Das vorliegende Protokoll kann erfolgreich bei Ratten mit gesunden oder umgebauten Herzen in Gegenwart einer Vielzahl von Risikofaktoren für akute oder langfristige Follow-up-Studien angewendet werden. Dieses Protokoll ermöglicht die Untersuchung von Vorhofflimmern unter verschiedenen pathophysiologischen Bedingungen, um neuartige prophylaktische und therapeutische Strategien zu bewerten. Nachdem Sie eine erwachsene Wistar-Ratte betäubt haben, legen Sie die Ratte in Rückenlage auf ein Heizkissen, um ihre Körpertemperatur bei 37 Grad Celsius zu halten.
Befestigen Sie dann drei Oberflächen-EKG-Elektroden an den Rattengliedmaßen in einer Blei-II-Konfiguration, indem Sie die negative Elektrode am rechten Vorderbein, die positive Elektrode am linken Hinterbein und die Erdungselektrode am linken Vorderglied platzieren. Befestigen Sie die Elektroden mit dünnen elastischen Armbandsaitensehnen. Schalten Sie als Nächstes die Oberflächen-EKG-Aufzeichnung ein und führen Sie während des gesamten Vorgangs eine kontinuierliche EKG-Aufzeichnung mit einem kommerziellen oder lokal entwickelten Erfassungsprogramm durch.
Verwenden Sie für die elektrische Stimulation einen fünf- oder sechsfachen französischen Quadripolarkatheter, der mit einem Mikrocontroller-basierten Herzschrittmacher verbunden ist. Sobald die Route vollständig betäubt ist, führen Sie den Katheter durch die Mundhöhle in die Speiseröhre ein. Um die korrekte Position des Stimulationskatheters auf Höhe der Vorhöfe zu bestätigen, wenden Sie eine elektrische Stimulation mit einer Frequenz von 400 Reizen pro Minute an.
Überprüfen Sie dann, ob die EKG-Ablaufverfolgung eine konstante Erfassung der Vorhöfe zeigt. Bestimmen Sie auf dieser Grundlage den diastolischen Schwellenwert, der als die niedrigste Spannung definiert ist, die erforderlich ist, um eine Vorhoferfassung zu erhalten. Stellen Sie bei Ratten in der Stimulationsgruppe den Stimulator auf eine Frequenz von 4.000 Stimuli pro Minute bei einer Spannung von drei Volt über der diastolischen Schwelle ein, sobald die korrekte Position des Katheters bestimmt ist.
Wenden Sie dann für jede Ratte 15 aufeinanderfolgende Stimulationszyklen an, jeweils 20 Sekunden, mit einem freien Intervall von fünf Minuten zwischen den Zyklen. Überprüfen Sie als Nächstes die Wirksamkeit der Stimulation, indem Sie die Wiederherstellungszeit des Sinusknotens identifizieren, die am Ende des schnellen Tempos als Zeitintervall erscheint, das länger ist als die während des Sinusrhythmus aufgezeichnete Zykluslänge und das Zeitintervall darstellt, das für die Wiederaufnahme des Sinusrhythmus nach dem Ende der Overdrive-Unterdrückung erforderlich ist. Identifizieren Sie dann das Auftreten der Vorhofflimmerepisode, definiert als das Vorhandensein von drei oder mehr aufeinanderfolgenden, unregelmäßigen, supraventrikulären Schlägen, bei denen P-Wellen fehlen oder durch kleine, verzerrte F-Wellen ersetzt werden.
Bei Ratten in der Scheingruppe halten Sie den Katheter nach dem Einführen des Katheters durch die Mundhöhle 18 Minuten lang ohne elektrische Stimulation in Position, während Sie das Oberflächen-EKG kontinuierlich aufzeichnen. Am ersten Tag der Stimulation zeigten 80% der Ratten, die eine elektrische Stimulation erhielten, Vorhofflimmern-Episoden Von den angewandten 164 Stimulationszyklen folgten 42 von Vorhofflimmern-Episoden. Während der 10 Tage der Stimulation wurden im Durchschnitt 15,6 Vorhofflimmerepisoden bei allen Tieren effizient induziert.
Von den gesamten angewandten Stimulationszyklen folgten 20% von Vorhofflimmern und 41 Episoden dauerten mehr als 600 Sekunden. Für Episoden, die weniger als 600 Sekunden dauerten, betrug die durchschnittliche Dauer 40,12 Sekunden. Die vorliegende Technik ist relativ einfach zu reproduzieren und es ist keine spezielle Schulung für Laborpersonal erforderlich, das regelmäßig mit Tiermodellen arbeitet.
Nach diesem Verfahren kann eine kontinuierliche EKG-Aufzeichnung mit einem Telemetriegerät durchgeführt werden, um spontane Vorhofflimmern und Herzfrequenzvariabilität zu beurteilen.
