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Method Article
La réponse optocinétique a été largement utilisé pour évaluer les fonctions visuelles du poisson zèbre larvaire. Néanmoins, le protocole standard pour les larves de poissons ne sont pas encore facilement applicables chez les adultes 1-5. Ici, nous introduisons la façon de mesurer l'OKR du poisson zèbre adulte en utilisant un nouveau protocole qui est établi dans notre laboratoire.
La réponse optocinétique (OKR) est un comportement que l'animal vibre ses yeux de suivre une grille tournante autour d'elle. Il a été largement utilisé pour évaluer les fonctions visuelles des larves de poisson zèbre 1-5. Néanmoins, le protocole standard pour les larves de poissons ne sont pas encore facilement applicables dans zabrafish adulte. Ici, nous introduisons la façon de mesurer l'OKR du poisson zèbre adulte avec nos personnalisé simple construit un appareil utilisant un nouveau protocole qui est établi dans notre laboratoire. Tant notre appareil et l'étape par étape la procédure d'OKR chez le poisson zèbre adulte sont illustrées dans cette vidéo. En outre, les mesures de l'OKR larvaire, ainsi que la réponse optomoteur (OMR) test de poisson zèbre adulte, il est aussi démontré dans cette vidéo. Ce test OKR du poisson zèbre adulte dans notre expérience peut durer jusqu'à 4 heures. Ces tests OKR appliquée dans les poissons adultes bénéficieront d'une enquête de la fonction visuelle plus efficace lorsque le système de vision adulte de poisson est manipulé.
Su-Zou et Qi Wu Yin ont contribué également à ce document.
Partie I: Construire l'appareil OKR
Détails sont montrés dans la vidéo de démonstration.
Partie II: OKR des adultes Zebrafish
Si votre laboratoire a construit un appareil OKR, la clé de l'adulte poisson zèbre OKR est de tenir le poisson. Dans cette partie, nous allons vous montrer étape par étape.
Notre appareil compose des pièces suivantes semblable à d'autres cités. La chambre de poissons circulaire est 7,0 cm de diamètre extérieur, 6,5 cm de diamètre intérieur et 7,0 cm de haut. Le tambour autour de la chambre de poisson est de 8,5 cm de diamètre sur 7,5 cm de diamètre intérieur et 7,0 cm de haut. Il pourrait tourner dans le sens anti-horaire à la vitesse de 20 ~ 70 rotations par minute (rpm). Onze cycles de rayures noires et blanches sont tracées sur un papier calque qui ont adhéré à l'extérieur du tambour. Le système d'éclairage est composé de deux tubes de lumière cercle dans 21 cm de diamètre.
Figure 1. Le modèle de l'éponge. La falaise fait dans ce milieu est de s'assurer que le champ visuel n'était pas protégé.
Figure 2. L'angle entre l'axe des yeux et l'axe du corps.
a) Lorsque la direction du réseau est-à-nez temporelle, nous avons défini l'angle au devant du corps du poisson est un angle négatif et l'angle au corps de poisson est un angle positif, et vice versa (pour revue voir aussi brève Réf. 6). Numéros de cette figure représentent la séquence des épingles.
b) par exemple l'analyse d'un OKR poissons dans le groupe normal. Un film d'une seconde a été transféré à une série de cadres et les angles des yeux de chaque cadre a été mesurée avec Image-Pro Plus logiciels. Chaque point dans ce chiffre représente chaque image, nous avons mesuré.
Notes:
Partie III. OKR des larves de poisson zèbre
1. Méthylcellulose
Les larves de poisson zèbre peut être immobilisé dans une solution de méthylcellulose à 6% tandis garder vivant pendant une longue période. Préparer une solution de méthylcellulose comme suit.
3. Procédure d'OKR
Partie IV. OMR des adultes Zebrafish
Adulte zèbre OMR pourrait également être réalisées avec cet appareil, il suffit de placer une colonne dans la chambre de poisson pour prévenir les poissons nageant dans le centre (montré dans Fig.3a, la vitesse de rotation est de 36 min, noir-blanc cycles sont 11).
Figure 3. OMR du poisson zèbre adulte. (A) Une colonne blanche plastiques a été placé au centre de la chambre de poisson pour prévenir les poissons qui nagent à travers elle. (B) Le taux de coïncidence de poisson zèbre adulte après la grille. Le taux de coïncidence était défini comme la proportion du temps caillebotis suivantes pour la durée d'enregistrement totale. La valeur de 50% indique que le poisson nage au hasard alors que 100% indique la grille suivante poissons très bien. Les deux nerfs optiques ont été écrasés avec une pince bijoux environ 10 secondes. Le comportement de l'OMR est apparu comme une nage aléatoire après écrasement.
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Selon la définition de l'OKR, c'est un phénomène que les animaux déplacer leurs yeux pour poursuivre une grille tournante spontanément. Si ce comportement a été menée pendant une longue période (par exemple, plus de 6 heures), les muscles de l'oeil peut-être fatigué et le OKR sera atténuée.
Adulte zèbre OMR a été complètement décrite par les autres 7. Dans cette vidéo, nous venons de vous montrer ce comportement avec notre appareil. Une fois les nerf...
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Nous remercions Mme Fan Shen pour son soutien à l'élevage du poisson zèbre. Ceci est soutenu par les financements de Dr Bing Hu (Académie chinoise des sciences, "Bai Ren Ji Hua", NSFC 30870833 et le Programme national des sciences de base de la Chine, 2009CB941302).
Toutes les expériences sur les animaux ont été effectuées en conformité avec les directives et règlements établis par l'Université des Sciences et Technologies de Chine (USTC) Ressources Animales Center et l'Université des soins aux animaux et le Comité d'utilisation.
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Name | Company | Catalog Number | Comments |
Methylcellulose | Sigma-Aldrich | M6385 | Viscosity 25 cP |
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