JoVE Logo
Autores
Contáctenos

Iniciar sesión

Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

En este artículo

  • Resumen
  • Resumen
  • Introducción
  • Protocolo
  • Resultados
  • Discusión
  • Divulgaciones
  • Agradecimientos
  • Materiales
  • Referencias
  • Reimpresiones y Permisos

Resumen

Las células linfoides innatas del grupo 2 (ILC2), implicadas en la inflamación tipo 2, participan principalmente en la respuesta a la infección por helmintos, enfermedades alérgicas, homeostasis metabólica y reparación de tejidos. En este estudio, se demuestra un procedimiento para aislar ILC2s de la mucosa nasal murina y detectar la expresión de CD226.

Resumen

Con abundantes investigaciones sobre células linfoides innatas del grupo 2 (ILC2) publicadas a lo largo de los años, se sabe ampliamente que las ILC2 están implicadas en la regulación de diversos procesos patológicos, incluida la inmunidad antihelmintos, la reparación de tejidos, la termogénesis y las enfermedades autoinmunes como el asma y la rinitis alérgica (AR). Las ILC2 residen permanentemente en tejidos periféricos como la piel, el intestino, los pulmones y la cavidad nasal; Sin embargo, hay información limitada sobre sus funciones exactas en la inmunidad de la mucosa nasal. CD226 es una molécula coestimuladora activadora, expresada principalmente en células asesinas naturales (NK), células T y monocitos inflamatorios. Sin embargo, sigue sin conocerse si las ILC2 expresan CD226 o desempeñan un papel en la patogénesis de las enfermedades relacionadas con ILC2. Aquí, establecimos un método para aislar e identificar ILC2s de la mucosa nasal y detectamos la expresión de CD226 en ILC2s obtenidas de ratones sanos y AR. Aquí, describimos este protocolo para el aislamiento e identificación de ILC2 de la mucosa nasal del ratón, que ayudará a explorar el mecanismo patológico interno de los trastornos inmunológicos en las enfermedades de la mucosa nasal.

Introducción

Las células linfoides innatas del grupo 2 (ILC2) se descubrieron por primera vez en los tejidos de la cavidad peritoneal de ratones y posteriormente se demostró que estaban presentes en la sangre y otros tejidos periféricos como los pulmones, la piel y la cavidad nasal 1,2,3. Como células residentes en tejidos, las ILC2 se mantienen y proliferan principalmente localmente y funcionan como los primeros protectores que responden a estímulos dañinos exógenos mediante la producción de numerosas citoquinas tipo 2 e induciendo inmunidad tipo 2 4,5,6. Las ILC2 también pueden ejercer sus efectos traficando hacia los tejidos infectados 7,8.

Al igual que las células T-helper 2 (Th2), las complicadas redes reguladoras de ILC2 aseguran su participación significativa en la progresión de diversas enfermedades inflamatorias tipo 2, incluidas las enfermedades alérgicas de las vías respiratorias 8,9. En el asma, las alarminas derivadas de células epiteliales pueden activar ILC2, que promueven aún más la inflamación pulmonar a través de la secreción de interleucina (IL)-4, IL-5 e IL-1310. Los estudios clínicos también han indicado que los niveles de ILC2 fueron significativamente elevados en el esputo y la sangre de pacientes con asma grave, lo que sugiere una asociación de ILC2 con la gravedad del asma y su función como predictor de la progresión del asma11.

La rinitis alérgica (RA) es una enfermedad inflamatoria crónica común que afecta a millones de personas anualmente, y los tratamientos efectivos para esta enfermedad son limitados12,13. Las ILC2 juegan un papel crucial en la fisiopatología de la RA, ya sea en la fase de sensibilización o en la fase de generación de síntomas e inflamación14. En pacientes con AR, los niveles de ILC2 en la sangre periférica han sido reportados elevados tanto local como sistémicamente15. Sin embargo, ciertos efectos y los mecanismos subyacentes de ILC2 sobre la fisiopatología y la progresión de AR aún requieren una exploración adicional.

CD226 - una glicoproteína transmembrana que sirve como molécula coestimuladora - se expresa principalmente en células asesinas naturales (NK), células T y otros monocitos inflamatorios16,17. La interacción de CD226 y sus ligandos (CD155 y/o CD112) o competidor (TIGIT) le permite participar en las funciones biológicas de varias células inmunes18. La unión de los ligandos en las células presentadoras de antígeno a CD226 en el linfocito citotóxico (CTL) promueve la activación de ambas células simultáneamente, mientras que la activación de CTL puede ser suprimida aún más por TIGIT (inmunorreceptor de células T con dominios Ig e ITIM), el competidor de CD226 19,20. Un estudio ex vivo en humanos reveló que CD226 y CD155 en células T regulan el equilibrio entre Th1 / Th17 y Th2 a través de la modulación diferencial de los subconjuntosTh 21. El CD226 también puede mediar la adhesión plaquetaria y la actividad de destrucción tumoral NK22,23. Mientras tanto, CD226 está bien estudiado en la patogénesis de diversas enfermedades infecciosas, enfermedades autoinmunes y tumores 18,24,25. En la actualidad, CD226 se ha convertido en un nuevo punto brillante para la inmunoterapia. Los estudios han encontrado que las vesículas extracelulares pueden revertir la expresión de CD226 en las células NK para restablecer su actividad citotóxica e intervenir en la progresión del cáncer de pulmón26. Un estudio reciente ha revelado un subgrupo de ILC del grupo intestinal fetal 3 caracterizado con una alta expresión de CD226 por secuenciación de ARN unicelular27, lo que indica que CD226 podría ejercer funciones en la inmunidad mediada por células linfoides innatas.

Nuestro conocimiento sobre las ILC2 en la inflamación de las vías respiratorias se basa principalmente en estudios sobre el asma; Sin embargo, se sabe poco sobre sus funciones en la inmunidad de la mucosa nasal. Por lo tanto, se estableció un protocolo para aislar e identificar ILC2s de la mucosa nasal. El estudio se centra en la expresión de CD226 en ILC2s en tejidos nasales y su variación entre ratones sanos y AR. Esto puede proporcionar nuevos conocimientos sobre los mecanismos subyacentes de la regulación mediada por ILC2 en la inmunidad local y servir como base para desarrollar nuevos enfoques para el tratamiento de AR.

Protocolo

Todos los experimentos se realizaron de acuerdo con las Pautas de Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. Todos los procedimientos y protocolos fueron aprobados por el Comité de Ética en Investigación Científica de la Cuarta Universidad Médica Militar (Nº 20211008).

1. Establecimiento del modelo Murine AR

  1. Alojar ratones machos y hembras C57BL / 6 de tipo salvaje (WT) de 8 a 12 semanas en condiciones específicas libres de patógenos y proporcionar comida y agua estándar de laboratorio.
  2. Emulsionar 50 μg de ovoalbúmina (OVA) en 0,2 ml de PBS estéril que contiene 2 mg de hidróxido de aluminio en un banco limpio para mantener la esterilidad. En los días 0, 7 y 14, inyecte intraperitonealmente ratones hembra o macho con 50 μg cada uno de OVA emulsionada.
  3. En los días 21, 22, 23, 24 y 25, instilar intranasalmente ratones con 50 μg de OVA disuelto en 30 μL de PBS estéril (15 μL por fosa nasal) bajo anestesia por inhalación (2-3% de isoflurano con una tasa de flujo de oxígeno o 0,5 L / min).
  4. Eutanasia a los ratones 24 h después del último desafío (día 26).

2. Aislamiento de células mononucleares (EMN) de la mucosa nasal

  1. Eutanasia a los ratones por luxación cervical bajo anestesia profunda. Remoje la cabeza de los ratones en etanol al 75% durante 5 minutos y evite que el etanol entre en la fosa nasal externa. Coloque el abdomen hacia abajo en la mesa de operaciones.
  2. Cortar los dientes anteriores. En la línea media de la cabeza, haga una incisión y abra la piel con tijeras.
  3. Retire la mandíbula inferior, corte toda la nariz a lo largo del extremo del paladar y coloque el tejido en una placa de Petri de 60 mm que contenga 5 ml de PBS helado. Usando tijeras y fórceps, retire la carne y los músculos adheridos a los huesos.
  4. Transfiera la nariz del ratón a una nueva placa de Petri de 60 mm que contenga 5 ml de PBS helado. Lave los huesos dos veces con 5 ml de PBS helado.
  5. Transfiera la nariz a un tubo de microcentrífuga de 1,5 ml.
  6. Aplastar y transferir suficientemente la nariz a un tubo de 15 ml que contenga 2 ml de tampón digestivo precalentado (RPMI 1640 medio suplementado con 1 mg/ml de colagenasa IV y 10 U/ml DNasa I).
  7. Sujetar la tapa y colocar el tubo verticalmente en un agitador orbital a 37 °C, con agitación continua a 120-150 rpm durante 40 min.
    NOTA: Precaliente el tampón de digestión a 37 °C para lograr la mayor actividad enzimática.
  8. Agregue 5 ml de medio RPMI 1640 helado que contenga 10% de suero bovino fetal (FBS) para detener el proceso de digestión.
  9. Filtrar a través de un filtro celular de 70 μm para eliminar fragmentos sólidos.
  10. Centrifugar a 500 x g durante 5 min, y luego desechar suavemente el sobrenadante.
  11. Vuelva a suspender el pellet en medio RPMI 1640 helado y centrifugar a 500 x g durante 5 min. Deseche suavemente el sobrenadante.
  12. Resuspender el pellet celular en 4 ml de medio de gradiente de densidad al 40% (160 μL de 10x PBS + 1,44 ml de solución madre de medios de gradiente de densidad + 2,4 ml de medio RPMI 1640).
  13. Inserte suavemente una pipeta Pasteur en el fondo del tubo y añada lentamente 2,5 ml de medio de gradiente de densidad al 80% (200 μL de 10x PBS + 1,8 ml de solución madre de medios de gradiente de densidad + 0,5 ml de medio RPMI 1640).
  14. Ajuste la velocidad de aceleración y desaceleración de la centrífuga por debajo de la tercera marcha y la centrífuga a 400 x g durante 15 minutos a temperatura ambiente (RT).
  15. Retire la capa superior de impurezas antes de drenar las células en la interfaz para evitar una posible contaminación. Drene cuidadosamente la capa de células mononucleares (MNC) en la interfaz de medios de gradiente de densidad 40%/80% en un tubo de 15 ml que contenga 2 ml de PBS helado usando una pipeta. Lave las celdas con PBS helado dos veces.

3. Tinción superficial para análisis FCM

  1. Cosechar las células y centrifugar a 500 x g durante 5 min a 4 °C. Resuspender el pellet celular en tampón de tinción (PBS suplementado con 2% FBS y 0,1% NaN3) y centrifugar a 500 x g durante 5 min a 4 °C. Deseche el sobrenadante.
    PRECAUCIÓN: Tenga cuidado al preparar el tampón de tinción. NaN3 es muy tóxico y puede causar daño a los órganos si se ingiere, inhala o entra en contacto con la piel. Además, evite la liberación al medio ambiente.
  2. Resuspender las células en solución bloqueante de 80 μL (anticuerpo anti-CD16/32 [1:100] diluido en tampón de tinción) por tubo. Incubar durante 30 min en la oscuridad a 4 °C.
  3. Sin lavar, añadir 20 μL de la dilución adecuada del cóctel de anticuerpos para la tinción superficial (Tabla 1).
  4. Agregue 1 μL (por prueba) de colorante de viabilidad reparable 520 (FVD) justo antes de agregar el cóctel de anticuerpos a las muestras. Incubar en la oscuridad a 4 °C durante 30 min. Establecer anticuerpos de isotipo coincidentes y fluorescencia menos uno (FMO) como controles negativos.
  5. Lavar las células en 500 μL de tampón de tinción centrifugando a 500 x g durante 5 min a 4 °C.
  6. Resuspender el pellet celular en 200 μL de tampón de tinción. Agregue 50 μL de cuentas de conteo absoluto de vórtice a las celdas teñidas y agite. Somételos a un análisis de citometría de flujo (FCM).
    NOTA: Los datos de FCM se obtuvieron utilizando un analizador de células espectrales y se analizaron con software de análisis de citometría de flujo (FCM).

Resultados

Se desarrolló un modelo murino inducido por OVA para explorar el papel de ILC2s en AR. La construcción del modelo murino AR se basó en estudios previos con ligeras modificaciones 28,29,30,31. Se capturó un video de 10 minutos para medir la frecuencia de los estornudos y el rascado nasal después del último desafío nasal. Los síntomas alérgicos de los ratones AR inducidos por OVA se pres...

Discusión

Las ILC2 están estrechamente asociadas con la inflamación tipo 2 y los trastornos inflamatorios, como lo demuestra un número creciente de estudios. Tanto los modelos de ratón como la observación humana contribuyen a una mejor comprensión de su función en las vías respiratorias superiores. En la fisiopatología del asma, las ILC2 se activan a través de la linfopoyetina del estroma tímico, IL-25 e IL-33, que son producidas principalmente por células epiteliales. Luego, reflejando las células Th2, las ILC2 produ...

Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

R.Z. fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (No. 81871258) y fondos proporcionados por la Cuarta Universidad Médica Militar (No.2020rcfczr). Y.Z. fue apoyado por el Programa de Investigación Básica de Ciencias Naturales de Shaanxi (No. 2021JM-081).

Materiales

NameCompanyCatalog NumberComments
Aluminum hydroxideMeilun biological Technology21645-51-2
CD11beBioscience11-0112-82Used in antibody coctail
CD11cBioLegend117306Used in antibody coctail
CD16/32BioLegend101302Clone: 93; Dilution 1:100
CD226BioLegend128812Used in antibody coctail
CD3eBioLegend100306Used in antibody coctail
CD45BioLegend103128Used in antibody coctail
CD45ReBioscience11-0452-82Used in antibody coctail
CD90.2BD Pharmingen553014Used in antibody coctail
Collagenase IVDIYIBioDY40128
CountBright absolute counting beadsInvitrogenC36950absolute counting beads
Dnase figure-materials-1052BeyotimeD7076
Fetal Bovine Serumgibco10270-106
Fixable Viability Dye eFluor 520 (FITC)eBioscience65-0867-14FVD
HBSS, calcium, magnesiumServicebioG4204-500
KLRG1eBioscience17-5893-81Used in antibody coctail
NaN3SIGMAS2002
NovoExpress softwareAgilentTechnologiesVersion 1.5.0flow cytometry (FCM) analysis software
OVASIGMA9006-59-1
PBS, 1xServicebioG4202-500
PBS, 10xServicebioG4207-500
PercollYeasen40501ES60density gradient media
RPMI 1640 culture mediaCorning10-040-CVRV
Spectral cell analyzerSONYSA3800

Referencias

  1. Huang, Y., et al. S1P-dependent interorgan trafficking of group 2 innate lymphoid cells supports host defense. Science. 359 (6371), 114-119 (2018).
  2. Price, A. E., et al. Systemically dispersed innate IL-13-expressing cells in type 2 immunity. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (25), 11489-11494 (2010).
  3. Ebihara, T., et al. Trained innate lymphoid cells in allergic diseases. Allergology International. 70 (2), 174-180 (2021).
  4. Gasteiger, G., Fan, X., Dikiy, S., Lee, S. Y., Rudensky, A. Y. Tissue residency of innate lymphoid cells in lymphoid and nonlymphoid organs. Science. 350 (6263), 981-985 (2015).
  5. Moro, K., et al. Interferon and IL-27 antagonize the function of group 2 innate lymphoid cells and type 2 innate immune responses. Nature Immunology. 17 (1), 76-86 (2016).
  6. Helou, D. G., et al. LAIR-1 acts as an immune checkpoint on activated ILC2s and regulates the induction of airway hyperreactivity. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 149 (1), 223-236 (2022).
  7. Karta, M. R., et al. beta2 integrins rather than beta1 integrins mediate Alternaria-induced group 2 innate lymphoid cell trafficking to the lung. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 141 (1), 329-338 (2018).
  8. Helou, D. G., et al. PD-1 pathway regulates ILC2 metabolism and PD-1 agonist treatment ameliorates airway hyperreactivity. Nature Communications. 11 (1), 3998 (2020).
  9. Kabata, H., Moro, K., Koyasu, S. The group 2 innate lymphoid cell (ILC2) regulatory network and its underlying mechanisms. Immunological Reviews. 286 (1), 37-52 (2018).
  10. Zheng, H., et al. The role of Type 2 innate lymphoid cells in allergic diseases. Frontiers in Immunology. 12, 586078 (2021).
  11. Maggi, L., et al. The dual function of ILC2: From host protection to pathogenic players in type 2 asthma. Molecular Aspects of Medicine. 80, 100981 (2021).
  12. Meltzer, E. O., et al. Burden of allergic rhinitis: results from the Pediatric Allergies in America survey. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 124, 43-70 (2009).
  13. Wheatley, L. M., Togias, A. Clinical practice. Allergic rhinitis. The New England Journal of Medicine. 372 (5), 456-463 (2015).
  14. Bousquet, J., et al. Allergic rhinitis. Nature Reviews. Disease Primers. 6 (1), 95 (2020).
  15. Kato, A. Group 2 innate lymphoid cells in airway diseases. Chest. 156 (1), 141-149 (2019).
  16. Nakamura-Shinya, Y., et al. DNAM-1 promotes inflammation-driven tumor development via enhancing IFN-gamma production. International Immunology. 34 (3), 149-157 (2022).
  17. Braun, M., et al. CD155 on Tumor cells drives resistance to immunotherapy by inducing the degradation of the activating receptor CD226 in CD8(+) T cells. Immunity. 53 (4), 805-823 (2020).
  18. Huang, Z., Qi, G., Miller, J. S., Zheng, S. G. CD226: An emerging role in immunologic diseases. Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, 564 (2020).
  19. Gilfillan, S., et al. DNAM-1 promotes activation of cytotoxic lymphocytes by nonprofessional antigen-presenting cells and tumors. Journal of Experimental Medicine. 205 (13), 2965-2973 (2008).
  20. Zhang, D., et al. TIGIT-Fc alleviates acute graft-versus-host disease by suppressing CTL activation via promoting the generation of immunoregulatory dendritic cells. Biochimica et Biophysica Acta: Molecular Basis of Disease. 1864, 3085-3098 (2018).
  21. Lozano, E., Joller, N., Cao, Y., Kuchroo, V. K., Hafler, D. A. The CD226/CD155 interaction regulates the proinflammatory (Th1/Th17)/anti-inflammatory (Th2) balance in humans. Journal of Immunology. 191 (7), 3673-3680 (2013).
  22. Kojima, H., et al. CD226 mediates platelet and megakaryocytic cell adhesion to vascular endothelial cells. Journal of Biological Chemistry. 278 (38), 36748-36753 (2003).
  23. Martinet, L., Smyth, M. J. Balancing natural killer cell activation through paired receptors. Nature Reviews. Immunology. 15 (4), 243-254 (2015).
  24. Yeo, J., Ko, M., Lee, D. H., Park, Y., Jin, H. S. TIGIT/CD226 axis regulates anti-tumor immunity. Pharmaceuticals. 14 (3), 200 (2021).
  25. Nakano, M., et al. Association of elevated serum soluble CD226 levels with the disease activity and flares of systemic lupus erythematosus. Scientific Reports. 11 (1), 16162 (2021).
  26. Chang, W. A., et al. miR-150-5p-containing extracellular vesicles are a new immunoregulator that favor the progression of lung cancer in hypoxic microenvironments by altering the phenotype of NK cells. Cancers. 13 (24), 6552 (2021).
  27. Stehle, C., et al. T-bet and RORalpha control lymph node formation by regulating embryonic innate lymphoid cell differentiation. Nature Immunology. 22 (10), 1231-1244 (2021).
  28. Piao, C. H., Fan, Y. J., Nguyen, T. V., Song, C. H., Chai, O. H. Mangiferin alleviates ovalbumin-induced allergic rhinitis via Nrf2/HO-1/NF-kappaB signaling pathways. International Journal of Molecular Sciences. 21 (10), 3415 (2020).
  29. Zhao, Y., Tao, Q., Wu, J., Liu, H. DMBT1 has a protective effect on allergic rhinitis. Biomedicine and Pharmacotherapy. 121, 109675 (2020).
  30. Piao, C. H., et al. Ethanol extract of Dryopteris crassirhizoma alleviates allergic inflammation via inhibition of Th2 response and mast cell activation in a murine model of allergic rhinitis. Journal of Ethnopharmacology. 232, 21-29 (2019).
  31. Liang, M. J., et al. Immune responses to different patterns of exposure to ovalbumin in a mouse model of allergic rhinitis. European Archives of Oto-Rhino-Laryngology. 273 (11), 3783-3788 (2016).
  32. Ebbo, M., Crinier, A., Vely, F., Vivier, E. Innate lymphoid cells: major players in inflammatory diseases. Nature Reviews. Immunology. 17 (11), 665-678 (2017).
  33. Seehus, C. R., et al. Alternative activation generates IL-10 producing type 2 innate lymphoid cells. Nature Communications. 8 (1), 1900 (2017).
  34. Cai, T., et al. IL-17-producing ST2(+) group 2 innate lymphoid cells play a pathogenic role in lung inflammation. The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 143 (1), 229-244 (2019).
  35. Golebski, K., et al. IL-1beta, IL-23, and TGF-beta drive plasticity of human ILC2s towards IL-17-producing ILCs in nasal inflammation. Nature Communications. 10 (1), 2162 (2019).
  36. Lei, A., Zhou, J. Cell-surface molecule-mediated cell-cell interactions in the regulation of ILC2-driven allergic inflammation. Cellular and Molecular Life Sciences. 76 (22), 4503-4510 (2019).
  37. Maazi, H., et al. ICOS:ICOS-ligand interaction is required for type 2 innate lymphoid cell function, homeostasis, and induction of airway hyperreactivity. Immunity. 42 (3), 538-551 (2015).
  38. Lei, A. H., et al. ICAM-1 controls development and function of ILC2. The Journal of Experimental Medicine. 215 (8), 2157-2174 (2018).
  39. Drake, L. Y., Iijima, K., Kita, H. Group 2 innate lymphoid cells and CD4+ T cells cooperate to mediate type 2 immune response in mice. Allergy. 69 (10), 1300-1307 (2014).
  40. Wang, Y., et al. The comparation of intraperitoneal injection and nasal-only delivery allergic rhinitis model challenged with different allergen concentration. American Journal of Rhinology & Allergy. 33 (2), 145-152 (2019).
  41. Niu, Y., et al. HIF1alpha deficiency in dendritic cells attenuates symptoms and inflammatory indicators of allergic rhinitis in a SIRT1-dependent manner. International Archives of Allergy and Immunology. 181 (8), 585-593 (2020).
  42. Van Nguyen, T., et al. Anti-allergic rhinitis activity of alpha-lipoic acid via balancing Th17/Treg expression and enhancing Nrf2/HO-1 pathway signaling. Scientific Reports. 10 (1), 12528 (2020).
  43. Pyun, B. J., et al. Gardenia jasminoides attenuates allergic rhinitis-induced inflammation by inhibiting periostin production. Pharmaceuticals (Basel). 14 (10), 986 (2021).
  44. Liu, Z., et al. Analysis of expression of ILC2 cells in nasal mucosa based on animal model of allergic bacterial infection rhinitis. Journal of Infection and Public Health. 14 (1), 77-83 (2021).
  45. Hu, B., Wang, Y., Zheng, G., Zhang, H., Ni, L. Effect of parasympathetic inhibition on expression of ILC2 cells in a mouse model of allergic rhinitis. The World Allergy Organization journal. 14 (9), 100582 (2021).
  46. Autengruber, A., Gereke, M., Hansen, G., Hennig, C., Bruder, D. Impact of enzymatic tissue disintegration on the level of surface molecule expression and immune cell function. European Journal of Microbiology & Immunology. 2 (2), 112-120 (2012).
  47. Krisna, S. S., et al. Optimized protocol for immunophenotyping of melanoma and tumor-bearing skin from mouse. STAR Protocols. 2 (3), 100627 (2021).
  48. Hoyler, T., et al. The transcription factor GATA-3 controls cell fate and maintenance of type 2 innate lymphoid cells. Immunity. 37 (4), 634-648 (2012).
  49. Huang, Y., et al. IL-25-responsive, lineage-negative KLRG1(hi) cells are multipotential 'inflammatory' type 2 innate lymphoid cells. Nature Immunology. 16 (2), 161-169 (2015).
  50. Loering, S., et al. Differences in pulmonary group 2 innate lymphoid cells are dependent on mouse age, sex and strain. Immunology and Cell Biology. 99 (5), 542-551 (2021).
  51. Lin, L., et al. Allergic inflammation is exacerbated by allergen-induced type 2 innate lymphoid cells in a murine model of allergic rhinitis. Rhinology Journal. 55 (4), 339-347 (2017).

Reimpresiones y Permisos

Solicitar permiso para reutilizar el texto o las figuras de este JoVE artículos

Solicitar permiso

Explorar más artículos

Este mes en JoVEN mero 183

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacidad

Condiciones de uso

Políticas

Contáctenos

RECOMIENDE A LA BIBLIOTECA

BOLETINES de JoVE

Investigación

Educación

Autores

Bibliotecarios

ACERCA DE JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. Todos los derechos reservados