Este método puede responder preguntas clave en el crecimiento y morfología de estolones y rizomas de diferentes cultivos como pastos de césped, prados y pastos. La principal ventaja de esta técnica es que la longitud del estolón y del rizoma se puede medir en muestras con una gran cantidad de biomasa para las que el peso es el único parámetro utilizado actualmente. Recoger muestras utilizando un tomamuestras de núcleo de suelo.
Incluya la biomasa del suelo y una capa de suelo con una profundidad adecuada, dependiendo de las especies para asegurar la recolección de estolones y rizomas. Alternativamente, defina el área de superficie para recoger con un marco y recoja las muestras con una pala. Etiquete cada muestra con cinta de laboratorio.
Para limpiar las muestras de biomasa, coloque la muestra en un tamiz grande con aberturas de 0,5 a 1,5 milímetros, dependiendo del tamaño de estolón o rizoma. Las aberturas deben ser lo suficientemente pequeñas como para retener todos los estolones y rizomas, pero lo suficientemente grandes como para permitir que las partículas del suelo sean eliminadas. Limpie las muestras con una corriente de agua con suficiente potencia para eliminar las partículas del suelo sin dañar las plantas.
Recuperar las muestras limpias y colocarlas en una bandeja con toallas de papel, teniendo cuidado de etiquetar las bandejas adecuadamente. Limpie aún más las muestras eliminando raíces y hojas con tijeras. Durante este proceso, separe los estolones y rizomas si es necesario y registre información adicional, como el número de plantas, labradores y estolones por planta.
Coloque los estolones y rizomas en bolsas con etiquetas en papel. Coloque la muestra en una bandeja de plástico transparente del equipo de escaneo estándar WinRHIZO. Coloque manualmente los estolones y rizomas utilizando fórceps de laboratorio para minimizar la superposición.
Es posible que sea necesario dividir muestras grandes en subsondas. Coloque la bandeja en la superficie del escáner, luego encienda el escáner y comience a ejecutar el programa. Para un mayor control en una imagen guardada, compruebe el ppp de la imagen en el menú Imagen selección del comando Parámetro de adquisición de imagen.
Para una buena clasificación de los píxeles que pertenecen a los órganos escaneados, compruebe el umbral y el análisis seleccionando el comando Distinción de fondo raíz. Compruebe que toda la superficie de la bandeja se escaneará en el menú Imagen seleccionando el comando Parámetro de adquisición de imagen. Ahora, compruebe la clase de diámetro mostrada para la distribución de órganos por diámetro en el área gráfica por encima de la imagen escaneada.
Seleccione 20 clases de ancho igual con intervalos de 0,1 milímetros haciendo clic en el acceso horizontal del gráfico. Esta función permite la exclusión de datos pertenecientes a raíces u órganos pequeños cuando los estolones o rizomas no se limpiaban perfectamente. La literatura informa que la mayoría de las raíces de las especies de césped tienen un diámetro inferior a 0,2 milímetros.
Ejecute el primer análisis de muestra y compruebe que la edición permite un buen análisis. Siga las instrucciones del software para guardar la imagen. Por último, procese el análisis siguiente de la opción de software y etiquete la imagen y el análisis con la etiqueta de muestra.
Continúe con el escaneo de todas las muestras. Para realizar la medición del peso seco, coloque las muestras escaneadas en una bandeja de aluminio tarado en un balance electrónico preciso y registre su tara. Repita este paso para todas las muestras escaneadas.
Inserte todas las muestras en un conjunto a menudo a 105 grados Celsius y séquelos durante 24 horas. Al día siguiente, retire las muestras y espere hasta que el peso del tejido se haya estabilizado. Luego, pesa todas las muestras con su tara.
Restar la tara del peso registrado para obtener el peso neto de cada muestra. Ejemplo de resultados de un ensayo de campo que compara la densidad de longitud de estolón y rizoma de cuatro cultivares de hierba de Bermudas tipo césped. Hay una diferencia significativa en la densidad de longitud de estololon entre los cultivares vegetativos Patriot y Tifway, y los cultivares de semillas La Paloma y Yukon en muestras recogidas en julio de 2014.
Para los rizomas, Patriot muestra la densidad de longitud más alta, seguido de Tifway, y los cultivares de semillas. El desarrollo de la densidad de longitud de estololon de cultivar Patriot a lo largo del período de estudio muestra un aumento de marzo de 2014 a julio de 2014 y no variaba de julio de 2014 a julio de 2015. Pocos rizomas fueron encontrados en muestras recogidas en octubre de 2013 y marzo de 2014.
La densidad de la longitud del rizoma aumenta en julio de 2014, alcanzando los valores más altos. Pero vuelve a disminuir en octubre de 2014. Al intentar este procedimiento, es importante recordar seleccionar muestras representativas, limpiar meticulosamente estolones y rizomas antes del análisis, y seleccionar el ancho de las clases de diámetro utilizando opciones de software para incluir sólo estolones y rizomas en el análisis.
