BKM es apoyado por el Instituto Nacional de Salud (NIH) / Nacional del Corazón Pulmón y Sangre (NHLBI) de subvención (R01-HL085487). MH es apoyada por la Asociación Americana del Corazón Nacional (AHA) Desarrollo Científico Grant (SDG) y la Sociedad de Cardiología Geriátrica.

1. Preparación del área de trabajo <ol><li> La superficie de trabajo es el primero elaborado por la desinfección del área con el 70% de etanol. </li><li> Todos los instrumentos quirúrgicos deben esterilizarse con un esterilizador de calor de cuentas antes de la cirugía (y en medio de cirugías rata individual). Estos instrumentos son: tijeras quirúrgicas (2), fórceps (1), pinzas curvas (1), titular de la aguja (2), y un rectractor pecho. </li><li> Gasa de algodón y aplicadores deben estar disponibles para el manejo del sangrado. </li><li> Ajuste la temperatura de un sistema general homeotermos (paño caliente), que se utiliza para mantener la temperatura corporal de los animales a 37 ± 1 ° C, con el fin de evitar una caída dramática de la temperatura corporal, el tamaño del infarto depende de la la duración de la oclusión, así como la temperatura corporal (Tarnavski et al.). </li><li> Antes de la anestesia, cada animal recibirá una dosis de buprenorfina (0.1-2.5 mg / kg vía subcutánea) y tabletas orales carprofeno (Rimadyl, Bioserv tableta, una tableta) el día antes de la cirugía. En el momento inmediatamente anterior a la cirugía, cada animal volverá a recibir una dosis de buprenorfina (0,1 hasta 2,5 mg / kg vía subcutánea). </li><li> Nota: Para estudios que envuelve la evaluación de la función cardiaca y el remodelado cardíaco durante un período de tiempo (7 - a 28 días y más allá), una dosis de buprenorfina (0.1-2.5 mg / kg SC) será administrada cada 6 horas después de la cirugía durante 24-48 horas después de la cirugía y carprofeno tabletas orales se darán una vez al día (ver &quot;recuperación post-operatoria&quot;). </li></ol> 2. Preparación y la intubación de las ratas <ol><li> Antes de la inducción de la anestesia, los animales serán examinados para identificar las condiciones pre-existentes que pueden complicar el resultado quirúrgico, el examen físico incluirá la inspección visual y la medición de la frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria y la temperatura corporal y el peso corporal. </li><li> Si los animales están determinados a estar sano, 250-300 gramos de ratas macho (Sprague Dawley, por ejemplo) será pesado y características de identificación será grabada. </li><li> Las ratas se anestesiaron con 80 mg / kg de pentobarbital, el nivel correcto de la anestesia se verifica a través de la respuesta de retirada del miembro mediante la aplicación de la presión del lecho de la uña de rata (dedo del pie-una pizca de reflejos) y periódicamente durante todo el procedimiento. </li><li> La buprenorfina (0,1 a 2,5 mg / kg, SQ) se administra en el momento de la cirugía. </li><li> Una máquina de afeitar eléctrica se utiliza para afeitarse la forma de piel de la zona del cuello y el pecho. Nota: Para estudios que envuelve la evaluación de la función cardiaca y el remodelado cardíaco durante un período de tiempo (7 - a 28 días y más allá), la piel debe estar completamente afeitado de la zona quirúrgica para mantener la esterilidad. </li><li> Las áreas de afeitado deben ser lavados y desinfectados con una solución de betadine siguió limpiando la zona con alcohol al 70%, lo que betadine y fregar el alcohol y el procedimiento de desinfección se debe repetir tres veces. </li><li> El animal anestesiado se coloca en posición supina sobre un sistema general homeotermos (paño caliente) con el fin de mantener la temperatura corporal. </li><li> La intubación endotraqueal se realiza entonces por primera cuidadosamente la exposición de la tráquea, para mejorar la visualización de la intubación, haciendo una media de 5 mm del cuello la incisión y la retracción del tejido muscular, justo por encima de la tráquea. </li><li> Esto permite una mejor visualización de la inserción del tubo endotraqueal (tamaño de polietileno de 90, PE 90), donde se bisela el tubo en el borde para facilitar la entrada, a través de la laringe. </li><li> El tubo endotraqueal se inserta en la tráquea, con la visualización de la ayuda de un microscopio quirúrgico estéreo, por la manipulación cuidadosa de la lengua mientras se observa la tráquea y la entrada del tubo endotraqueal. </li><li> La ventilación mecánica es entonces logra conectando el tubo endotraqueal a Kent Científico ventilador (TOPO Modo Dual) en bicicleta a 80 respiraciones por minuto y un volumen corriente de 1,2 ml por cada 100 gramo de peso corporal. </li><li> Un campo estéril se coloca sobre la rata, dejando sólo el área quirúrgica expuesta, reduciendo así al mínimo la posible contaminación durante la operación. </li><li> El cirujano de los animales y los asistentes deben llevar mascarilla, bata y guantes, con guantes se cambia entre las cirugías rata individual. </li></ol> 3. Transitoria descendente anterior izquierda (LAD) Ligadura <ol><li> Una vez que se establece la respiración constante, se abre el pecho a la izquierda del cuarto espacio intercostal, mediante el uso de pinzas hemostáticas y tijeras ronda final para abrir el espacio, pero sin cortar el tejido de manera que el riesgo de sangrado puede ser reducido. </li><li> Un retractor en el pecho se coloca entonces en el cuarto espacio intercostal, con el fin de separar las costillas para que el ventrículo izquierdo (VI) se expone, teniendo cuidado máximo de no dañar el pulmón. </li><li> El pericardio se abre entonces, pero deja en su lugar si es posible. </li><li> La descendente anterior izquierda proximal (LAD) se identificaron (Figura 1), con el uso de lomicroscopio estereoscópico urgical, y el muchacho luego se ligan de forma transitoria (o puede ser atado con un nudo corredizo), utilizando una sutura de prolene 6-0 para un período de isquemia de 30 minutos (Figura 1), pero sin exteriorización del corazón. </li><li> Para permitir la reperfusión cardiaca, tijeras de microcirugía se utiliza para cortar el nudo de la ligadura (o soltando el nudo corredizo), mediante la sutura de prolene 6-0, 30 minutos después de la ligadura de la DA. </li><li> En el simulacro de control de ratas, el procedimiento es idéntico, salvo el muchacho no está ligado de forma transitoria. </li><li> La salida se hizo una breve (1-2 segundos) pellizcan en el respirador para que vuelva a la inflación de los pulmones. </li><li> El retractor se retira del pecho y las costillas se unen con una sutura de prolene 2-0 con un patrón de sutura interrumpida. </li><li> Una vez que las costillas se cierran, la salida del ventilador es de nuevo brevemente (1-2 segundos) pellizcó para garantizar una respiración adecuada. </li><li> La piel se cierra con sutura de prolene 6-0 con un patrón de sutura continua. </li></ol> 4. La confirmación de la ligadura de éxito de la DA <ol><li> La ligadura adecuada de la DA será confirmado por la observación de blanqueo de tejido de miocardio distal a la sutura, así como la disfunción de la pared anterior, como se observó durante la ligadura de LAD transitoria. </li><li> Reperfusión será verificada por el regreso de color rojo en el tejido del miocardio y la demostración de una cierta recuperación del movimiento de la pared anterior, como se observa inmediatamente después de la ligadura de LAD transitoria. </li><li> Nota: Para estudios que envuelve la evaluación de la función cardiaca y el remodelado cardíaco durante un período de tiempo (7 - a 28 días y más allá), un ecocardiograma se llevará a cabo 24 horas después de la ligadura de la DA, con el fin de determinar el alcance de la inducida infarto de miocardio. Todos los animales con un acortamiento fraccional del ventrículo izquierdo (LV FS) &lt;20%, determinado a partir de un ecocardiograma, así como la disfunción movimiento de la pared anterior de conformidad con el infarto, se identificarán y se utiliza para el seguimiento de la función cardiaca y estudios de remodelación. Sham ratas de control se espera que tengan un normal FS LV entre 40-45% (del Monte y otros). </li></ol> 5. Recuperación post-operatoria <ol><li> Una vez terminada la cirugía, el campo estéril sobre el animal será eliminado. La temperatura del cuerpo (con un termómetro rectal), la frecuencia respiratoria (por inspección visual), la frecuencia cardíaca (por palpitaciones), y las señales anormales de dolor se deben controlar hasta que el animal se convierte en ambulatorios. </li><li> La rata se retira del ventilador y luego ser colocado en una jaula para animales y se les permite recuperarse de la anestesia. En esta jaula, uno de los extremos de la caja se calienta una compresa caliente para permitir la rata para buscar calor. Además, el agua estará a disposición de la rata durante el período de observación. </li><li> Si aparecen signos de deshidratación se observan después de la cirugía, 0,5 ml de solución salina estéril se inyecta por vía intraperitoneal (IP). </li><li> La buprenorfina (0,1 a 2,5 mg / kg, SQ) será administrada inmediatamente después de la cirugía, y durante la recuperación post-operatoria. </li><li> Nota: Para estudios que envuelve la evaluación de la función cardiaca y el remodelado cardíaco durante un período de tiempo (7 - a 28 días y más allá), una dosis de buprenorfina (0.1-2.5 mg / kg SC) será administrada cada 6 horas después de la cirugía durante 24-48 horas después de la cirugía. Tabletas orales de carprofeno (Rimadyl, Bioserv comprimido) también se proporcionará (1 comprimido al día) durante al menos 48 horas después de la cirugía. </li></ol> 6. La evaluación histológica de la isquemia reperfusión <ol><li> Tras la finalización del período de reperfusión de 4 horas, las ratas se anestesiaron de nuevo con 80 mg / kg de pentobarbital y el muchacho se liga de nuevo (o el nudo corredizo se puede retied) (Huang et al y Kaiser et al). </li><li> 1 ml de Evan 5% de azul (en buffer fosfato salino) se inyecta en la cámara del ventrículo derecho y permitió que para la perfusión de 2 minutos. </li><li> Después de 2 minutos, 1 ml de solución saturada de cloruro de potasio se inyecta en la cámara del ventrículo derecho con el fin de dejar que el corazón lata. </li><li> El corazón es entonces rápidamente eliminado, incrustado en agarosa al 2% de buffer fosfato salino, y luego se cortaron en rodajas de 1-2 mm. </li><li> El miocardio viable es finalmente se tiñe con cloruro de tetrazolio 2% trifenil (TTC) por 20 minutos y las imágenes de cada rebanada es capturado. Las imágenes se cuantificó con el fin de identificar la cantidad de área de miocardio: (1) que no en situación de riesgo es (secciones azules), (2) la zona en situación de riesgo (AAR, rojo y blanco las secciones), y (3 ) zona que está infartada (blanco &quot;sin mancha&quot;, las secciones) (Figura 2). </li></ol> 7. Resultados representante Para estudios que envuelve la evaluación del tamaño del infarto y el área en riesgo (AAR), por el colorante azul de Evans y cloruro de trifenil tetrazolio (TTC), después de 4 horas de la reperfusión, la ligadura adecuada de la ADA se puede confirmarmediante la observación de blanqueo de tejido de miocardio distal a la sutura, así como la disfunción de la pared anterior, como se observó durante la ligadura de LAD transitoria. Reperfusión puede ser verificada por el regreso de color rojo en el tejido del miocardio y la demostración de una cierta recuperación del movimiento de la pared anterior, observa inmediatamente después de la ligadura de LAD transitoria. Para estudios que envuelve la evaluación de la función cardiaca y el remodelado cardíaco durante un período de tiempo (7 - a 28 - día y más allá), la ligadura adecuada de la isquemia seguida de reperfusión puede ser confirmado por el blanqueo del tejido, la disfunción de la pared anterior y el regreso de color rojo con una cierta recuperación del movimiento de la pared tras la reperfusión. Además, la función cardiaca puede ser determinada por un ecocardiograma que se realiza 24 horas después de la ligadura de la DA, con el fin de determinar el alcance de la inducida por infarto de miocardio. Todos los animales con un acortamiento fraccional del ventrículo izquierdo (LV FS) &lt;20%, determinado a partir de un ecocardiograma, así como la disfunción movimiento de la pared anterior de conformidad con el infarto, se identificarán y se utiliza para el seguimiento de la función cardiaca y estudios de remodelación. Sham ratas de control se espera que tengan un normal FS LV entre 40-45% (del Monte). <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Diagrama esquemático de un infarto de miocardio y la ligadura de LAD. Representación esquemática de (1) infarto de miocardio y (2) la ligadura de la anterior ventricular izquierda descendiente (LAD) con una sutura, que se utiliza para imitar el infarto de miocardio causado por la formación de la peste. <img src="/files/ftp_upload/2464/2464fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. Imagen representativa de un corazón de rata tras el IAM. Imagen representativa del corazón de rata que muestra la zona en azul (no ocluido zona de perfusión coronaria), área en rojo (zona de perfusión coronaria ocluida, indicando el área en riesgo (AAR) para el infarto, y el área en blanco / amarillo (zona infartada dentro de la AAR).

<ol>
	<li>Hunt, S. A., Baker, D. W., Chin, M. H., Cinquegrani, M. P., Feldmanmd, A. M., Francis, G. S., Ganiats, T. G., Goldstein, S., Gregoratos, G., Jessup, M. L., Noble, R. J., Packer, M., Silver, M. A., Stevenson, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SC.ACC/AHA+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Chronic+Heart+Failure+in+the+Adult:+Executive+Summary+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology/American+Heart+Association+Task+Force+on+Practice+Guidelines+(Committee+to+Revise+the+1995+Guidelines+for+the+Evaluation+and+Management+of+Heart+Failure).">SC.ACC/AHA Guidelines for the Evaluation and Management of Chronic Heart Failure in the Adult: Executive Summary A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines (Committee to Revise the 1995 Guidelines for the Evaluation and Management of Heart Failure).</a> Circulation. 104, 2996-3007 (2001).</li><li>Goldman, S., Raya, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+infarct+model+of+myocardial+infarction+and+heart+failure.">Rat infarct model of myocardial infarction and heart failure.</a> J Card Fail. 1, 169-177 (1995).</li><li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., &amp;amp, I. z. u. m. o., S, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+cardiac+surgery:+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies.">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16, 349-360 (2004).</li><li>Thygesen, K., Alpert, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Universal+Definition+of+Myocardial+Infarction.">Universal Definition of Myocardial Infarction.</a> Circulation. 116, 2634-2653 (2007).</li><li>Vasilyev, N., Williams, T., Brennan, M. L., Unzek, S., Zhou, X., Heinecke, J. W., Spitz, D. R., Topol, E. J., Hazen, S. L., Penn, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myeloperoxidase-generated+oxidants+modulate+left+ventricular+remodeling+but+not+infarct+size+after+myocardial+infarction.">Myeloperoxidase-generated oxidants modulate left ventricular remodeling but not infarct size after myocardial infarction.</a> Circulation. 112, 2812-2820 (2005).</li><li>McConnell, B. K., Popovic, Z., Mal, N., Lee, K., Bautista, J., Forudi, F., Schwartzman, R., Jin, J. P., Penn, M., Bond, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disruption+of+protein+kinase+A+interaction+with+A-kinase-anchoring+proteins+in+the+heart+in+vivo:+effects+on+cardiac+contractility,+protein+kinase+A+phosphorylation,+and+troponin+I+proteolysis.">Disruption of protein kinase A interaction with A-kinase-anchoring proteins in the heart in vivo: effects on cardiac contractility, protein kinase A phosphorylation, and troponin I proteolysis.</a> J Biol Chem. 284, 1583-1592 (2009).</li><li>Monte, D. e. l., Butler, F., Boecker, K., Gwathmey, W., K, J., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+of+aortic+banding+followed+by+gene+transfer+during+hypertrophy+and+heart+failure.">Novel technique of aortic banding followed by gene transfer during hypertrophy and heart failure.</a> Physiol. Genomics. 9, 49-56 (2002).</li><li>Huang, M. H., Nguyen, V., Wu, Y., Rastogi, S., McConnell, B. K., Wijaya, C., Uretsky, B. F., Poh, K. K., Tan, H. C., Cheng, J., Perin, E., Fujise, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+Infarct+Size+Reduction+by+Combination+Therapy+with+Milrinone+and+Esmolol+at+Early+Reperfusion+during+Acute+Myocardial+Infarction.">Synergistic Infarct Size Reduction by Combination Therapy with Milrinone and Esmolol at Early Reperfusion during Acute Myocardial Infarction.</a> American Journal of Physiology. , .</li><li>Kaiser, R. A., Bueno, O. F., Lips, D. J., Doevendans, P. A., Jones, F., Kimball, T. F., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+inhibition+of+p38+mitogen-activated+protein+kinase+antagonizes+cardiac+injury+and+cell+death+following+ischemia-reperfusion+in+vivo.">Targeted inhibition of p38 mitogen-activated protein kinase antagonizes cardiac injury and cell death following ischemia-reperfusion in vivo.</a> J Biol Chem. 279, 15524-15530 (2004).</li></ol>

Un infarto agudo de miocardio (IAM) en las ratas, también se conoce como isquemia-reperfusión (IR), es comúnmente utilizado para imitar el remodelado ventricular humanos que conducen a la insuficiencia cardíaca. La progresión de la disfunción ventricular izquierda e insuficiencia cardiaca en modelos animales (ratas y ratones) es similar a la observada en los seres humanos que sufren un infarto de miocardio, sobrevivir y posteriormente desarrolla insuficiencia cardiaca (Goldman). Este procedimiento que se describe ...

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		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Ventilator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Kent Scientific</td>
<td>TOPO</td>
<td>TOPO Dual Mode</td>
</tr>
<tr>
<td>Thermostatic Circulator E103</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>732802</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Homeothermic Blanket System</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>55-7222F</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stereo Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon Instruments</td>
<td>MMA36300</td>
<td>SMZ-645 Zoom Stereo Microscope</td>
</tr>
<tr>
<td>Hot Bead Sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Harvard Apparatus</td>
<td>610183</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Electric Shaver</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>General Electric</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Blades and Handles</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>WelchAllyn</td>
<td>690047-1</td>
<td>Standard (Lamp) Laryngoscope Blades</td>
</tr>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14014-17</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Surgical Scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>14072-10</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11028-15</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Curved Forceps</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>11001-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>12004-18</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Needle Holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>91201-13</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chest Retractor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>17008-07</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Masks</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>VWR </td>
<td>47730-640</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gauze Sponges</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Dermacea</td>
<td>441205</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile Gloves</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Cardinal Health</td>
<td>2D7203I</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>PE 90 tubing</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>427420</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>20 ml Syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>BD</td>
<td>301625</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>6-0 Prolene Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>8706H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2-0 Silk Suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ETHICON</td>
<td>K873H</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pentobarbital Sodium Injection</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>OVATION</td>
<td>NDC 67386-501-55</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Povidone-Iodine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>NOVAPLUS</td>
<td>V10-8204</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Buprenorphine</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Pharmaceuticals Inc.</td>
<td>NDC 12496-0757-1</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

acute myocardial infarction in rats

Con insuficiencia cardíaca principal causa de muerte en los EE.UU. (Hunt), la investigación biomédica es fundamental para avanzar en los tratamientos médicos para enfermedades cardiovasculares. Los modelos animales que imitan a las enfermedades cardíacas humanas, tales como infarto de miocardio (MI) y la isquemia-reperfusión (IR) que induce la insuficiencia cardíaca, así como la presión de sobrecarga (constricción de la aorta transversa) que induce la hipertrofia cardiaca e insuficiencia cardiaca (Goldman y Tarnavski), son modelos útiles para estudiar la enfermedad cardiovascular. En particular, la isquemia de miocardio (IM) es una causa importante de morbilidad y mortalidad cardiovascular a pesar de controlar ciertos factores de riesgo tales como la arteriosclerosis y los tratamientos a través de la intervención quirúrgica (Thygesen). Por otra parte, una pérdida aguda del miocardio después de isquemia miocárdica (MI) se traduce en aumento de las condiciones de carga que induce el remodelado ventricular de la zona fronteriza del infarto del miocardio y el mando a distancia no infartada. Apoptosis de miocitos, necrosis y el consiguiente aumento de la carga hemodinámica activar múltiples de señalización bioquímica intracelular que inicia la dilatación del VI, hipertrofia, distorsión de la forma ventricular, y la formación de la cicatriz de colágeno. Esta remodelación patológica y la falta de normalización de la pared del aumento del estrés resulta en la dilatación progresiva, el reclutamiento de la zona fronteriza de miocardio en la cicatriz, y, finalmente, el deterioro de la función contráctil del miocardio (es decir fallo del corazón). La progresión de la disfunción ventricular izquierda e insuficiencia cardiaca en ratas es similar a la observada en los pacientes que sufren un infarto de miocardio grande, sobrevivir y posteriormente desarrolla insuficiencia cardiaca (Goldman). El infarto agudo de miocardio (IAM), modelo en ratas se ha utilizado para imitar la enfermedad cardiovascular humana, específicamente utilizado para estudiar los mecanismos de señalización cardiaca asociada con la insuficiencia cardíaca, así como para evaluar la contribución de las estrategias terapéuticas para el tratamiento de la insuficiencia cardíaca. El método descrito en este informe es el modelo de rata con infarto agudo de miocardio (IAM). Este modelo también se conoce como cardiomiopatía isquémica aguda o isquemia seguida de reperfusión (IR), que es inducida por una aguda 30 minutos de período de isquemia de la ligadura de la arteria descendente anterior izquierda (LAD), seguido de la reperfusión del tejido por la liberación de la ligadura de LAD (Vasilyev y McConnell). Este protocolo se centrará en la evaluación del tamaño del infarto y la zona en situación de riesgo (AAR) de colorante azul de Evans y cloruro de trifenil tetrazolio (TTC), tras 4 horas de reperfusión; comentarios adicionales a la evaluación de la función cardíaca y la remodelación mediante la modificación de la duración de la reperfusión, también se presenta. En general, este modelo animal de ratas IAM es útil para estudiar las consecuencias de un infarto de miocardio en la función cardíaca fisiopatológicos y fisiológicos.

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Acute Myocardial Infarction in Rats

El modelo de rata con infarto agudo de miocardio (IAM) es útil para estudiar las consecuencias de un infarto de miocardio en la función cardíaca fisiopatológicos y fisiológicos.

Infarto agudo de miocardio en ratas

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Research

JoVE Journal

Medicine

52.5K vistas.  University of Texas Medical Branch. El modelo de rata con infarto agudo de miocardio (IAM) es útil para estudiar las consecuencias de un infarto de miocardio en la función cardíaca fisiopatológicos y fisiológicos.

Video: Acute Myocardial Infarction in Rats

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

La inducción de infarto de miocardio en adultos de pez cebra Uso de Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Investigación

Medicina

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Resonancia magnética y PET en modelos de ratón de infarto de miocardio

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Infarto de miocardio y la evaluación de resultados funcionales en los cerdos

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Mínimo procedimiento quirúrgico invasivo de inducir infarto de miocardio en ratones

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

La evaluación de resultado primaria en un modelo porcino de infarto agudo de miocardio

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

El infarto de miocardio en ratones recién nacidos, un modelo de regeneración cardiaca

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Análisis en tiempo real de presión-volumen del infarto agudo de miocardio en ratones

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Digital PCR for Quantifying Circulating MicroRNAs in Acute Myocardial Infarction and Cardiovascular Disease

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released from the cardiovascular cells into the circulation. Circulating miRNAs are highly stable and can be quantified. The quantitative expression of specific miRNAs can be linked to the pathology, and some miRNAs show high tissue and disease specificity. Finding novel biomarkers for cardiovascular diseases is of importance for medical research. Quite recently, digital polymerase chain reaction (dPCR) has been invented. dPCR, combined with fluorescent hydrolysis probes, enables specific direct absolute quantification. dPCR exhibits superior technical qualities, including a low variability, high linearity, and high sensitivity compared to the quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Thus, dPCR is a more accurate and reproducible method for directly quantifying miRNAs, particularly for the use in large multi-center cardiovascular clinical trials. In this publication, we describe how to effectively perform digital PCR in order to assess the absolute copy number in serum samples.

Circulating microRNAs have shown promise as biomarkers for cardiovascular diseases and acute myocardial infarctions. In this study, we describe a protocol for miRNA extraction, reverse transcription, and digital PCR for the absolute quantification of miRNAs in the serum of patients with cardiovascular disease.

Digital PCR para cuantificar la circulación MicroRNAs en infarto agudo de miocardio y enfermedades cardiovasculares

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Un modelo de criolesiones para estudiar el infarto de miocardio en el ratón

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Método invasivo semiseminal para inducir el infarto de miocardio en ratas y la evaluación de la función cardíaca mediante un sistema cardíaco de trabajo aislado

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...