El cultivo 3D de organoides a partir de criptas intestinales murinas y una sola célula madre para la investigación de organoides

Nuestra investigación se centra en la biología de las células madre, especialmente las células madre intestinales, presentes en la parte inferior de la cripta intestinal. El objetivo es responder cómo la homeostasis es mantenida por la célula madre en el intestino. Este cultivo de órganos 3D derivado de células madre intestinales proporciona una poderosa herramienta para estudiar la proliferación, diferenciación y mantenimiento de las células madre.

La tecnología de órganos ayuda al cultivo de células madre intestinales durante mucho tiempo al retener el potencial de autorrenovación y diferenciación. El organoide ha sido ampliamente utilizado para estudios de investigación básica y traslacional sobre la fragilidad intestinal y la fragilidad pasada. Nuestro reto actual es comprender el sistema coronario implicado en las células epiteliales intestinales y las células madre.

Comprender los procesos biológicos desencadenados por la clonación objetiva es de vital importancia. Uno de nuestros hallazgos significativos es que la señalización a través de la clonación mantiene la homeostasis del crecimiento epitelial intestinal y la diferenciación. Nuestro protocolo describe un método para aislar consistentemente criptas del intestino delgado y el cultivo posterior de organoides 3D para mejorar la velocidad de liberación de criptales.

Establecemos un método de aislamiento mecánico que implica agitación vigorosa, después del tratamiento con EDTA. EDTA y disociación mecánica se pueden combinar para mejorar los rendimientos criptográficos. Además, la habilidad adecuada puede reducir la contaminación del virus al mínimo, aumentando el número de criptas.

Nuestros hallazgos sugieren que la señalización a través de los receptores musculares y del organismo parece trabajar juntos para mantener la homeostasis del crecimiento epitelial intestinal y la diferenciación. Esto nos anima a plantear la hipótesis de que el sistema no neurocoronario-arterítico jugó un papel importante en la moderación del nicho de células madre intestinales.