Die 3D-Kultivierung von Organoiden aus murinen Darmkrypten und einer einzelnen Stammzelle für die Organoidforschung

Unsere Forschung konzentriert sich auf die Stammzellbiologie, insbesondere auf intestinale Stammzellen, die am Boden der Darmkrypta vorhanden sind. Ziel ist es, die Frage zu beantworten, wie die Homöostase von der Stammzelle im Darm aufrechterhalten wird. Diese 3D-Organkultur, die aus intestinalen Stammzellen gewonnen wird, bietet ein leistungsfähiges Werkzeug, um die Proliferation, Differenzierung und Erhaltung von Stammzellen zu untersuchen.

Die Organtechnologie unterstützt die Kultivierung von Darmstammzellen für eine lange Zeit, indem sie das Selbsterneuerungs- und Differenzierungspotenzial beibehält. Das Organoid wurde in großem Umfang für Grundlagen- und translationale Forschungsstudien zur Fragilität des Darms und zur Fragilität in der Vergangenheit verwendet. Unsere aktuelle Herausforderung besteht darin, das Koronarsystem zu verstehen, das an Darmepithelzellen und Stammzellen beteiligt ist.

Das Verständnis biologischer Prozesse, die durch das objektive Klonen ausgelöst werden, ist von zentraler Bedeutung. Eines unserer wichtigsten Ergebnisse ist, dass die Signalübertragung durch Klonen die Homöostase des intestinalen Epithelwachstums und der Differenzierung aufrechterhält. Unser Protokoll beschreibt eine Methode zur konsistenten Isolierung von Dünndarmkrypten und die anschließende Kultivierung von 3D-Organoiden, um die kryptische Freisetzungsrate zu verbessern.

Wir etablieren eine mechanische Isolationsmethode, bei der nach der Behandlung mit EDTA kräftig geschüttelt wird. EDTA und mechanische Dissoziation können kombiniert werden, um die kryptische Ausbeute zu verbessern. Darüber hinaus kann die richtige Geschicklichkeit die Virenkontamination auf ein Minimum reduzieren und die Anzahl der Krypten erhöhen.

Unsere Ergebnisse deuten darauf hin, dass die Signalübertragung durch die Muskel- und Organismusrezeptoren zusammenzuarbeiten scheint, um die Homöostase des Wachstums und der Differenzierung des Darmepithels aufrechtzuerhalten. Dies ermutigt uns zu der Hypothese, dass das nicht-neurokoronar-arteritische System eine wichtige Rolle bei der Moderation der intestinalen Stammzellnische gespielt hat.