Die hämodynamische Beurteilung des Herzens während der isolierten Ex-situ-Perfusion ist schlecht beschrieben. Dieses Protokoll bietet eine Methode zur Bewertung der Ex-situ-Herzleistung im Arbeitsmodus. Unser Ansatz vergleicht die invasive PV-Schleifentechnik mit der epikardialen Echokardiographie zur funktionellen Beurteilung ihres Herzens während der isolierten Ex-situ-Perfusion.
Dieser Ansatz erfordert eine Teamerfahrung in der Ex-situ-Herzperfusion sowie die Einbeziehung eines Kardiologen, der für die transöosphageale Echokardiographie ausgebildet ist. Ein Hauptanliegen bei der Herztransplantation ist das Risiko eines primären Transplantatversagens. Unser Ansatz mit epikardialer Echokardiographie bietet eine Beurteilung des Herzens vor der Transplantation während der Ex-situ-Perfusion.
Diese nicht-invasive Methode könnte während der Ex-situ-Herzperfusion vor der Transplantation angewendet werden. Beginnen Sie mit vier Polypropylen-Null-Nähten auf dem rechten Vorhof und auf der aufsteigenden Aorta des anästhesierten Tieres, um die Kanülierung mit Tourniquets zu sichern. Gießen Sie Heparin und sezieren Sie vorsichtig die Aortenwurzel.
Führen Sie dann eine doppelt gestufte Venenkanüle in den rechten Vorhof zur Blutentnahme und eine einzelne Lumenkanüle in die aufsteigende Aorta für die Kardioplegie-Infusion ein. Nach der Isolierung der oberen und unteren Vena cava verbinden Sie die Venenkanüle mit einem Blutentnahmebeutel, der 10.000 Einheiten unfraktioniertes Heparin enthält. Stellen Sie den Ferkelkörper in die Trendelenberg-Position, um die Blutdrainage in den Auffangbeutel zu verbessern.
Fahren Sie mit der Herzbeschaffung fort und halten Sie zwei Zentimeter des Lungenstamms zusammen mit der hinteren Wand des linken Vorhofs. Legen Sie das Herz in eine vier Grad Celsius Kochsalzlösung und trennen Sie die aufsteigende Aorta vom Lungenstamm. Stellen Sie sicher, dass die Aortenklappe und das Koronarostea nicht verletzt sind.
Führen Sie vier zugesagte vier Polypropylen-Nähte ein, fünf Millimeter unterhalb des distalen Abschnitts der aufsteigenden Aorta und führen Sie die Infusionskanüle in die Aorta ein. Ziehen Sie eine Schlauchklemme um die Aorta fest, um die Kanüle zu sichern. Führen Sie eine Drainagekanüle in den Lungenstamm ein und sichern Sie ihn mit einer drei Null-Polypropylen-Laufnaht.
Verschließen Sie die untere und obere Hohlvene mit fünf laufenden Nähten aus Polypropylen. Verschließen Sie die linke Atrium-Hinterwand mit einer laufenden Naht aus vier Polypropylen. Führen Sie eine linke Entlüftungskanüle durch die hintere Wand des linken Vorhofs ein und wickeln Sie einen Tourniquet herum.
Führen Sie eine vorgespannte Kanüle in das linke Vorhofanhängsel ein und fangen Sie ein Tourniquet herum. Verringern Sie den Pumpendurchfluss auf 200 Milliliter pro Minute. Verbinden Sie das Herz mit dem Aortenverbinder, nachdem Sie den Stecker entlüftet haben.
Stellen Sie den Aortendruck auf 30 Millimeter Quecksilbersäule bei Raumtemperatur ein. Führen Sie während der Reanimation eine sanfte Herzmassage durch, bis ein Sinusrhythmus wiederhergestellt ist. Erhöhen Sie den Pumpendurchfluss langsam innerhalb von 15 bis 25 Minuten in Schritten von 50 Milliliter pro Minute, um einen Aortendruck von 65 Millimetern Quecksilbersäule zu erreichen.
Gleichzeitig erhöhen Sie die starke Temperatur um Schritte von zwei bis vier Grad Celsius, um 37 Grad Celsius zu erreichen. Sobald der erforderliche Aortendruck und die hohe Temperatur erreicht sind, geben Sie bei Bedarf einen elektrischen Schlag bei fünf Joule ab und wiederholen Sie, bis der Sinusrhythmus wiederhergestellt ist. Befestigen Sie eine Epikardelektrode an der rechten ventrikulären hinteren Wand und verbinden Sie sie mit einem externen Herzschrittmacher.
Verbinden Sie dann die Lungenkanüle mit der Koronarflusslinie. Öffnen Sie die Vorspannleitung und passen Sie den Pumpenfluss an, um eine stabile Befüllung des Vorspannbehälters zu gewährleisten. Öffnen Sie die Aortennachlastleitung und klemmen Sie die Hauptleitung des für die Langandorfer Perfusion verwendeten Kreislaufs.
Das Nachladereservoir wird schrittweise aufgefüllt. Stellen Sie die Entwässerung des Reservoirs durch eine Überlaufleitung sicher, die den Starken zurück zum Hauptreservoir des Kreislaufs bringt. Beginnen Sie die Infusion von Dobutamin bei 0,04 Milligramm pro Minute.
Entfernen Sie dann die Entlüftung. Reinigen Sie den sieben French Pigtail Leitfähigkeitskatheter mit Kochsalzlösung und verbinden Sie ihn mit der Hardwareschnittstelle. Drücken Sie den Katheter vorsichtig in die französische Hülle des Introducers 8, die zuvor durch das linke Atriumdach eingeführt wurde, um mit der Mitralklappe ausgerichtet zu werden.
Stoppen Sie das epikardiale Tempo des Herzens, um Störungen des Leitwertsignals zu vermeiden. Zeichnen Sie Daten in einem stationären Zustand auf, wenn das Signal stabilisiert ist. Wählen Sie eine Reihe von 10 aufeinanderfolgenden Schleifen aus und öffnen Sie die Analysesoftware.
Um die endsystolische und die enddiastolische Druckvolumenbeziehung zu erhalten, zeichnen Sie das Signal während der Vorlastokklusion auf. Klemmen Sie die Vorhofprofusionsleitung allmählich fest, bis die Vorspannungsreduzierung wirksam ist. Lösen Sie dann langsam die Klemme.
Nachdem Sie einen sterilen Vorhang um das Herz gelegt haben, tragen Sie die Sonde auf die obere Wand des linken Vorhofs auf und drehen Sie den Schallkopf manuell, bis eine Vier-Kammer-Ansicht erhalten ist. Führen Sie dann den Ultraschallsondenmonitor aus, um drei und zwei Kammeransichten zu erhalten. Um das MWI zu bewerten, fahren Sie mit der Aufnahme von vier, drei und zwei Kammeransichten fort und erfassen gleichzeitig den arteriellen Druck.
Bewerten Sie die globale Längsdehnung mithilfe dieser Ansichten und der offenen MWI-Software. Verwenden Sie den invasiven Blutdruck, der vom externen Sensor am Perfusionskreislauf mithilfe der Schleifenerfassung erfasst wird. Informieren Sie die Software manuell über die genauen Öffnungs- und Schließzeiten der Aorten- und Mitralklappen.
Die echokardiographische Beurteilung während der Perfusion im Arbeitsmodus wurde im benutzerdefinierten Setup durchgeführt. Alle drei linksventrikulären Ansichten wurden zu einem beliebigen Zeitpunkt in allen Experimenten erhalten. Die mittlere linksventrikuläre Ejektionsfraktion der globalen Längsdehnung und M W I betrug etwa 40,8% minus 8,0% bzw. 65 Millimeter Quecksilbersäule.
Hämodynamische Parameter wurden entweder durch Leitfähigkeitskatheter oder Oberflächenechokardiographie während der Perfusion im Arbeitsmodus beurteilt. Während der Perfusion im Arbeitsmodus wurde in allen Experimenten eine signifikante Abnahme von M W I im Laufe der Zeit beobachtet. Eine ähnliche Abnahme wurde beim Herzzeitvolumen und anderen Parametern beobachtet, die mit der endsystolischen Druckvolumenbeziehung zusammenhängen.
Die echokardiographische Sonde muss sich auf dem Dach des linken Vorhofs befinden. Eine stabile Anforderung von mindestens drei bis sechs Myokardzyklen muss korrekt durchgeführt werden. Eine metabolische Beurteilung des Myokardgewebes und der Endothelfunktion würde eine ergänzende Beurteilung des Herztransplantats während der Ex-situ-Herzperfusion zur Optimierung der Perfusionseinstellungen bringen.
