während der erste Chirurg an der Befreiung des Transplantats vom Spendertier arbeitet, verwenden Sie die Skalpellklinge Nummer 15, um einen drei Zentimeter großen Hautschnitt in der Leistenzerrung der anästhesierten Empfängerratte zu machen. Verwenden Sie IrisSchere, um seitlich das Leistenfettpad zu reflektieren. Nachdem Sie die üblichen Femoralgefäße auf die gleiche Weise wie beim Spendertier freigelegt haben, legen Sie einen Drahthaken mit einem elastischen Band, um die Bauchmuskeln zurückzuziehen.
Dann ligate und teilen Murphy Zweige. Mit 10-0 Nylon unterbrochennähte Nähnähte, Anastomose Spendergefäße. Zu Empfängergefäßen über venöse End-to-Side-Technik.
Führen Sie dann arterielle Anastomose durch End-to-End-Technik durch. Nach dem schrittweisen Lösen der Klemmen, überwachen Sie die anastomotischen Stellen auf Blutungen und fügen Sie zusätzliche Nähte bei Bedarf hinzu. Um eine effektive Transplantatreperfusion zu gewährleisten, bewerten Sie die vaskuläre Anastomose visuell.
Dann setzen Sie das Transplantat in die Leistentasche ein und orientieren Sie es auf den Kopf, mit dem Sprunggelenk überlegen und das Kniegelenk minderwertig. Verwenden Sie Tucking Nähte, um das Transplantat an benachbarten Muskeln zu sichern. Schließlich schließen Sie die Haut über unterbrochene horizontale Matratze hautreisierbare 4-0 Nähte, und fahren Sie mit postoperativer Pflege fort, wie im Manuskript beschrieben.
Das heterotopische Osteomyokutane-Flap-Modell der Ratte VCA VCA ermöglicht ein langfristiges Allograft-Überleben unter Immunsuppression. Die Klappe ist im Leistenbereich gut versteckt und stellt minimale Morbidität und Beschwerden für das Tier dar. Als die Immunsuppressionsbehandlung abgebrochen wurde, wurde das Transplantat abgelehnt.
Dopplerbilder des Allografts zeigen eine Verschiebung von minimaler Blutprofusion unmittelbar nach VCA hin zu einer vollständigen Revaskularisation der Klappe am 64. Tag. Die Hautbiopsie eines syngenischen Allografts am 45. Tag zeigt eine normale Morphologie der Hautbestandteile, während es atrophieren und mononukleäre Zellinfiltration in einem allogenen Allograft in der Abstoßung am Tag 75 gibt, der täglich mit einer niedrigeren Dosis eines Immunsuppressivums behandelt wird. Die Muskelbiopsie eines syngenischen Allografts am 45. Tag zeigt eine normale Morphologie, während Muskelatrophie und mononukleäre Zellinfiltration in einem allogenen Allograft bei der Abstoßung am Tag 98, der täglich mit einer niedrigeren Dosis eines Immunsuppressivs behandelt wird, sichtbar sind.
Die Femoralarterienbiopsie eines syngenischen Allografts am 45. Tag zeigt eine normale Morphologie der Arterie, im Gegensatz zur femoralen Arterie eines allogenen Allografts in der Abstoßung am Tag 98, der täglich mit einer niedrigeren Dosis eines Immunsuppressivums behandelt wird. Dieses Modell bietet ein Werkzeug, um die Auswirkungen von akuter Abstoßung, chronischer Abstoßung und Umweltfaktoren wie Infektionen und chirurgische Beleidigungen auf die Entwicklung der Vaskulopathie zu testen. Immunsuppressive Medikamente sind für das langfristige Überleben des Transplantats erforderlich.
Diese Medikamente sind chemisch gefährlich und sollten mit Vorsicht und ordnungsgemäßer Schutzausrüstung des Personals behandelt werden.
