Detección de análogos de fentanilo mediante LC-TIMS-TOF MS/MS

Resumen

Un método para el cribado de análogos del fentanilo basado en su tiempo de retención, movilidad y patrón de fragmentación de espectrometría de masas.

Resumen

El uso de fentanilo y la aparición de análogos del fentanilo en las últimas décadas se ha convertido en una preocupación cada vez mayor para la comunidad en general. El fentanilo y sus análogos son los principales contribuyentes a las sobredosis fatales y no fatales en los Estados Unidos. Los casos más recientes de sobredosis relacionadas con el fentanilo están relacionados con el fentanilo fabricado ilícitamente y su extrema potencia asociada. En el presente trabajo, describimos un protocolo analítico de alto rendimiento para el tamizaje de análogos del fentanilo. El uso de cromatografía líquida complementaria, espectrometría de movilidad de iones atrapados y espectrometría de masas en tándem permite la separación y asignación de cientos de análogos de fentanilo a partir de una sola muestra en un solo escaneo. El enfoque descrito aprovecha el reciente desarrollo de la adquisición dependiente de los datos y la adquisición independiente de los datos utilizando la acumulación paralela en la trampa de movilidad seguida de la fragmentación secuencial utilizando la disociación inducida por colisión. Los análogos del fentanilo se asignan con confianza en función de su tiempo de retención, movilidad y patrón de fragmentación de la EM.

Introducción

El fentanilo y sus análogos son los principales contribuyentes a las sobredosis fatales y no fatales en los Estados Unidos ^1,2. Los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades (CDC) informaron que el número de muertes por sobredosis relacionadas con opioides sintéticos entre 2013 y 2021 fue de más de 258,000. Solo en 2021, más de 68,000 muertes por sobredosis podrían atribuirse a los opioides sintéticos, lo que representa un total del 82% de todas las muertes relacionadas con sobredosis en el país³. Desde 2013, se han identificado cientos de....

Protocolo

1. Preparación de la muestra

1. Guarde el kit de detección de análogos de fentanilo a -20 °C una vez que se hayan recibido. Vuelva a suspender cada muestra a una concentración final de 400 μg/mL mediante la adición de 500 μL de metanol puro de grado LC/MS.
2. Mezclar con una batidora de placas o vórtice a 400 rpm durante 1 h o vórtice a velocidad media durante 15 min. Después de la resuspensión, almacene los viales a -20 °C.
3. Diluya cada patrón hasta una concentración final de 1 ng/mL utilizando metanol puro de grado LC/MS.
4. Agrupe los patrones en grupos, de modo que cada grupo no conte....

Discusión

La separación analítica de muestras biológicas que contienen un alto contenido de isoméricos puede ser un desafío analítico. En este trabajo, el método descrito tiene como objetivo caracterizar 29 conjuntos de isómeros, para un total de 185 análogos de un kit estándar de 250 opioides. Durante la preparación del grupo de prueba, es importante asegurarse de que no haya dos análogos con m/z que no puedan distinguirse experimentalmente. Los datos descritos aquí utilizan estánda.......

Materiales

Name	Company	Catalog Number	Comments
Ammonium formate for HPLC	Fluka	17843-50G
Eppendorf Snap-Cap Microcentrifuge Safe-Lock Tubes	Fisher	05-402-25
ESI-L Low Concentration Tuning mix	Agilent	G1969-85000
Fentanyl Analog Screening (FAS) Kit	Cayman Chemical	9003237, 9003286, 9003380, 9003381	kit of 250 snthetic opioids, 210 fentanyl analogs, broken up into one kit and emergent panel versions 1-4
Formic acid Optima LC/MS	Fisher	A117-50
Onyx guard column (5 x 4.6 mm)	Phenomenex	CHO-7649	guard column for C18 columns
Onyx monolithic C18 HPLC column (100 x 4.6 mm)	Phenomenex	CHO-7643	reverse phase C18 LC column
Optima grade acetonitrile	Fisher	A996-4
Optima grade methanol	Fisher	A454-4
Optima grade water	Fisher	W7-4
Pipette	Fisher	05-719-510	kit of 1-10 µL, 10-100 µL, and 100-1000 µL pipette
Pipette tips 10µL	Fisher	94060100
Pipette tips 1000µL	Fisher	94056710
Pipette tips 200µL	Fisher	94060310
Plate mixer	IKA	MS 3 D S1	IKA MS 3 digtital
Prominence LC-20 CE ultrafast liquid chromatograph	Shimadzu, Japan		equiped with DGU-20A5, LC-20AD, SIL-20AC, CTO-20A, SPD-M20A, CBM-20A, SPD-20A
timsTOF Pro	Bruker Daltonics Inc., Billerica, MA		timsTOF instrument with PASEF