La insuficiencia mitral es una enfermedad de las válvulas común que conduce a la insuficiencia cardíaca. Este modelo de RMN de rata puede ayudar a promover nuestra comprensión de los mecanismos subyacentes de la insuficiencia cardíaca. Este modelo se puede utilizar para inducir la RMN en un corazón latiendo imitando la hemodinámica observada en pacientes con esta lesión de la válvula y haciendo este modelo clínicamente relevante.
La microcirugía y la experiencia de manejo ayudarán a replicar este protocolo y la familiaridad con las imágenes ecocardiográficas y la interpretación de imágenes son aspectos clave para la colocación exitosa de la aguja. Como se trata de una técnica guiada por imágenes, la demostración visual de los métodos puede ayudar a comprender el procedimiento. Después de realizar una toracotomía izquierda de acuerdo con los protocolos estándar en una rata Sprague-Dawley adulta anestesada de 350 a 400 gramos, utilice una sutura PROLENE 6-0 y un soporte de microneedle para colocar una sutura de cuerda de bolso en el ápice del ventrículo izquierdo.
Ata suavemente la sutura apical para estabilizar el ápice e inserta una aguja del calibre 23 enrojecida con solución salina y con un tapón en el extremo distal en el centro de la sutura de la cuerda del bolso y en la cavidad ventricular izquierda. Usando una mano para guiar la aguja de forma estable, utilice la otra mano para manipular simultáneamente la sonda de eco transesofágica para lograr una vista de eco óptima para visualizar la aguja. Mediante la guía por ultrasonido en tiempo real, avance la aguja hacia el lado ventricular del prospecto mitral anterior.
Una vez confirmada la posición de la aguja, avance la aguja en un movimiento fino a través del prospecto de la válvula. Una vez a través del prospecto, retraiga la aguja en la cámara ventricular izquierda lejos de la válvula mitral y haga que un asistente encienda imágenes Doppler de color para confirmar que la RMN ajusta la sonda de eco según sea necesario para obtener una mejor vista. Una vez confirmada la RMN, retraiga completamente la aguja de la cavidad ventricular izquierda y ate suavemente la sutura de cuerda de bolso.
Luego usa una gasa estéril para absorber cualquier sangre en el ápice y en la cavidad torácica. Después de cinco a 10 minutos de función cardíaca estable, utilice una sutura Vicryl interrumpida de 4-0 para aproximar las costillas mientras reduce el isoflurano a 2%Siguiente, inserte un tubo torácico en el sexto espacio intercostal y fije el tubo a las cortinas estériles para evitar el avance involuntario del tubo en la cavidad torácica, luego termine de aproximar las costillas. Utilice una sutura continua para cerrar la capa muscular con el isoflurano al 1,5% y la capa de la piel con el isoflurano al 1%Conecte una jeringa con punta de válvula de bloqueo Luer de 10 mililitros al tubo torácico y drene de 10 a 12 mililitros de aire de la cavidad torácica antes de extraer el tubo.
Una vez que se extraiga el tubo, administre una dosis subcutánea final de carprofeno. Después de apagar el isoflurano, continúe con la ventilación mecánica mientras la rata desteta de la anestesia monitoreando los signos vitales. Al inicio de la respiración espontánea, apague la ventilación para probar la capacidad de la rata para mantener dicha respiración y una buena saturación periférica de oxígeno de la cavidad.
Una vez que la rata es capaz de mantener los niveles de saturación de oxígeno capilar periférico sin la ventilación, cortar las suturas de anclaje al tubo endotraqueal y extubar al animal. Cuando la rata esté ambulatoria, transfiera al animal a una jaula limpia con ropa de cama mínima y continúe monitoreando los signos vitales con un monitor de saturación de oxígeno capilar periférico de mano. Dentro de las tres horas de la vigilia, administrar buprenorfina.
Dos semanas después de la cirugía, coloque la rata anestesiada en la posición de decúbito derecho e inserte una sonda de ultrasonido intracardiaca de ocho megahercios 8 franceses con una pequeña cantidad de gel aplicado a la punta en el esófago del animal. Usando imágenes Doppler de color en la vista de dos cámaras, visualice el ventrículo izquierdo y la aurícula izquierda y mida el área de la aurícula izquierda y el chorro de RM para permitir el cálculo de la fracción de área de chorro de RM como se indica. Para aproximar el área del orificio regurgitante, utilice el diámetro exterior de la aguja para calcular el área de la aguja del calibre 23 utilizando la fórmula.
Obtenga imágenes Doppler de onda continua con la puerta Doppler en el orificio del chorro regurgitante y trace la forma de onda para calcular el tiempo de velocidad integral del chorro regurgitante. Utilice la fórmula para estimar el volumen de MR. A continuación, gire la sonda de eco lateralmente en el sentido de las agujas del reloj para obtener imágenes Doppler de onda de pulso de la vena pulmonar y mida las velocidades de onda sistólica y diastólica utilizando la ecuación para calcular la relación.
En estas imágenes, se puede observar la dirección de la aguja a medida que se inserta en la válvula mitral. Aquí, el orificio dejado en el prospecto de la válvula mitral en una rata representativa explantada a las dos semanas después de que se muestre el procedimiento. A las dos semanas posteriores a la cirugía, los corazones de las ratas con RMN son esféricos y severamente dilatados y un chorro de RM vívido es evidente con un área promedio de aproximadamente 21 milímetros cuadrados y un tiempo de velocidad media integral de unos 40 centímetros.
La fracción de RM normalizada es típicamente alrededor del 42%, que se considera grave de acuerdo con las directrices de la Sociedad Americana de Ecocardiografía. La gravedad de la RMN es adecuada para inducir la reversión del flujo pulmonar con una disminución en la relación sistólico/diastólico de aproximadamente 0,9 al inicio a aproximadamente menos 0,7 a las dos semanas. La imagen en tiempo real con ecocardiografía transesofágica y la introducción de una aguja en el corazón latiendo para perforar el foliolo mitral es un procedimiento quirúrgico factible que se puede enseñar.
Nuestro modelo se puede combinar con cardiomiopatías ventriculares para estudiar la remodelación cardíaca y facilita la investigación del impacto de la aparición temprana frente a la aparición tardía de la RMN en la remodelación cardíaca.
