El modelo de perforación endovascular combinado con resonancia magnética postoperatoria permite verificar el sangrado y excluir otras patologías intercraneales. Una de las ventajas de este enfoque es la opción de cuantificar el volumen de sangrado para un análisis adicional de subgrupos. Comience afeitando el vello del cuello del ratón.
Aplique ungüento oftálmico durante el procedimiento. Desinfectar la piel con etanol al 70% seguido de betadina o clorhexidina y aplicar 1%lidocaína. Coloque el ratón en posición supina con la cabeza y el torso mirando hacia arriba.
Estabilice el ratón dorsalmente usando cinta adhesiva en las cuatro extremidades. Estira la piel del cuello y levántala. Despliegue la piel del cuello desde la barbilla hasta el borde superior del esternón y separe las glándulas salivales del tejido conectivo adyacente.
Exponga la vaina de la arteria carótida común separando los músculos a lo largo de un lado de la tráquea. Exponer el campo quirúrgico con un retractor o un hisopo de gasa estéril y desprender la arteria carótida y dejar un 8-0 libre sutura de seda sin ligarla, asegurando no dañar el nervio vago. Diseccionar el extremo distal de la ECA y ligar los vasos dos veces en posición distal.
En el punto medio del segmento de filamento dos veces ligado se desune el ECA y crea un muñón de vaso. Deje una sutura de seda alrededor del ICA sin cerrarlo. Prearorganice una ligadura para el filamento alrededor del muñón ECA.
No lo cierre hasta la inserción exitosa del filamento. Cierre el ICA y el CCA temporalmente usando una sutura o micro clip. Usando tijeras microvasculares, haga una incisión en el ECA e inserte un filamento 5-0 alternativamente 4-O Prolene, y avance hacia CCA.
Cierre la ligadura en el ECA mientras separa el micro clip en el ICA y el CCA. Tire hacia atrás del filamento suavemente y ajuste el muñón ECA en la dirección craneal mientras invagina el filamento a través de la bifurcación en el ICA. Coloque la punta del filamento medialmente en un ángulo de aproximadamente 30 grados con respecto a la línea media traqueal en plano horizontal y empuje dentro de ICA.
En la bifurcación ACA-MCA, se observa resistencia. Mueva el filamento hacia adelante hasta tres milímetros y perfore el ACA derecho. Retire rápidamente el filamento al muñón ECA permitiendo el flujo sanguíneo en el espacio subaracnoideo.
Coloque el filamento en esta posición durante 10 segundos. Retire el filamento. El CCA se puede cerrar temporalmente de antemano para evitar la pérdida excesiva de sangre y luego retirar el filamento.
Ligar el ECA usando suturas preestablecidas y volver a abrir el CCA si lo ha cerrado antes. La presencia de temblores musculares, miosis ipsilateral, jadeo por respirar, alteración del ritmo cardíaco e incontinencia urinaria pueden ser evidencia de apoyo de una cirugía exitosa. Asegúrese de que no haya fugas de sangrado y desinfecte la piel.
Sutura la herida. Coloque el ratón en una caja térmica y espere hasta que el animal tenga la conciencia suficiente para tener reclinación esternal. Para aliviar el dolor, administre 1,2 miligramos por mililitro de paracetamol.
Usando un escáner de roedores en un resonador de cabeza de ratón, realice una resonancia magnética después de 24 horas de cirugía, coloque el mouse sobre una manta de agua circulante calentada a 37 grados centígrados. Primero, realice un escaneo de referencia rápida adquiriendo tres paquetes de rebanadas ortogonales. A continuación, utilice una secuencia de eco de giro turbo turbo ponderada T2 de alta resolución para obtener imágenes.
Transfiera los datos al formato de imagen DICOM y utilice el software Imagej para la clasificación SAH y la volumetría de coágulos sanguíneos. Para asegurar el sitio de sangrado correcto y excluir otras patologías intracraneales, se realizaron resonancias magnéticas 24 horas después de la operación. El grado de sangrado de LAH se cuantificó en función de las resonancias magnéticas ponderadas en T2.
Entre los ratones examinados, el 14% de los animales se clasificaron como sangrado de grado cero sin evidencia radiológica de HSA o hemorragia. La mayoría de los animales mostraron grados de sangrado entre uno y tres, y el 10% mostró sangrado de cuarto grado que se definió SAH a lo largo del accidente cerebrovascular y / o ICH. Se cuantificó el volumen total de sangrado de cada grado de HSA, basado en el grosor de la HSA, lo que ayuda a determinar el área de sangrado.
El volumen de sangrado calculado en función del grosor axial de la HSA mostró diferencias significativas en sus correspondientes subgrupos de grado uno a tres. A lo largo de toda la cirugía, una disección completa del tejido de conexión circundante es crucial para el posicionamiento correcto de las suturas. Asegúrese de que la longitud del muñón ECA sea suficiente para que tenga un espacio de trabajo cómodo para la ligadura, la incisión y la inserción del filamento.
Nunca empuje el filamento hacia adelante cuando sienta resistencia antes de la bifurcación MCA-ACA para evitar la perforación prematura del vaso.
