El objetivo general de este método es la visualización de la función de la arteria coronaria descendente anterior izquierda en ratas utilizando ecocardiografía para calcular la reserva de flujo coronario. Este método ofrece una importante herramienta de evaluación para el diagnóstico de la disfunción microvascular en corazones enfermos y para evaluar posibles tratamientos a lo largo del estudio. Aunque se ha demostrado que la terapia de reperfusión salva el miocardio en peligro y mejora la función ventricular izquierda, pueden producirse anomalías funcionales de pequeños vasos coronarios después de la recanalización de la arteria coronaria.
Este método puede proporcionar información sobre la microcirculación coronaria de ratas, así como en otros modelos, incluyendo infarto de miocardio, y sobrecarga de volumen de presión del ventrículo izquierdo. Antes de la cirugía de reperfusión previa a la isquemia, confirme la falta de respuesta al pellizco del dedo del pie en una rata Fischer 344 anestesiada. Afeita el cabello del pecho.
Aplicar pomada a los ojos del animal y colocar al animal en la posición supina en una plataforma de calentamiento incorporada de 37 a 38 grados Celsius. Conecte la sonda lineal de 13 a 24 megahercios a la máquina de ultrasonido. Establezca el ajuste preestablecido de la aplicación en el ajuste de imágenes cardíacas y utilice el sistema de rieles para colocar la sonda para obtener la vista de eje corto parasternal.
Utilice el micromaniprógrafo del eje XY para mover la sonda en la dirección rostral para localizar la arteria pulmonar. Mueva la sonda, haciendo que el ventrículo izquierdo sea más fácilmente visible. Una vez capturada la imagen en modo B y Cine almacenado, haga clic en el color Doppler y visualice la arteria coronaria en el eje corto.
El color rojo, como se observa en tiempo real, es indicativo de la dirección del flujo. Después de visualizar la arteria coronaria descendente anterior inferior en el modo Doppler de color, cambie el modo a la onda de pulso y busque la presencia de una línea indicadora amarilla en la arteria coronaria. Coloque la línea de onda de pulso amarillo en el centro de la arteria coronaria, teniendo cuidado de que el ángulo sea paralelo a la dirección del flujo y utilice Cine Store para capturar la velocidad del flujo coronario descendente anterior izquierdo en reposo y la diásola pico de las formas de onda.
Después de obtener la velocidad de flujo descendente anterior izquierda en reposo, coloque una pequeña tira de gasa alrededor de la base de la cola y use hemostats para agarrar y torcer el torniquete para aplicar presión, haciendo que la vena se agrande. Coloque cuidadosamente una aguja de mariposa de infusión de calibre 25 unida a una jeringa de 10 mililitros cargada con dobutamina en la vena de cola dilatada y estabilice la aguja con pegamento y un pedazo de cinta quirúrgica. Una vez asegurada la línea de perfusión, retire los hemostats y el torniquete para recuperar el flujo y coloque la jeringa en una bomba de perfusión para inyectar 20 microgramos por kilogramo por minuto.
Durante la perfusión, controle cuidadosamente el pico de la arteria descendente anterior izquierda y la frecuencia cardíaca, registrando periódicamente los picos de onda de pulso de la arteria descendente anterior izquierda en el modo Doppler bajo las condiciones de estrés inducidas por dobutamina. Después de que los picos de la arteria coronaria descendente anterior y la frecuencia cardíaca se hayan estancado durante el desafío, detenga la perfusión, retire el conjunto de infusión de la vena de cola y retire al animal de la plataforma. A continuación, utilice la herramienta de velocidad máxima para obtener las velocidades diastólicas máximas de las imágenes y calcular el índice de reserva de flujo coronario como la relación de la velocidad de flujo diastólica del pico de tensión de la arteria descendente anterior izquierda a la velocidad de flujo diastólica descendente izquierda en reposo.
Usando una fuente de luz de fibra óptica, intuba la rata con un catéter IV de calibre 18 y conéctese al catéter a un respirador. A continuación, utilice un 8-0 sutura monofilamento para ligar la arteria descendente anterior izquierda a través de una abertura de 15 milímetros en el quinto espacio intercostal con un nudo liso durante 30 minutos. Al final del período de isquemia, confirme visualmente la isquemia a través de la decoloración de la superficie del corazón y libere la ligadura.
La reperfusión se puede verificar por el enrojecimiento de la zona previamente decolorada del músculo cardíaco. 72 horas después de la cirugía, medir el flujo coronario y la reserva de flujo coronario como se ha demostrado, y comparar las mediciones con las obtenidas antes de la lesión. En este experimento representativo, antes de la cirugía de reperfusión de isquemia, el resto de la velocidad de la arteria coronaria descendente anterior se midió como aproximadamente 423 milímetros por segundo a más del doble de la velocidad después de la perfusión de dobutamina.
72 horas después de la reperfusión de isquemia, el reposo dejó la velocidad de la arteria coronaria descendente anterior fue significativamente mayor en comparación con la velocidad de la arteria coronaria descendente anterior en reposo antes de la cirugía. La respuesta al estrés a una prueba de dobutamina después de la lesión se redujo significativamente en comparación con la respuesta antes de las respuestas a la cirugía. La reserva de flujo coronario se calcula como la relación de la velocidad de flujo máxima durante el estrés a la velocidad de flujo en reposo y fue aproximadamente 2.1 en ratas jóvenes antes de la cirugía, pero se redujo significativamente 72 horas después de la lesión.
Además, no hubo cambios significativos en la función sistólica del ventrículo izquierdo 72 horas después de la lesión. Después de su desarrollo, esta técnica permitirá a los investigadores explorar y utilizar imágenes por ultrasonido de arterias coronarias en modelos animales pequeños que imitan con precisión las condiciones de la enfermedad humana. Después de ver este video, usted debe tener una muy buena comprensión de cómo medir el flujo sanguíneo coronario y evaluar la microcirculación coronaria en un modelo de enfermedad cardíaca animal pequeño.
