Identifizierung von Peptiden kleiner extrazellulärer Vesikel aus Makrophagen aus dem Knochenmark

Wir untersuchen die funktionelle Rolle extrazellulärer Vesikel in der angeborenen Immunität. Wir haben ein Protokoll entwickelt, um kleine extrazelluläre Vesikel (sEVs) mittels differentieller Ultrazentrifugation zu isolieren und das Peptidom mittels LC-MS/MS zu identifizieren, wodurch die biologischen Schlüsselfunktionen der Peptide in sEVs aufgedeckt werden. Es wurde gezeigt, dass die extrazellulären Vesikel die interzelluläre Kommunikation vermitteln, indem sie Fracht zu Empfängerzellen transportieren, wie z. B. Proteine, Lipide und Nukleinsäuren.

Durch die Freisetzung antimikrobieller Komponenten fungieren sie als erste Verteidigungslinie gegen eindringende Mikroben in der angeborenen Immunität. Während die differentielle Ultrazentrifugation hochreine, kleine extrazelluläre sEVs liefert, kann sie zeitaufwändig sein und führt oft zu niedrigen Ausbeuten. In unserer Studie sind dies große Herausforderungen für die stabile Identifizierung von Peptiden mit geringer Häufigkeit in den sEVs.