Dieses Schweine-Herzinsuffizienz-Modell, induziert durch linke Zirkumflexarterienverstopfung und schnelles Tempo, kann verwendet werden, um die Auswirkungen der direkten intramyokardialen Stammzellinjektion auf die Herzregeneration zu bewerten. Unser Herzinsuffizienzmodell der Schweinekolonie ist recht stabil. Die neue Infarktgröße dieses Modells beträgt etwa 16 % des linken Ventrikels und des linken Ventrikelinjektionsinfarkts, der gegenüber dem Ausgangswert um mindestens 40 % reduziert wird.
Mit dem experimentellen Schwein in der Supine-Position fixiert, lokalisieren Sie die rechte Halsschlagader und Jongleurvene im Karotis-Dreieck, und verwenden Sie hämostatische Zangen und aseptische Technik, um die rechte Karotisarterie und Jugularvene zu isolieren. Ligate das distale Ende der rechten Halsschlagader und JongleurVene und verwenden Sie einen Angiocath, um die rechte Jongleurvene zu kinieren. Nach dem Einsetzen eines Herzschrittmachers führen Sie unter Röntgenführung in den rechten Ventrikel, um die Brustocleidomastoid- und vorderen Schuppenmuskulatur zu isolieren und den Herzschrittmacher an die Spitze zu verbinden.
Dann implantieren Sie einen Herzschrittmacher zwischen den beiden Muskeln. Dann schließen Sie die beiden Muskeln mit 2-0 Seide. Um Veränderungen in der funktionalen linken Ventrikel zu bewerten, isolieren Sie die rechte Femoralarterie und die Femoralvene im Femoraldreieck, und berechnen Sie die rechte Femoralarterie mit einem Angiocath.
Legen Sie einen Führungsdraht in die femorale Vene über den Angiocath und entfernen Sie den Angiocath. Eine 12 französische Hülle unter Anleitung des Führungsdrahtes in die femorale Vene einbauen und den Führungsdraht entfernen. Kanülieren Sie die rechte Femoralarterie mit einer neun französischen Hülle, wie gerade gezeigt.
Und legen Sie einen Ballonkatheter durch die 12 französische Hülle unter Röntgenführung in die innen liegende Vena cava ein. Kalibrieren Sie einen sieben französischen Druckvolumenkatheter in isotonischer Kochung mit einem Druckvolumensignalprozessor und setzen Sie den Katheter durch die neun französische Hülle unter Röntgenführung in den linken Ventrikel-Apex ein. Unterbrechen Sie die Belüftung und verwenden Sie den Druckvolumen-Signalprozessor, um den linken Ventrikel maximal und Unterdruckderivat sowie den systolischen Druck und den Enddruck zu messen.
Starten Sie dann die Belüftung neu. Für myokardische Infarktinuktion, verabreichen Fünf Milligramm pro Kilogramm Amiodaron und 1,5 Milligramm pro Kilogramm Lidocain bolus intravenös über eine Stunde, um ventrikuläre Arrhythmien zu verhindern, bevor die richtige Halsschlagader mit einer acht französischen Hülle berechnet, wie gezeigt. Führen Sie die koronare Angiographie durch einen sechs französischen Mantel über dem Draht Führungskatheter über den platzierten Mantel durch Standard-C-Armfluoroskopie geführt.
Schließen Sie nach links Zirkumflex koronare Arterie distal zum ersten stumpfen Randzweig mit perkutanen transluminalen koronaren angioplasty Angioplastie Ballonkatheter Inflation unter Röntgenführung. Laden Sie einen Milliliter 700 Mikrometer Schwammmikrosphären gemischt mit sieben Milliliter Iohexol in eine 10-Milliliter-Spritze und injizieren Sie die Mischung durch den Ballonkatheter, um die linke Zirkumflex-Herzkranzgefäßzublock zu blockieren. Dann entleeren Sie den Ballon und führen Sie ein Angiogramm durch, um die Okklusion zu bestätigen.
Acht Wochen nach infarktiöser Induktionsbelastung zwei mal 10 bis zur achten vom Menschen induzierten pluripotenten Stammzell abgeleiteten mesenchymalen Stammzellen in zwei Milliliter normaler Kochsaline in eine Fünf-Milliliter-Spritze und sterilisieren 10 Zentimeter um den Spitzenschlagbereich des anästhesierten Versuchstiers. Verwenden Sie einen Retraktor, um eine linke Thorakotomie im vier oder fünf interkostalen Raum durchzuführen und führen Sie eine Perikardiotomie durch, um die infarktierte Seitenwand freizulegen. Wenn die infarktierten Bereiche sichtbar sind, führen Sie fünf bis acht intramyokardiale Injektionen von etwa 300 Mikroliter Zellen pro Injektion durch, bevor Sie den interkostalen Raum mit Eisendraht schließen und die Muskelschicht mit 2-0 Seidennähten und die subkutanen Gewebe und Hautschichten mit 2-0 Vicryl-Nähten schließen.
Um die Induzierbarkeit der ventrikulären Tachyarrhythmie nach der Zelltherapie zu beurteilen, legen Sie einen sechs französischen elektrophysiologischen Katheter über die femorale Vene in die rechte ventrikuläre Spitze ein und zeigen die intrakardialen Aufnahmen mit dem Oberflächenelektrokardiogramm Leas I, II und III auf dem elektrophysiologischen Aufzeichnungssystem mit einer Geschwindigkeit von 200 Millimetern pro Sekunde an. Verwenden Sie einen Stimulator, um eine Pulsbreite von zwei Millisekunden bei zweifacher Diastolschwelle zu liefern und einen Schrittzug von acht Reizen bei einer 200-Millisekunde und einer 300-Millisekunden-Antriebszykluslänge, gefolgt von ein oder zwei vorzeitigen zusätzlichen Reizen, zu liefern. Dann verkürzte sequenziell die Kopplungsintervalle, bis die ventrikuläre effektive feuerfeste Periode der Arrhythmie induziert wird, unter Beunruhigung des Vorhandenseins einer induzierbaren anhaltenden ventrikulären Tachyarrhythmie.
In diesem repräsentativen Experiment zeigte die serielle echokardiographische Untersuchung, dass die linke Ventrikelauswurffraktion von der Ausgangsbasis her signifikant abnahm, während die linke Ventrikelenddiastoldimension und die endsystolische Dimension nach acht Wochen nach der Induktion des Myokardinfarkts signifikant zunahmen. Im Gegensatz dazu nahm die linke Ventrikelauswurffraktion signifikant zu und die endsystolische Dimension nahm in der Zelltransplantationsgruppe acht Wochen nach der Verabreichung deutlich ab. Die Beziehung zwischen Unterdruckderivat und End-systolischem Druckvolumen verringerte sich nach acht Wochen nach induktion des Myokardinfarkts signifikant von der Ausgangsbasis, während die intramyokardiale Verabreichung von mesenchymalen Stammzellen zu einer Erhöhung dieser Funktionen führte.
Die Messung der linken Ventrikelinfarktwanddicke in fünf bis sieben seriellen ein Zentimeter dicken Abschnitten von jedem Tier ergab einen Prozentsatz des linken Ventrikelinfarkts von etwa 16%Es gab acht Wochen nach der Transplantation kein Zellüberleben um die Injektionsstelle im Infarktbereich. Aber eine kleine Anzahl der überlebenden injizierten Stammzellen waren im Periinfarktbereich sichtbar. Die Vorfälle von induzierbaren anhaltenden ventrikulären Tachyarrhythmien könnten bei Tieren mit Herzinsuffizienz leicht erhöht werden.
Bemerkenswert ist, dass die Stammzelltransplantation das zugrunde liegende Myokardsubstrat nicht signifikant verändert hat, um die Anfälligkeit für ventrikuläre Tachyarrhythmie zu reduzieren. Als linke Zirkumflex koronare Arterienverstopfung kann Arrhythmie induzieren. Achten Sie darauf, das EKG zu überwachen und sofort externen biphasischen Defibrillator zu verwenden, um bei Bedarf Dienebenen wiederherzustellen.
Diese Methode bietet ein stabiles und reproduzierbares klinisch relevantes großfeines Modell der Herzinsuffizienz, um die Wirksamkeit von Stammzell-basierten Therapien zu testen.
