Me gustaría presentar nuestro trabajo sobre la lesión hepática aguda inducida en ratas a través de la exposición a tetracloruro de carbono a través de tubo orogástrico. Seleccione ratas Sprague-Dawley machos adultos que pesen de 300 a 350 gramos. Proporcione comida de rata y agua ad libitum.
Realice todo el experimento entre las seis AM y las 12 PM. La comedia de cuidado animal de la Universidad Ben-Gurion del Negev, Israel aprobó todo el procedimiento de tratamiento y prueba utilizado en este protocolo. Mantenga las ratas a una temperatura ambiente de 22 grados Celsius con 12 horas de luces y 12 horas de oscuros. Cannula la vena de la cola con un catéter de calibre 22.
Recoger muestras de sangre al inicio. Los análisis bioquímicos en sangre incluyen la medición de GOT sérico, GPT y bilirrubina total. El examen de las enzimas hepáticas y el nivel total de bilirrubina se llevaron a cabo en el laboratorio bioquímico de Soroka Medical Center.
Precaución: la exposición a una alta concentración de tetracloruro de carbono, incluida la absorción de vapor o piel, puede afectar al sistema nervioso central, degenerar el hígado y el riñón, y la exposición prolongada puede conducir al coma o a la muerte. Preparar una solución del 50 por ciento de tetracloruro de carbono mezclado con aceite de oliva como vehículo en una proporción a una. Inducir la patotoxicidad in vivo mediante la administración de tetracloruro de carbono a través de un tubo orogástrico.
Inserte un tubo orogástrico a través de la cavidad oral de la rata. Exponer las ratas a diferentes dosis de tetracloruro de carbono. Un mililitro por kilo para lesiones hepáticas agudas leves, dos mililitros de cinco mililitros por kilo para lesiones hepáticas agudas moderadas, o cinco mililitros por kilo para lesiones hepáticas agudas graves.
Para el grupo falso, exponga las ratas a cinco mililitros por kilo sólo aceite de oliva. Recoger muestras de sangre a las 24 horas de la exposición al tetracloruro de carbono. Los análisis bioquímicos en sangre incluyen la medición de GOT sérico, GPT y bilirrubina total.
Coloque la rata muerta en la tabla de disección en recombinante dorsal con el abdomen mirando hacia arriba y afeite su abdomen. Usando bisturí, incise toda la longitud del ventrum desde el ano hasta la barbilla. Refleja la piel.
Con el bisturí, incitar la pared abdominal desde el ano hasta el cartílago xifoide para exponer las vísceras abdominales. Transfiera el hígado a un plato de petri. Realice una tinción de hematoxilina y eosina.
Examine las rodajas bajo aumento del microscopio de 200 veces con una longitud objetiva de 20 milímetros. La sección hepática debe ser calificada por un patólogo especializado, cegado al protocolo de tratamiento. La puntuación de cero indica que no hay anomalías hepáticas, uno a dos indica una lesión hepática leve, tres a cuatro indica una lesión hepática moderada y de cinco a seis indica una lesión hepática grave.
Los diversos grupos de ratas en diferentes momentos se muestran en el esquema. 24 horas después de inducir una lesión hepática aguda, hubo un aumento significativo en los niveles de GOT, GPT y bilirrubina total, dependiendo del tetracloruro de carbono expuesto en comparación con el grupo de control. El valor P era menor que cero punto cero cero uno.
Se observaron cambios histopatológicos después de 24 horas en todos los grupos después de la intoxicación por tetracloruro de carbono en varias dosis. La puntuación histológica a las 24 horas entre los tres grupos de intervención y el grupo de control fue significativamente mayor. El valor P era menor que cero punto cero cinco.
Nuestro grupo de investigación presentó el método común y físico de lesión hepática aguda inducida en ratas a través de la exposición a tetracloruro de carbono a través de tubo orogástrico. Este método se utiliza para investigar la fisiopatología de la lesión hepática aguda y para probar diferentes sobre la estrategia de protección. Muchas gracias por su atención.
