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Optocinético respuesta ha sido ampliamente utilizada para evaluar las funciones visuales de larvas de pez cebra. Sin embargo, el protocolo estándar para las larvas de peces aún no es fácilmente aplicable en los adultos 1.5. Aquí, presentamos la forma de medir la okr de adultos de pez cebra mediante un nuevo protocolo que se establece en nuestro laboratorio.
Respuesta optocinético (okr) es un comportamiento que un animal hace vibrar sus ojos para seguir una rejilla girando alrededor de ella. Ha sido ampliamente utilizada para evaluar las funciones visuales de las larvas de pez cebra 1-5. Sin embargo, el protocolo estándar para las larvas de peces aún no es fácilmente aplicable en zabrafish adultos. Aquí, presentamos la forma de medir la okr de adultos de pez cebra con nuestro simple costumbre-construido aparatos que utilizan un nuevo protocolo que se establece en nuestro laboratorio. Tanto nuestro equipo y paso a paso el procedimiento de okr en adultos de pez cebra se muestran en este video. Además, las mediciones de la okr larvas, así como la respuesta optomotor (OMR) la prueba de adultos de pez cebra, también se demuestra en este vídeo. Este ensayo okr de pez cebra adulto en nuestro experimento puede durar hasta 4 horas. Prueba okr como aplicada en peces adultos se beneficiarán con la investigación de la función visual más eficientemente cuando los peces adultos sistema de visión se manipula.
Su-Qi Zou y Wu Yin contribuyeron igualmente a este trabajo.
Parte I: Construir el aparato okr
Los detalles se muestran en el vídeo de demostración.
Parte II: okr de adultos de pez cebra
Si su laboratorio ha construido un aparato okr, la clave de los adultos de pez cebra okr es mantener a los peces. En esta parte, vamos a mostrar paso a paso.
Nuestro aparato compone las siguientes partes similar a los otros mencionados. La cámara circular de pescado es de 7,0 cm de diámetro exterior, 6,5 cm de diámetro interior y 7,0 cm de alto. El tambor alrededor de la cámara de pescado es de 8,5 cm de diámetro a cabo, 7,5 cm de diámetro interior y 7,0 cm de alto. Podría girar en sentido horario y antihorario con la velocidad de 20 ~ 70 rotaciones por minuto (rpm). Once ciclos de rayas blanco y negro se dibuja en un papel los trazos que se adhirió en el exterior del tambor. El sistema de iluminación se compone de dos tubos de un círculo de luz de diámetro de 21 cm.
Figura 1. El modelo de la esponja. El acantilado hecho en este medio es para asegurarse de que el campo visual no se estaba protegido.
Figura 2. El ángulo entre el eje óptico y el eje del cuerpo.
a) Cuando la dirección de la rejilla es nasal a temporal, que define el ángulo en el frente del cuerpo de los peces es un ángulo negativo y el ángulo en el cuerpo de los peces es un ángulo positivo, a la inversa (para una revisión breve también ver ref. 6). Los números en esta cifra representa la secuencia de los pines.
b) okr ejemplo, el análisis de un pez en el grupo normal. Una película de un segundo fue trasladado a una serie de cuadros y los ángulos de los ojos de cada cuadro se midió con Image-Pro Plus. Cada punto en que esta cifra representa cada cuadro se midió.
Notas:
Parte III. Okr de las larvas de pez cebra
1. Metilcelulosa
Las larvas de pez cebra puede ser inmovilizado en una solución de metilcelulosa al 6%, mientras que mantener vivo durante mucho tiempo. Prepare una solución de metilcelulosa de la siguiente manera.
3. Procedimiento de okr
Parte IV. OMR de adultos de pez cebra
Pez cebra adulto OMR también podría llevarse a cabo con este aparato, basta con colocar una columna en la cámara de peces para la prevención de los peces que nadan a través del centro (mostrado en Fig.3a, velocidad de rotación es de 36 rpm, blanco y negro son los ciclos de 11).
Figura 3. OMR de adultos de pez cebra. (A) Una columna de plástico blanco se colocó en el centro de la cámara de pescado para la prevención de los peces que nadan a través de ella. (B) El tipo de coincidencia de los adultos de pez cebra después de la rejilla. La tasa de coincidencia se definió como la proporción de la rejilla de tiempo después de que el tiempo de grabación total. El valor del 50% indica que el pez está nadando al azar mientras que el 100% indica la rejilla siguientes peces muy bien. Ambos nervios ópticos fueron aplastados con una pinza de la joyería de unos 10 segundos. El comportamiento de los OMR apareció como una piscina al azar después de aplastar.
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De acuerdo con la definición de okr, es un fenómeno que los animales se mueven sus ojos para seguir una rejilla de rotación de manera espontánea. Si este comportamiento se ha realizado durante mucho tiempo (por ejemplo, por encima de 6 horas), los músculos del ojo puede estar cansado y el okr será atenuada.
Pez cebra adulto OMR ha sido descrita completamente por otros 7. En este vídeo, acaba de mostrar este comportamiento con nuestro aparato. Una vez que los nervios óptico...
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Agradecemos a la Sra. Fan Shen por su apoyo a la crianza de pez cebra. Esto es apoyado por las financiaciones al Dr. Hu Bing (Academia China de Ciencias, "Bai Ren Ji Hua", NSFC 30.870.833 y el Programa Nacional de Ciencia Básica de China, 2009CB941302).
Todos los experimentos con animales se realizaron de conformidad con las directrices y normas establecidas por la Universidad de Ciencia y Tecnología de China (USTC) Animal del Centro de Recursos y la Universidad de Cuidado de Animales y el empleo.
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Name | Company | Catalog Number | Comments |
Methylcellulose | Sigma-Aldrich | M6385 | Viscosity 25 cP |
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