Para empezar, utilice una pipeta Pasteur de plástico para transferir suavemente los trozos de cerebro teñidos con fluorescencia a platos confocales con fondo de cristal. Llene estos platos con ACSF equilibrado. Con una malla de hierro, asegure las rodajas de cerebro de rata en su lugar.
A continuación, coloque las placas confocales con fondo de vidrio en la platina de un microscopio confocal. Coloque el corte agudo de cerebro en el fondo del plato y perfunde con ACSF equilibrante durante la toma de imágenes. Usando el objetivo 40X, vea las células de la pared de la microvasculatura cortical cerebral.
A continuación, utilice un software compatible para capturar pilas de imágenes. Identifique la microvasculatura cerebral y los pericitos en función de su red y morfología, luego localice una región específica que contenga una red de microvasculatura cerebral en cada corte de cerebro y capture imágenes. En condiciones fisiológicas normales, los pericitos cerebrales no experimentan muerte celular.
Se detectaron pericitos viables que no estaban teñidos con yoduro de propidio. Los modelos de HSA mostraron pericitos vitales dentro de la microvasculatura. También se detectaron pericitos no vitales.
Los pericitos no vitales marcados con yoduro de propidio "permanecieron desprendidos a toda la microvasculatura.
