Dieses Protokoll beschreibt ein Großtiermodell der Spende nach Kreislauftod, gefolgt von einer thorakoabdominellen normothermen regionalen Perfusion, die die klinische Herztransplantation genau nachahmt. Dies könnte genutzt werden, um mögliche Strategien in der translationalen Forschung zu evaluieren. Der Hauptvorteil dieses Protokolls besteht darin, dass es ein geeignetes präklinisches Modell für die Herztransplantation bietet, da die anatomischen und chirurgischen Techniken Ähnlichkeiten zwischen dem Wildschwein und dem menschlichen Herzen aufweisen.
Beginnen Sie mit einem Kauterpen, um einen Schnitt in der Mittellinie eines anästhesierten Tieres von der mittleren Halsregion bis zum Xiphoid durchzuführen. Teilen Sie dann das Unterhautfett Schicht für Schicht entlang der Mittellinie mit Elektrokauterisation, um das Peristernum zu erreichen. Nachdem Sie um die Brustbeinkerbe herum geschnitten haben, ziehen Sie mit einem Finger die Weichteile unter dem Brustbein zurück und streichen Sie sie weg.
Öffnen Sie das Brustbein mit einer Knochensäge und achten Sie darauf, dass das Brustbein vollständig geteilt ist, und achten Sie dabei auf die Vene unter dem oberen Teil des Brustbeins. Kauterisieren Sie dann das Brustbein oder tragen Sie Knochenwachs auf, um eine ausreichende Blutstillung zu gewährleisten. Als nächstes wird der Thymus mit Hilfe der Elektrokauterisation präpariert und entfernt, indem er aus dem Perikard gehoben und die Gefäße verätzt wird, die den Thymus aus der Aorta und der oberen Hohlvene versorgen, um Blutungen zu verhindern.
Schneiden Sie den Herzbeutel vorsichtig mit Kauter auf. Führen Sie beim Schneiden die Finger unter den Herzbeutel, um Verletzungen des Herzens zu vermeiden. Verabreichen Sie dann 300 Einheiten pro Kilogramm Heparin intravenös, um eine systemische Antikoagulation zu erreichen.
Wenn der Test verfügbar ist, stellen Sie sicher, dass die aktivierte Gerinnungszeit mehr als 300 Sekunden beträgt. Verabreichen Sie einen Bolus von drei Milligramm pro Kilogramm Propofol intravenös. Stoppen Sie dann die mechanische Beatmung und trennen Sie den Endotrachealtubus.
Überwachen Sie den arteriellen Druck und die periphere Sauerstoffsättigung. Wenn der systolische Druck weniger als 50 Millimeter Quecksilbersäule beträgt, beginnen Sie mit der Zeit der funktionellen warmen Ischämie. Legen Sie einen Kreislaufstillstand fest, wenn eine Asystolie vorliegt und die arterielle Pulsatilität fehlt.
Nach Absetzen lebenserhaltender Therapien und Bestätigung des Todes wird der rechte Ventrikelausflusstrakt nach unten, die Lungenarterie nach links und die Aorta nach rechts zurückgezogen. Anschließend wird der Lungenraum der Aorta vorsichtig mit Hilfe des Kauters präpariert. Legen Sie eine große Kreuzklemme über die supraaortalen Gefäße, um eine zerebrale Perfusion zu vermeiden und auszuschließen.
Anschließend mit der Metzenbaum- und einer rechtwinkligen Pinzette vorsichtig zwischen der oberen Hohlvene und der Arteria innominata sowie zwischen der unteren Hohlvene und dem Perikard präparieren. Umkreisen Sie die obere und untere Hohlvene mit einem Nabelband oder einer einfachen Zero-Silk-Naht und sichern Sie sie mit einem Tourniquet. Platzieren Sie mit einer 3-0-Naht zwei konzentrische Nähte an der distalen aufsteigenden Aorta adventitia und vermeiden Sie Nähte in voller Dicke.
Legen Sie dann eine Taschennaht auf den rechten Vorhof, bevor Sie alle Nähte mit einem Tourniquet sichern. Als nächstes richten Sie das normotherme regionale Perfusionssystem ein und bereiten es vor. Kanülieren Sie dann die Aorta mit einer 17 bis 21 französischen Arterienkanüle und befestigen Sie sie an Ort und Stelle, indem Sie das Tourniquet festziehen und die Naht halten.
Erstellen Sie einen fünf Millimeter langen Einschnitt in der Mitte der Geldbeutelsaite am rechten Vorhof und erweitern Sie ihn mit einem kleinen abgewinkelten Instrument, z. B. einem rechten Winkel oder einem Druckknopf. Decken Sie den Schnitt mit einem Finger ab, um übermäßige Blutungen zu vermeiden. Verwenden Sie als Nächstes eine zweistufige Venenkanüle, um den rechten Vorhof zu kanülieren.
Befestigen Sie dann die Kanüle, indem Sie die Nähte mit einem Tourniquet festziehen. Verbinden Sie die Kanülen mit einem halben bis drei über acht Zoll großen Konnektor mit der venösen Leitung des normothermen regionalen Perfusionskreislaufs, um eine vollständige Entlüftung zu gewährleisten, um einen Lufteinschluss im System zu vermeiden. Es muss sichergestellt werden, dass zwischen der Todeserklärung und dem Beginn der normothermen regionalen Perfusion mindestens 15 Minuten vergangen sind, um die Zeit zu erfassen, die für die Vorbereitung der klinischen Praxis, das Drapieren und den Zugang zum Herzen benötigt wird.
15 Minuten nach Beginn der funktionellen warmen Ischämiezeit wird die normotherme regionale Perfusion eingeleitet und die Flussraten schrittweise angepasst, um einen Perfusionsindex von 2,5 Litern pro Minute und Quadratmeter zu erreichen. Starten Sie die maschinelle Beatmung mit einem Anteil von 50 % eingeatmetem Sauerstoff und sechs Millilitern pro Kilogramm Atemzugvolumen neu. Wenn die Entwöhnungskriterien erfüllt sind, stoppen Sie die normotherme regionale Perfusion.
Entfernen Sie die Kanüle aus dem rechten Vorhof und ziehen Sie die Naht schnell fest, um den Blutverlust zu minimieren. Befestigen Sie die Naht mit Knoten. Gehen Sie dann wie folgt vor, um die Aortenkanüle zu entfernen.
Analysieren Sie die Herzfunktion durch Echokardiographie mit einer transösophagealen Standardsonde und einer transthorakalen Sonde, die direkt am Herzen platziert wird. Repräsentative Ergebnisse der Herzfunktion zeigten eine signifikante Abnahme der Herzfunktion nach der Spende nach dem Kreislauftod. Diese Organe zeigten jedoch eine ähnliche funktionelle Erholung nach der Transplantation im Vergleich zu konventionell transplantierten Herzen.
Zerebrale Oximetriemessungen während der normothermen regionalen Perfusion mit geklemmten supraaortalen Gefäßen bestätigten das Fehlen einer adäquaten zerebralen Perfusion, während Lungen-Compliance-Messungen während der normothermen regionalen Perfusion und nach der Entwöhnung von der Unterstützung keine signifikante Veränderung gegenüber dem Ausgangswert zeigten. Mit der Entwicklung dieser Technik wurde die Bedeutung der Beurteilung der Transplantationsfähigkeit anderer Organe wie Lunge, Nieren und Leber im Zusammenhang mit der Spende nach Kreislauftod und normothermer regionaler Perfusion deutlich.
